细胞悬液在 PBS 中储存的进阶指南

生物细胞储存的未来发展 2024年04月26日 10:43 601 im

　　细胞悬液在 PBS 中储存的进阶指南

　　1. PBS 溶液的制备

　　使用无菌水或 RNase 水溶解 PBS 粉末（例如 DPBS、HBSS 或 Ca2+/Mg2+-PBS）。

　　确保 pH 值在 7.2 至 7.4 之间。

　　可添加补充剂（例如 Pen/Strep）以防止细菌污染。

　　2. 细胞收集

　　收集处于对数生长期或接近对数生长期末期的细胞。

　　使用无蛋白酶的离心法收集细胞并去除培养基。

　　轻轻重悬细胞，避免细胞损坏。

　　3. 细胞计数和活力测定

　　使用血细胞计数仪或其他方法计数细胞。

　　进行活力测定（例如台盼蓝排斥试验）以评估细胞的存活率。

　　调整细胞悬液以达到所需的浓度（通常为 1-10 x 10^6 个细胞/mL）。

　　4. PBS 储存

　　将细胞悬液与 PBS 溶液按 1:1 的比例混合。

　　将混合物轻轻摇晃以确保均匀分布。

　　避免过度摇晃或涡旋，这会导致细胞损坏。

　　5. 温度和储存时间

　　将细胞悬液储存在 4°C 冰箱中，以减缓细胞代谢。

　　储存时间取决于细胞类型和储存条件。一般来说：

　　白细胞：可储存长达 24 小时

　　淋巴细胞：可储存长达 72 小时

　　干细胞：可储存更长时间，具体取决于细胞类型

　　6. 避免细胞冻结

　　不要将细胞悬液储存在 -20°C 冰箱中，因为细胞冻结会导致细胞死亡。

　　如果需要长期储存，请使用细胞冷冻液（例如 10% DMSO）并按照适当的冷冻程序进行操作。

　　7. 融化细胞悬液

　　融化细胞悬液时，将其置于 37°C 水浴中，并轻轻摇晃以促进融化。

　　融化后，立即稀释细胞悬液以去除冷冻液。

　　洗涤细胞并重悬于新鲜培养基中。

　　提示

　　使用高品质的试剂，包括 PBS 粉末和补品。

　　确保所有器皿均无菌。

　　定期监测细胞悬液的活力和污染情况。

　　如果出现凝集或其他问题，请重新离心并重悬细胞。

细胞储存服务的全方位功能

发表评论