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外泌体存储温度对浓度的影响(外泌体存储温度对浓度的影响大吗)

2023-04-24 03:58:26 作者:max
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实战分享 | 外泌体提取之经验小结

近些年来,关于外泌体的研究如火如荼。外泌体在免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等生理病理上起着重要的作用。同时,不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能,可作为疾病诊断的生物标志物。 来自华中科技大学同济医学院附属协和医院的崔老师,对外泌体提取积累了自己的心得,并将自己的研究成果发表在 Bioactive Materials 上。 下文是崔老师的分享。

要进行关于外泌体的研究,提取纯化外泌体一直是大家非常关注的问题。 能否获得较高纯度的足量外泌体,直接关系着后续研究能否开展 。虽然目前仍然没有能同时保证外泌体的含量、纯度和生物活性的提取宏氏方法,但是我们可以结合当前的实际情况,对外泌体提取做一些探讨和经验总结。

超速离心(差速离心)法是目前最常用的外泌体提取方法 ,即采用低速离心、高速离心交替进行,可分离到大小相近的囊泡颗粒。超离法因操作简单,获得的囊泡数量较多而广受欢迎。本人近期发表的论文中最后也是采用了这种方法。

具体的步骤大家都比较熟悉,无论是提取血清来源的外泌体,还是细胞条件培养基来源的外泌体 ,大家都习惯于先将血清或者条件培养基收集后保存于-80℃的温度下,等达到一定量后,再批量进行超速离心。

这样的话, 大家会发现一个非常严重的问题,尤其是在拍摄电镜的时候——背景杂质很多,并且很多囊泡的形态不够典型,不镇绝雀是文献中描述的那种典型的双凹圆盘状或者茶托状。

通过几次实验的对比,我大概发现了原因, 主要是由于在冻存收集到培养基的时候,没有进行低速离心和普通高速离心。

低速离心可以去除培养基中的未贴壁细胞、死细胞以及大的细胞残骸,而普通高速离心可以去除其中的大型细胞外囊泡。无论是未贴壁细胞、死细胞、大的细胞残骸,还是大型细胞外囊泡,在-80℃冻存及复温的过程中,都会发生破裂,产生小型的细胞膜碎片结构。

这样的话,就导致了电镜背景很杂乱,难以达到高水平论文杂志期刊的要求。另外,还会导致这御早样一个矛盾现象,即蛋白定量中计算的外泌体产量虚高,而蛋白免疫印迹中外泌体标记物蛋白的含量却不高。

因此,在这里推荐给大家一个小贴士

就是在收集准备提取外泌体的条件培养基或者血清时,一定要提前做到低速离心和普通高速离心这一步,尤其是为了做透射电镜或者蛋白免疫印迹实验而提取的外泌体 ,一定要注意这一点。尽管过程比较费时,但是能生产出有用的结果才是更重要的。

至于其他的外泌体提取方法,如密度梯度离心、色谱柱、超滤离心法、微流控芯片法、磁珠免疫法、多聚物沉淀法,我看到学校里面鲜少有人去尝试,毕竟更麻烦。但不同的方法各有优劣,大家可根据自己的实验,谨慎选用。

温度和浓度对溶解热有何影响

温度和浓度都有影响,因为溶解热是溶解过程中微观上,固态晶体的溶解、与水分子的作用(水合)野漏蠢、扩散(稀释)的总效果,所以温度和浓度都会影响到以上过程进行的难易程度,以及相应的热效应。通过基尔霍夫公式可用一个温度下的热效应求另一个温度下的热效应,只需知道定压热容随温度的变化情况。

影响物质溶解热的主要因素有温度颂陪、压力、溶质量和溶剂量。溶解热通常用298.15K和1大气压下1摩尔溶质溶于一定量溶剂的热效应来表搜山示,单位为焦/摩尔。

扩展资料:

根据物质溶解过程中溶液浓度是否发生变化,溶解热又可分为积分溶解热和微分溶解热,前者是1摩尔溶质溶解在n摩尔溶剂中所产生的热效应,在溶解过程中溶液浓度逐渐改变。

微分溶解热是一种定浓度的溶解热,可以认为是把1摩尔溶质溶于大量的、一定浓度的溶液时所产生的热效应,或者在一定量溶液中加入极少量的dn摩尔溶质时产生的热效应。

温度对物质的量的浓度的影响

跟温度没关系!

容量瓶中,配溶液的溶质是始行搏终不变的,你往里加水只是加溶剂,加到线上就尘带磨刚好是要求的溶度!如果原先容量瓶中有少量水,相当于先把溶剂加进来,在加溶质,当你把水加到线时,溶剂和溶质的量还是所要求的量,所以对浓派斗度没影响!

温度对饱和溶液浓度的影响????????

大部分饱和溶液橡绝的溶解度随温度的升高而增大,所以浓度不变

象有些溶液比如说Ga(OH)2,溶解度随温度的升梁袜姿高而减小好备,所以浓度变小

温度对饱和溶液浓度的影响

对于固体是温度越高饱和溶液浓度越高。 极少数庆樱除外,枝差袭如猛兄Ca(OH)2

对于气体,升高温度,溶解度降低,溶液浓度降低(烧开水就是为了除去氯气)

温度对表面活性剂的临界胶束浓度有何影响

CMC是活性剂溶液中开始大量形成胶团的活性剂浓锋山度,也是衡量活性剂表面活性强度的重要参数。当达到CMC时,溶液的性质将发生显著变化。CMC小,改变体系表面性质所需的活性剂浓度低,起到润湿、乳化、发泡等作用所需的活性剂浓度越低。CMC低,活性剂的应用效率越高。像增溶油的作用、胶团催化、分隔介质、胶团作为微反应器等,所需活性剂浓度必须在CMC之上。

1,在制备乳液时茄基戚,表面活性剂的用量要大于临界胶束浓度。

2,大于CMC(临界胶束浓度)会有很多性质改变,胶束可以起乳化包裹的作用,就像洗衣粉洗衣服,胶束把脏东颤陵西包住达到洗涤效果,乳液中胶束把油脂包住达到乳化效果!

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