细胞裂解液储存:最佳实践和注意事项
细胞裂解液储存:最佳实践和注意事项
简介
细胞裂解液是细胞生物学研究和诊断中的重要工具,用于释放细胞内容物以进行进一步分析。适当储存细胞裂解液至关重要,以确保其完整性和活性。本文旨在提供有关细胞裂解液储存最佳实践和注意事项的全面指南,帮助研究人员优化他们的实验方法。
1. 选择合适的储存容器
无菌管:无菌管是储存细胞裂解液的首选,因为它可以防止污染。
防蛋白酶管:对于研究需要保留蛋白酶活性的细胞裂解液,防蛋白酶管是必不可少的。
低粘附管:低粘附管有助于防止细胞裂解液中蛋白质粘附到容器壁上。
2. 合适的储存温度
基于试剂盒的裂解液:按照制造商的说明储存基于试剂盒的裂解液,通常在-20°C 或-80°C 下储存。
自制裂解液:自制裂解液通常在-80°C 下储存,以保持其稳定性。
短期储存:如果在几天内使用,细胞裂解液可以在4°C 下短期储存。
3. 保护免受光照
光照会降解细胞裂解液中的蛋白质和其他成分。始终将裂解液储存在光遮蔽的容器或黑暗的环境中。
4. 避免反复冻融
反复冻融会破坏细胞裂解液中的蛋白质和破坏其活性。冻融循环应保持在最小限度。
5. 正确解冻
缓慢解冻:将细胞裂解液缓慢解冻,放在4°C 冰箱中过夜。
避免微波解冻:微波解冻会产生局部过热,导致裂解液中的蛋白质变性。
6. 添加剂
蛋白酶抑制剂:添加蛋白酶抑制剂,例如丝氨酸蛋白酶抑制剂或金属蛋氨酸抑制剂,以防止细胞裂解液中的蛋白酶降解。
核酸酶抑制剂:添加核酸酶抑制剂,例如乙二胺四乙酸(EDTA)或苯甲基磺酰氟(PMSF),以防止核酸酶降解。
还原剂:添加还原剂,例如二硫苏糖醇(DTT)或β-巯基乙醇,以维持蛋白质的还原状态。
7. 储存注意事项
标明标签:清楚地标明储存容器,包括裂解液类型、日期和任何添加剂。
定期监测:定期监测储存的细胞裂解液,了解其稳定性。如果观察到浑浊、沉淀或变色,则应丢弃裂解液。
储存时间:细胞裂解液的储存时间取决于裂解液的组成和储存条件。根据制造商的说明或经验性数据确定推荐的储存时间。
结论
细胞裂解液储存的最佳实践至关重要,因为它直接影响细胞裂解液的完整性和活性。通过遵循本文概述的准则,研究人员可以确保其细胞裂解液的稳定性,并获得准确可靠的实验结果。
标签: 细胞储存价格影响因素
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