细胞涂片固定后的储存指南
细胞涂片固定后的储存指南
细胞涂片固定是显微镜检查的必备步骤,它可以保存细胞形态,便于后续染色和分析。正确储存固定的细胞涂片至关重要,以确保其完整性和可信度。
1. 固定液的选择
甲醇:快速固定,适用于大多数细胞类型,但会提取脂质和蛋白。
福尔马林:缓慢固定,保留细胞结构,但会使细胞变脆。
乙醇:介于甲醇和福尔马林之间,适用于大多数细胞类型。
2. 固定时间
甲醇:5-10 分钟
福尔马林:12-24 小时
乙醇:15-30 分钟
3. 清洗
用 PBS 或蒸馏水清洗固定液。
洗涤次数:3-5 次
洗涤时间:每次 5 分钟
4. 干燥
自然干燥:在无尘环境中晾干。
离心干燥:以 1000rpm 离心 5 分钟。
吹风机干燥:使用低热量吹风机轻轻吹干。
5. 储存条件
温度:4°C,冷藏保存。
光线:避光保存,紫外线会破坏细胞。
湿度:低湿度,防止霉菌生长。
6. 储存时间
甲醇固定:室温下可保存数月。
福尔马林固定:冷藏保存可保存数年。
乙醇固定:介于甲醇和福尔马林之间,可保存数月至几年。
保管须知
使用无尘手套和镊子处理细胞涂片。
涂片存在于载玻片上时,避免将其翻转或移动。
如果需要运输,请采用适当的包装材料保护涂片免受损坏。
定期检查涂片是否有霉菌或其他污染。
废弃固定液和残留物时,请按照实验室安全规程进行处理。
特殊情况
免疫细胞化学染色:固定后在-20°C 冷冻保存,最多可保存几个月。
荧光显微镜检查:使用 ProLong Gold 等抗褪色安装剂,在-20°C 冷冻保存,最多可保存一年。
电子显微镜检查:使用戊二醛固定,冷冻保存,最多可保存数年。
正确储存固定的细胞涂片对于保持其完整性、准确性和可信度至关重要。遵循这些指南可以确保细胞涂片的长期保存,使其可供未来的分析和检查。
标签: 生物细胞储存的意义和应用
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