CHO 细胞 PEI 转染试剂储存指南
CHO 细胞 PEI 转染试剂储存指南
引言
聚乙烯亚胺 (PEI) 是一种广泛用于 CHO 细胞转染的阳离子聚合物。为了确保转染效率和细胞活力,适当储存 PEI 转染试剂至关重要。以下指南提供了有关储存和处理 PEI 转染试剂的全面说明,旨在帮助研究人员优化其转染实验。
1. 储存条件
温度:-20℃ 冷冻保存。
避光:冷冻时避光储存。
干燥:储存地点保持干燥。
2. 使用前处理
解冻:使用前,将 PEI 转染试剂在 4℃ 冰上解冻。
避光:解冻过程中避免暴露在光线下。
稀释:根据制造商的说明,用无血清培养基稀释 PEI 转染试剂。
3. 长期储存
分装保存:将 PEI 转染试剂分装成小管,以避免反复冻融。
冷冻储存:分装好的 PEI 转染试剂应在 -20℃ 或更低温度下冷冻储存。
冷冻保存时间:在 -20℃ 冷冻保存时,PEI 转染试剂可稳定保存长达一年。
4. 注意事项
避免反复冻融:反复冻融会降低 PEI 转染试剂的活性。
避免与还原剂接触:还原剂,如二硫苏糖醇 (DTT) 和 β-巯基乙醇,会与 PEI 结合,影响其转染效率。
培养基选择:在使用 PEI 转染试剂进行转染时,建议使用 Opti-MEM 等无血清培养基来提高转染效率。
5. PEI 转染试剂的稳定性
PEI 转染试剂在储存和使用过程中会发生降解。以下因素会影响 PEI 转染试剂的稳定性:
温度:高温会加速 PEI 降解。
光照:光照会产生活性氧,导致 PEI 氧化降解。
pH 值:极高的或极低的 pH 值会影响 PEI 的结构和电荷特性。
金属离子:某些金属离子,如铁离子,会与 PEI 配位,影响其转染活性。
结语
通过遵循本指南中概述的储存和处理说明,研究人员可以优化 PEI 转染试剂的使用,从而提高 CHO 细胞转染效率并确保细胞活力。适当的储存和使用可以延长 PEI 转染试剂的保质期,并确保其在整个转染实验过程中保持最佳性能。
标签: 生物细胞储存的概述
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