白细胞在 PBS 中的储存:关键原则和最佳实践
白细胞在 PBS 中的储存:关键原则和最佳实践
引言
白细胞,也称为白血球,是人体的免疫细胞,在对抗感染和疾病方面发挥着至关重要的作用。储存白细胞对于生物医学研究、临床应用和再生医学至关重要。磷酸盐缓冲液 (PBS) 是一种常用的缓冲液,可用于储存白细胞,因为它可以保持其结构和功能完整性。本文将探讨白细胞在 PBS 中储存的关键原则和最佳实践。
1. PBS 的组成
PBS 是一种水性缓冲液,通常由以下成分组成:
氯化钠 (NaCl)
磷酸二氢钾 (KH?PO?)
磷酸氢二钠 (Na?HPO?)
氯化钾 (KCl)
PBS 的 pH 值通常调整为 7.2-7.4,以匹配生理条件。
2. 白细胞的制备
在储存白细胞之前,必须对其进行适当的制备:
分离:从全血或组织样本中分离白细胞,可以使用离心或密度梯度分离等方法。
洗涤:用 PBS 洗涤白细胞,以去除血清和其他成分。
浓缩:通过离心浓缩白细胞悬液,达到所需的细胞浓度。
3. 储存条件
储存白细胞时,必须考虑以下条件:
温度:白细胞在 4°C 下储存时最稳定。
溶液:PBS 中储存白细胞,浓度为 1-10×10^6 个细胞/mL。
防冻剂:如果储存时间较长,可以在 PBS 中加入防冻剂,如二甲基亚砜 (DMSO) 或甘油。
4. 储存时间
白细胞在 PBS 中的储存时间取决于多种因素,包括细胞类型、储存条件和防冻剂的使用。一般来说:
短期储存:未加入防冻剂的白细胞可以在 PBS 中储存 24-48 小时。
长期储存:加入防冻剂的白细胞可以在 PBS 中储存数月甚至数年。
5. 储存后的白细胞处理
储存后的白细胞在使用前需要进行适当的处理:
解冻:如果使用防冻剂,必须将细胞快速解冻,并用 PBS 洗涤以去除解冻液。
评估活力:解冻后,应评估白细胞的活力,以确保其功能完整性。
培养:如果需要,白细胞可以在适当的培养基中培养。
6. 最佳实践
储存白细胞时遵循以下最佳实践可优化细胞的存活率和功能:
使用新鲜制备的 PBS。
使用无菌技术进行所有操作。
选择适当的细胞浓度和储存温度。
定期监测白细胞的活力。
根据细胞类型和储存时间选择合适的防冻剂。
结论
在 PBS 中储存白细胞对于生物医学研究、临床应用和再生医学至关重要。通过遵循本文概述的关键原则和最佳实践,可以确保白细胞在储存过程中保持其结构和功能完整性。适当的储存和处理对于确保白细胞在预期应用中的有效性至关重要。
标签: 细胞储存的科学原理
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