外泌体操作对比照（外泌体机制图）

本文目录一览：

• 1、cpe外泌体和普通细胞中外泌体的区别是什么？
• 2、玺肌细胞外泌体塑型对比玻尿酸填充有什么优势？
• 3、什么是外泌体？
• 4、岸缇蓝宝石效果怎么样
• 5、外泌体该如何提取
• 6、实战分享 | 外泌体提取之经验小结

cpe外泌体和普通细胞中外泌体的区别是什么？

cpe外泌体的提取技术采用了无血清培养基技术，这一技术能够排除血清中本身存在的外泌体，因为cpe外泌体是从动物脐带精华中提取出来的，而血清中的外泌体完全无动物源性，所以能够保证提取出来的成分纯净度，另外不仅能提高细胞释放外泌体的数量，还可以保证外泌体中营养因子的huo性哦。

玺肌细胞外泌体塑型对比玻尿酸填充有什么优势？

保持时间更久，没有恢复期，无创无痛，做完就有效果，无排异和身体同源等。

什么是外泌体？

外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现， 1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。

所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。 外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。

岸缇蓝宝石效果怎么样

效果挺好的。

岸缇蓝宝石美眼，一盒5组，性价比超高的，眼周保养并不是一次两次的心血来潮，而是长年累月的持之以恒。

岁月从来都不会善待懒惰的女人，ANGI蓝宝石眼周外泌体，告别眼皮开刀，刺激胶原生长填补泪沟和眼窝凹陷。

岸缇蓝宝石眼周外泌体操作方法：皮肤松弛部位，皮下浅层，每点0.1毫升，间距3至5mm一个点位。下眼皮肤操作量为：一边0.5至0.8ml；上眼皮肤操作量：一边0.3ml；如上眼皮是属于肿泡眼，可不操作上眼皮。

外泌体该如何提取

BIOG产品特点

◎操作简便快速，可在半小时内获得理想的RNA；

◎提取RNA纯度高，无抑制剂，A260/A280为1.8-2.0；

◎产量更高，较国内同类产品高出20%；

◎可用于小量（200μL）血清、血浆、胸腹水、脑脊液、滑膜液、水样等液体样本中游离样本中RNA的提取；

◎不含苯酚和氯仿等有毒溶剂，安全无毒。

BIOG操作步骤

1. 请自行准备：无水乙醇、无RNA酶1.5mL离心管。

2. 取出洗涤液，按以下操作：

a)洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇，混匀；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。

b) 洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇，混匀；18mL加入42mL无水乙醇，混匀。

c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

[if !supportLists]3. [endif]取无RNA酶的1.5mL离心管，加入200μL样本，4μLRNA Carrier混合均匀，再加入300μL裂解液及20μL消化液，漩涡震荡10秒，充分混匀，56℃水浴10分钟至完全裂解。

4. [endif]加入1mL无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。

5. [endif]将吸附柱放入收集管内，将760μL上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

6. [endif]将吸附柱放回收集管内，将剩余760μL溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。

7. [endif]将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

8. [endif]将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，静置2分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

9. [endif]将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。

10. [endif]取出吸附柱，放入新的无RNA酶的1.5 mL离心管内，加入30-50μL洗脱液，静置3 分钟，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，收集RNA溶液。

11. [endif]-70℃保存，或直接用于下一步实验。

注意事项

1. 为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水 。

2. 裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质，请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。

3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。

实战分享 | 外泌体提取之经验小结

近些年来，关于外泌体的研究如火如荼。外泌体在免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等生理病理上起着重要的作用。同时，不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能，可作为疾病诊断的生物标志物。 来自华中科技大学同济医学院附属协和医院的崔老师，对外泌体提取积累了自己的心得，并将自己的研究成果发表在 Bioactive Materials 上。 下文是崔老师的分享。

要进行关于外泌体的研究，提取纯化外泌体一直是大家非常关注的问题。 能否获得较高纯度的足量外泌体，直接关系着后续研究能否开展 。虽然目前仍然没有能同时保证外泌体的含量、纯度和生物活性的提取方法，但是我们可以结合当前的实际情况，对外泌体提取做一些探讨和经验总结。

超速离心（差速离心）法是目前最常用的外泌体提取方法 ，即采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。超离法因操作简单，获得的囊泡数量较多而广受欢迎。本人近期发表的论文中最后也是采用了这种方法。

具体的步骤大家都比较熟悉，无论是提取血清来源的外泌体，还是细胞条件培养基来源的外泌体 ，大家都习惯于先将血清或者条件培养基收集后保存于-80℃的温度下，等达到一定量后，再批量进行超速离心。

这样的话， 大家会发现一个非常严重的问题，尤其是在拍摄电镜的时候——背景杂质很多，并且很多囊泡的形态不够典型，不是文献中描述的那种典型的双凹圆盘状或者茶托状。

通过几次实验的对比，我大概发现了原因， 主要是由于在冻存收集到培养基的时候，没有进行低速离心和普通高速离心。

低速离心可以去除培养基中的未贴壁细胞、死细胞以及大的细胞残骸，而普通高速离心可以去除其中的大型细胞外囊泡。无论是未贴壁细胞、死细胞、大的细胞残骸，还是大型细胞外囊泡，在-80℃冻存及复温的过程中，都会发生破裂，产生小型的细胞膜碎片结构。

这样的话，就导致了电镜背景很杂乱，难以达到高水平论文杂志期刊的要求。另外，还会导致这样一个矛盾现象，即蛋白定量中计算的外泌体产量虚高，而蛋白免疫印迹中外泌体标记物蛋白的含量却不高。

因此，在这里推荐给大家一个小贴士

就是在收集准备提取外泌体的条件培养基或者血清时，一定要提前做到低速离心和普通高速离心这一步，尤其是为了做透射电镜或者蛋白免疫印迹实验而提取的外泌体 ，一定要注意这一点。尽管过程比较费时，但是能生产出有用的结果才是更重要的。

至于其他的外泌体提取方法，如密度梯度离心、色谱柱、超滤离心法、微流控芯片法、磁珠免疫法、多聚物沉淀法，我看到学校里面鲜少有人去尝试，毕竟更麻烦。但不同的方法各有优劣，大家可根据自己的实验，谨慎选用。