细胞上清液储存的最佳条件
细胞上清液储存的最佳条件
细胞上清液是细胞培养过程中产生的液体,含有细胞分泌的蛋白质、核酸和其他分子。储存细胞上清液对于生物医学研究和工业应用至关重要,因为其包含宝贵的生物信息。
以下是对细胞上清液储存的最佳条件的全面指南:
1. 储存温度
-80°C 冷冻:用于长期储存(> 1 年)。
-20°C 冷冻:用于中期储存(几个月)。
4°C 冷藏:用于短期储存(< 1 个月)。
2. 容器
无菌、非热原容器:防止污染和细胞损伤。
塑料管或瓶:耐冷冻和易于处理。
玻璃瓶:耐低温、高压和腐蚀。
3. 防冻剂
甘油(10-20%):最常用的防冻剂,防止冰晶形成。
二甲基亚砜 (DMSO)(5-10%):另一种有效的防冻剂,但也可能具有细胞毒性。
4. 蛋白酶抑制剂
蛋白酶抑制剂鸡尾酒:抑制蛋白酶活性,防止上清液中的蛋白质降解。
5. 抗氧化剂
抗坏血酸(250 μg/mL):防止氧化损伤。
6. pH 值
中性 (pH 7.0-7.5):大多数细胞上清液的最佳 pH 值。
7. 离心
在储存前离心上清液:去除细胞碎片和碎屑。
8. 分装
分装上清液成小体积(< 1 mL):防止反复冻融。
9. 标签
清晰标注容器:包括样品名称、日期和储存条件。
10. 储存时间
根据储存条件的不同,细胞上清液的储存时间有所不同。
一般来说:
-80°C 冷冻:可储存数年。
-20°C 冷冻:可储存几个月。
4°C 冷藏:可储存数周。
注意:
储存条件可能会因细胞类型和上清液的成分而异。
在储存细胞上清液之前,建议进行试点研究以确定最佳条件。
始终使用适当的个人防护装备(PPE)和实验规程。
定期监测储存的细胞上清液,以确保其完整性。
标签: 生物细胞储存的未来发展
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