流式细胞仪抗体储存指南：延长抗体使用寿命和实验准确性
流式细胞仪抗体储存指南：延长抗体使用寿命和实验准确性
引言
流式细胞术是一种强大的技术，用于表征细胞群。抗体在流式细胞术中至关重要，因为它们可以特异性识别特定靶标蛋白。然而，抗体是脆弱的分子，需要适当储存以保持其活性。本文将提供一份详尽的流式细胞仪抗体储存指南，以延长抗体的使用寿命并确保实验的准确性。
1. 储存条件
温度：大多数抗体应储存在 2-8°C 的冰箱中。一些抗体可能需要更冷的温度（-20°C 或 -80°C），具体取决于抗体的类型和制造商的建议。
光照：抗体对光敏感，因此应储存在避光的地方。使用不透明容器或在冰箱中用铝箔包裹抗体，以防止光降解。
冻融循环：冻融循环会破坏抗体，因此应将抗体重新冷冻的次数限制在最低限度。取用抗体时，让抗体在 4°C 以下的温度下解冻，并避免反复冻融。
2. 抗体复溶
稀释剂：抗体应复溶在缓冲液中，缓冲液中含有稳定剂，如牛血清白蛋白 (BSA) 或明胶。避免使用含有防腐剂的稀释剂，因为防腐剂可能会影响抗体的活性。
体积：复溶抗体时，应使用较小的体积，以使抗体尽快溶解并避免稀释。
涡旋混匀：复溶抗体时，应轻轻涡旋混匀，避免过度混匀，因为过度混匀可能会破坏抗体。
3. 抗体浓缩
离心法：可以使用离心法浓缩抗体。将抗体样品在离心管中高速离心，抗体将沉淀在管底。小心吸取上清液，以去除多余的缓冲液。
色谱法：也可以使用色谱法浓缩抗体。抗体样品被加载到色谱柱上，不同的分子根据其大小和亲和力被分离。纯化的抗体可以从色谱柱中洗脱。
4. 抗体稳定剂
牛血清白蛋白 (BSA)：BSA 是一种蛋白质，可以稳定抗体并防止非特异性结合。
明胶：明胶是一种多糖，具有类似于 BSA 的稳定作用。
蔗糖：蔗糖是一种糖，可以防止抗体冻融时形成冰晶。
甘油：甘油是一种多元醇，可以防止抗体在低温下变性。
5. 抗体污染
细菌污染：抗体样品可能会被细菌污染，导致抗体降解。为了防止细菌污染，应使用无菌技术复溶和储存抗体。
内毒素污染：内毒素是革兰氏阴性细菌的细胞壁成分，可以激活免疫反应并破坏抗体。为了避免内毒素污染，应使用低内毒素的试剂和设备。
6. 储存时间
抗体的储存时间取决于多个因素，包括抗体的类型、储存条件和是否复溶。一般来说，未复溶的抗体可在 2-8°C 的冰箱中储存数月至数年。复溶后的抗体应在 2-8°C 下储存几周至几个月，具体取决于抗体的类型和使用情况。
7. 储存建议
对于长期储存，将抗体原液或复溶抗体分装到小别针管中，以防止频繁冻融。
在分装抗体时，给每个别针管贴上标签，包括抗体名称、批号、浓度和储存日期。
定期监测抗体的活性，以确保其稳定性。
如果抗体的活性下降，应丢弃抗体并重新购买新鲜的抗体。
标签： 细胞储存管理
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