检测细胞凋亡的意义及实验报告（检测细胞凋亡的意义及实验报告怎么写）

本文目录一览：

• 1、急！细胞凋亡的生理学意义?
• 2、细胞凋亡的意义
• 3、细胞凋亡检测-----检测细胞凋亡的方法有哪些，有什么意义嘛？求告知！
• 4、细胞凋亡有什么意义，官方回答最好
• 5、简述细胞凋亡的生物学意义

急！细胞凋亡的生理学意义?

1、细胞凋亡和细胞增殖都是生命的基本现象,是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施；

2、细胞凋亡为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡；

3、细胞凋亡是细胞的一种基本孝首生物学现象，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。

扩展资料：

细胞凋亡介绍：

细胞凋亡受到严格调控，在正常细胞Caspase处于非活化的酶原状态，凋亡程序一旦开始，Caspase被活经随后发生凋亡蛋白酶的层叠级联反应，发生不可逆的凋亡。

细胞凋亡的生蚂慎派化改变不仅仅是DNA的有控降解，在细胞凋亡的过程中往闷贺往还有新的基因的表达和某些生物大分子的合成作为调控因子。实验室发现的TFAR-19就是在细胞凋亡时高表达一种分子，再如在糖皮质激素诱导鼠胸腺细胞凋亡过程中，加入RNA合成抑制剂或蛋白质合成抑制剂即能抑制细胞凋亡的发生。

参考资料来源：百度百科-细胞凋亡

细胞凋亡的意义

细胞凋亡是由体内外因素触发细胞内预存的死亡程序而导致的细胞死亡过程，是与坏死不同的另一种细胞死亡形式。

细胞凋亡对确保机体正常发育生长以及维持体内环境稳定，起着非常重要的生理作用，凋亡失调是当今威胁人类健康的许多重大疾病的发病竖春机制之一，如果凋亡不足可导致纳碧肿瘤洞纤举、自身免疫性疾病的发生。而凋亡过度与老年性痴呆、心肌缺血、再灌注损伤等发病密切相关。细胞凋亡是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施，在胚胎发育阶段通过细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞，保证了胚胎的正常发育，在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老和病变的细胞，保证了机体的健康，细胞凋亡也是受基因调控的精确过程。

细胞凋亡检测-----检测细胞凋亡的方法有哪些，有什么意义嘛？求告知！

一、形态学观察方法

1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。

2、丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。

3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮助。

4、透射电镜观察：可见凋亡细胞表面微绒毛消失，核染色质固缩、边集，常呈新月形，核膜皱褶，胞质紧实，细胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。

二、DNA凝胶电泳

（一）检测原理

细胞发生凋亡或滑虚坏死，其细胞DNA均发生断裂，细胞内小分子量DNA片断增加，高分子DNA减少，胞质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间，出现180－200bpDNA片断，而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断，利用此特征可以确定群体细胞的死亡，并可与坏死细胞区别。

（二）结果判断

正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状（LADDER）条带；坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带。

三、酶联免疫吸附法（ELISA）核小体测定

凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小毁让宽体由组蛋白及其伴随的DNA片断组成，可由ELISA法检测。

（一）检测步骤

1、将凋亡细胞裂解后高速离心，其上清液中含有核小体；

2、在微定量板上吸附组蛋白体；

3、加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合；

4、加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合；

5、加酶的底物，测光吸收制。

（二）用途

该法敏感性高，可检测5*100/ml凋亡细胞。可用于人、大鼠、小鼠的凋亡检测。该法不需要特殊仪器，适合基层工作，但是不能精确测定凋亡细胞发生的绝多对量。

四、流式细胞仪分析

（一）检测原理

细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。

（二）应用价值

流式细胞仪检测具有以下特点：

1）、检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确

2）、可以做许多相关性分析

3）、结合被检测细胞的DNA含量的分析，可确定凋亡的细胞所处的细胞周期

■检纤亮测形态学及细胞膜完整性的Hoechs-PI双染色法

细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性液增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间，利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪检测细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。

利用Hoechs-PI染色法，正常细胞对染料有抗拒性，荧光染色很浅，凋亡细胞主要摄取Hoecha染料，呈现强蓝色荧光，而坏死细胞主要摄取碘化丙啶（PI）而呈强的红色荧光。

■DNA片断原位标记法

凋亡细胞DNA片断原位末端检测技术是指在细胞（或组织）结构保持不变的情况下，用荧光素、地高辛或生物素标记的脱氧尿三磷酸（deoxyuridinetriphate，DUTP）和末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）相反应与凋亡细胞裂解后3.的羟基（－OH）端结合，经显色反应后检测DNA裂解点的技术。

DNA片段原位标记法有二种：

1、原位缺口转移（in situ nick-translation，ISNT）技术，它是利用DNA多聚酶I将标记的核苷酸连接到断裂DNA的3－OH端

2、原位缺口末端标记技术（in situ end labelling technique，ISEL），即TUNEL法，它是利用TdT将标记的DUPT接到3－OH端。研究证明，TUNEL法的敏感性远高于ISNT，尤其对早期凋亡的检测，TUNEL为合适。

■检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法

1、原理：在细胞凋亡早期位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（PS）迁移至细胞膜外测。磷脂结合蛋白V（Annexin V）是钙依赖性的磷脂结合蛋白，它于PS具有高度的结合力。因此，Annexin V可以作为探针检测暴露在细胞外测的磷脂酰丝氨酸。故利用对PS有高度亲和力的Annexin V，将Annexin V标记上荧光素（如异硫氰酸荧光素FITC），同时结合使用PI拒染法（因坏死细胞PS亦暴露于细胞膜外测，且对PI高染）进行凋亡细胞双染法后用流式细胞仪即可检测凋亡细胞。

2、结果判断：正常活细胞Annexin V 、PI均低染；凋亡细胞Annexin V高染、PI低染；坏死细胞Annexin V/PI均高染。

3、应用价值：细胞发生凋亡时，膜上的PS外露早于DNA断裂发生，因此Annexin V联合PI染色法检测早期细胞凋亡较TUNEL法更为灵敏。又Annexin V联合PI染色不需固定细胞，可避免PI染色因固定造成的细胞碎片过多及TUNEL法因固定出现的DNA片段丢失。因此，Annexin V联合PI法更加省时，结果更为可靠，是最为理想的检测细胞凋亡的方法。

细胞凋亡有什么意义，官方回答最好

1、细胞凋亡在个体发育和组运竖纯尺织稳态的维持中具有重要的作用：如蝌蚪尾巴退化涉及细胞凋亡。

2、细胞凋亡也与许多疾病的发生和防治密切相关：多种病毒感染可引起细胞凋亡，旁裤大细胞凋亡可有效地阻止病毒繁殖，但大量细胞凋亡可使机体严重致病。

3、通过细胞增殖与细胞凋亡共同调节成体的组织器官稳态的维持。

简述细胞凋亡的生物学意义

细胞凋亡是生命的基本现象，是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施。在胚胎发育阶段通过细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞，保证了胚胎的正常发育；在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老弯樱和病变的细胞，保证了机体的健康。细胞凋亡也是受基因调控的精确过程。

扩展樱闹尺资料：

细胞凋亡的基因调控：

细胞凋亡指为维持内环脊高境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。生物体内细胞在特定的内源和外源信号诱导下(其死亡途径被激活(并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。是程序性死亡过程的一种主要形式(强调的是形态学上的改变。它涉及染色质凝聚和外周化、细胞质减少、核片段化、细胞质致密化、与周围细胞联系中断、内质网与细胞膜融合(最终细胞片段化形成许多细胞凋亡体)被其他细胞吞入。

细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。

参考资料：百度百科-细胞凋亡