液相液氮储存：细胞储存的黄金标准
液相液氮储存：细胞储存的黄金标准
1. 液相液氮储存的原理
液相液氮储存是一种细胞冷冻保存技术，利用液态液氮将细胞冷却到极低温（-196°C）。液态液氮充当一种惰性保护剂，抑制细胞内的所有化学反应和新陈代谢过程。这种状态称为玻璃化，其中细胞结构被保留，但水分被去除。
2. 液相液氮储存的优势
液相液氮储存提供了许多优势，使其成为细胞储存的黄金标准：
- 可逆性：细胞在玻璃化状态下可以冷冻和解冻，而不会造成损害。
- 长期保存：细胞可以在液相液氮中储存多年甚至几十年，而不会明显丧失活性。
- 高生存率：使用适当的冷冻和解冻方案，细胞在复苏后的生存率很高，通常超过 90%。
- 方便性：液相液氮易于运输和储存，在全球范围内都可以获得。
3. 液相液氮储存的步骤
液相液氮储存涉及以下主要步骤：
- 预备：收集细胞并制备冷冻悬浮液。
- 冷冻：使用控制速率冷冻器将细胞悬浮液缓慢冷却至 -80°C。
- 玻璃化：加入冷冻保护剂并快速冷却细胞至 -196°C 液态液氮。
- 储存：将玻璃化的细胞存储在液相液氮中。
4. 液相液氮储存的注意事项
为了确保成功和安全的细胞储存，有几个注意事项需要考虑：
- 冷冻保护剂的选择：选择合适的冷冻保护剂对于维持细胞活性至关重要。
- 冷冻速率：控制速率冷冻对于避免细胞损伤至关重要。
- 储存温度：细胞必须始终储存在 -196°C 液态液氮中，以保持玻璃化状态。
- 复苏：使用适当的复苏方案以最大限度地提高细胞生存率至关重要。
5. 液相液氮储存的应用
液相液氮储存广泛用于各种生物医学应用，包括：
- 干细胞储存：保存用于研究和再生医学的干细胞。
- 配子储存：保存卵子和精子用于辅助生殖技术。
- 组织储存：保存用于移植或研究的组织样本。
- 生物制品储存：保存疫苗、蛋白质和 DNA 等生物制品。
6. 结论
液相液氮储存是一种经过验证且可靠的方法，用于长期保存细胞和其他生物材料。通过遵循适当的程序并考虑相关的注意事项，可以实现高生存率和维持细胞活性的长期储存。作为细胞储存的黄金标准，液相液氮储存继续在生物医学研究和临床应用中发挥着至关重要的作用。
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