要看是什么污染,如果是支原体污染,一般肉眼观察不到。支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,它对细胞的生长率影响较小。可以通过间接免疫荧光法,免疫印迹和PCR技术快速高效地检测到。
如果细菌污染,那挽回的可能性很小。因为细菌比细胞生长的要快,需要的生长条件也没那么高的要求。如果轻微的污染可以通过加入高浓度(正常的10倍)抗生素的培养基反复洗细胞,有可能清除。如果是杭州的可以咨询浙江波因医药科技有限公司,可以提供这方面的技术服务
细胞污染分几种情况,处理方法不同。
细菌污染处理方法:
在培养基中加入抗生素处理,可以用四环素,庆大霉素,或者链霉素,前两者的工作浓度是50 μg/mL;链霉素的工作浓度是100 μg/mL。但是,细胞本身也有影响,状态大不如从前,所以,防范于未然,正确操作、严格执行无菌操作规范,定期清理消毒培养设施才是关键!
二、真菌污染
:真菌污染培养液清亮透明。
处理方法:赶紧扔掉,不要再想挽救,即使再珍贵。然后彻底消毒灭菌培养间,CO2孵箱,器皿和培养液。
三、霉菌污染
同真菌感染一致,因为培养液是清亮的,所以霉菌污染早期难以发现,等发现时往往已经为时过晚了。培养液中慢慢地出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物。
处理方法:建议果断舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,因为霉菌的顽固可能会导致下几批细胞都会污染,所以,采用酒精彻底底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新洁尔灭擦洗一遍,把水盘里加上饱和量的硫酸铜。千万不可大意!
四、支原体感染
:培养液变浑浊,支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是细胞状态变差、生长变慢,在显微镜下观察可能会有小黑点。
处理方法:
如果不是很珍贵的细胞的话,建议直接扔了吧。还是那句话,预防为主。
你想知道是哪种细菌我无能为力。不过有些事情可以建议你。
首先,41℃不知道是你哪里的出来的灭菌方式,要灭菌都是121℃下20分钟以上才行。
要分析哪里污染可以按照步骤来,首先,考虑培养基。取样培养基,在37°培养箱中做无菌试验,看看培养基有问题没。接着,换一批培养瓶,枪头。
因为我不知道你的实验条件怎么样,比如说枪头是灭菌的还是一次性包装中的吸量管,使用的方瓶是反复灭菌的玻璃方瓶还是一次性塑料方瓶。用的是生物安全柜还是超净台等等。这些都是有区别的。我猜你染这种菌,应该是用的超净台,玻璃方瓶,以及灭菌的枪头是吧。
关键词:细胞被细菌污染了怎么办