细胞储存液填充方法图解
细胞储存液填充方法图解
细胞储存是指将活细胞冷冻保存以供将来使用。为了确保细胞的存活,细胞储存液必须仔细填充。以下图解提供了细胞储存液填充的详细指南:
1. 准备材料
无菌细胞储存液
无菌注射器和针头
无菌培养皿或冻存管
冰块或液氮
2. 计算细胞储存液的体积
确定细胞悬液的体积。
根据细胞数量和所需的细胞储存液浓度,计算所需的细胞储存液体积。例如,对于含有 1000 万个细胞的悬液,并且所需的细胞储存液浓度为 10%,则所需的体积为 1000 μl。
3. 冷却细胞储存液
将细胞储存液在冰浴中冷却至 4°C。
4. 移液细胞储存液
使用无菌注射器和针头,小心地移液所需的细胞储存液体积。
5. 加入细胞悬液
将细胞储存液缓慢添加到细胞悬液中,同时轻轻搅拌。
6. 混匀
使用移液枪或振荡器充分混匀细胞悬液和细胞储存液。
7. 移液到培养皿或冻存管
使用无菌移液枪,将细胞悬液移液到无菌培养皿或冻存管中。
8. 冷冻细胞
根据细胞类型的不同,选择适当的冷冻方法:
使用冰块或液氮进行缓慢冷冻
使用程序化冷冻机进行程序化冷冻
9. 储存细胞
将冷冻的细胞储存在液氮或超低温冰箱中。
小贴士:
使用无菌技术以防止污染。
缓慢冷却并缓慢复温细胞可最大限度地提高细胞存活率。
避免过度填充细胞储存管,以防止破裂。
在冷冻细胞之前,确保细胞在细胞储存液中充分悬浮。
记录冷冻日期和细胞类型等详细信息。
标签: 生物细胞储存的意义和应用
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