细胞冻存一般逐级降低温度,4度30min-1h,不要超过一个小时;-20度30min,不要超过30min,或者可以不需要,直接放到-70到-80度的冰箱,过夜,这一步是必须的,如果像你那样,估计细胞活力已经降低很多。不过还要看细胞类型,癌细胞应该还好一些,我的人表皮角质化细胞在-20度放了超过一个小时,过几天我特意拿出来检测,细胞又一半多已经失去活力了。
一般置-20℃避光保存。一旦融化可置4℃避光保存4周以上。怕是不能用了
感受态细胞制备完成速冻后一般是负80度或者液氮中冻存
如果不具备条件,负20度短时间保存也可以。但是长时间保存的话需要负80度或者液氮中保存,并在培养液中加10%的DMSO
所以感受态细胞制备完成速冻后暂时存放负20度是可以的,但是不能长期保存
不会,先-20度再-70度应该是避免温度降得太快而采取的阶段性降温。不过虽然细胞不会马上死,但不知道会不会影响保存的质量。
当然,我是猜的~
还是请示下上级比较好。。。。。
关键词:细胞冻存在-20放了一天