外周血造血干细胞:采集、制备与储存
外周血造血干细胞:采集、制备与储存
一、外周血造血干细胞(PBSC)及其重要性
造血干细胞(HSC)是一种多能干细胞,负责产生所有血细胞。外周血中含有少量的HSC,称为外周血造血干细胞(PBSC)。PBSC的采集和储存对于移植医学至关重要,因为它为各种血液疾病和恶性肿瘤的治疗提供了替代性的造血干细胞来源。
二、PBSC采集
1. 动员:使用格司亭(G-CSF)或其他细胞因子来刺激骨髓中PBSC释放到外周血。
2. 采集:使用白细胞分离术(WBC)或血细胞分离术(PBS)从外周血中分离PBSC。WBC使用离心机分离PBSC,而PBS使用亲和层析技术。
3. 质量控制:采集的PBSC经过形态学分析和流式细胞术检测,以评估其数量和活性。
三、PBSC制备
1. 红细胞去除:使用红细胞沉淀法或白蛋白密度梯度离心法去除红细胞。
2. 纯化:使用抗体偶联磁珠或流式分选对PBSC进行进一步的纯化。
3. 质量控制:纯化的PBSC再次进行形态学分析和流式细胞术检测,以确保其纯度和活性。
四、PBSC储存
1. 冷冻保存:PBSC悬浮在冷冻保护剂中,然后缓慢冷冻至-80°C。
2. 液氮储存:PBSC在液氮中储存,温度保持在-196°C。在这种条件下,PBSC可以长期储存,而不会丧失活性。
3. 质量控制:储存的PBSC定期进行解冻测试和活率评估,以确保其功能。
五、PBSC移植
1. 条件处理:患者接受化疗和/或放疗,以清除其自体造血干细胞并为移植做准备。
2. 移植:将储存的PBSC解冻并输注给患者。PBSC在患者体内迁移至骨髓并恢复造血功能。
六、PBSC移植的优势
1. 采集方便:与骨髓穿刺术相比,PBSC采集相对简单且非侵入性。
2. 快速恢复:由于PBSC采集后不会对供者造成严重的骨髓损伤,因此供者可以较快地恢复。
3. 移植并发症少:PBSC移植通常具有较低的移植物抗宿主病(GVHD)风险,这是骨髓移植的常见并发症。
4. 多次移植:PBSC可以从同一供者多次采集,这对于需要重复移植的患者非常有用。
七、结论
外周血造血干细胞的采集、制备与储存对于移植医学至关重要。通过PBSC移植,血液疾病和恶性肿瘤患者可以获得替代性的造血干细胞来源,从而为其提供了治愈或长期缓解的机会。随着技术进步和对PBSC生物学的深入了解,PBSC移植的应用范围和成功率将会不断提高。
标签: 细胞储存保鲜的应用领域
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