储存细胞的冻存方法视频教程
储存细胞的冻存方法视频教程
1. 简介
细胞冻存是保存活细胞的一种重要技术，用于研究、医疗和工业应用。正确的冻存方法对于保持细胞活力和功能至关重要。莱利赛生物提供了一系列视频教程，演示了储存细胞冻存的最佳实践。
2. 材料
细胞悬液
冻存液（通常含有二甲基亚砜）
低温冷冻管或安瓿
冰块
干冰
液氮罐
3. 步骤
3.1 准备细胞悬液
收集细胞并通过离心收集细胞沉淀。
用新鲜培养基重悬细胞，密度为 1-5 x 10^6 个细胞/毫升。
3.2 添加冻存液
缓慢将冻存液加入细胞悬液中，轻轻涡旋混匀。
遵循冻存液制造商的说明，确定最佳的冻存液与细胞比例。
3.3 分装
将细胞悬液分装到低温冷冻管或安瓿中。
留出足够的顶部空间，以容纳冻结过程中发生的膨胀。
3.4 初始冷冻
将分装好的细胞放置在 -80°C 冰箱中过夜。
这将逐渐降低细胞的温度并防止冷冻损伤。
3.5 最终冻存
将细胞从 -80°C 冰箱转移到装有干冰的较大容器中。
保持细胞置于干冰中至少 24 小时。
干冰将细胞的温度降低到 -70°C 至 -80°C。
3.6 液氮储存
将细胞从干冰转移到液氮罐中。
液氮的温度为 -196°C，可以长期保存细胞。
4. 解冻
从液氮罐中取出细胞。
将细胞迅速解冻，方法是将其浸入 37°C 水浴中。
轻轻涡旋以均匀解冻。
一旦细胞解冻，将其稀释到新鲜培养基中。
5. 恢复
将解冻的细胞培养在适当的培养基中。
监测细胞的活力和增殖。
通常需要几天时间才能让细胞完全恢复。
6. 常见问题解答
细胞冻存的最佳温度是多少？
- 液氮的温度为 -196°C，是储存细胞的最佳温度。
细胞可以在液氮中储存多久？
- 细胞可以在液氮中长期储存，只要它们正确储存和处理。
解冻细胞后如何确保其活力？
- 快速解冻并稀释到新鲜培养基中可以帮助确保细胞活力。
我可以将细胞从液氮中取出并重新储存吗？
- 不建议将细胞从液氮中取出并重新储存，因为每次冻存/解冻循环都可能导致细胞损伤。
如果细胞在液氮中污染，会怎样？
- 液氮罐中的污染会导致所有储存的细胞受到污染。定期监测和维护液氮罐至关重要。
标签： 如何选择细胞储存服务
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