无外泌体胎牛血清的制备（无外泌体培养基）

本文目录一览：

• 1、小牛血清和胎牛血清有何区别呢，完全培养基DMEM到底加哪种
• 2、如何配胎牛血清浓度？
• 3、胎牛血清是怎么生产的？
• 4、哪位童鞋有知道无外泌体胎牛血清的具体作用？哪个厂家的血清好些？
• 5、新生牛血清如何进行质量控制?
• 6、细胞培养自制血清

小牛血清和胎牛血清有何区别呢，完全培养基DMEM到底加哪种

完全培养基DMEM加胎牛血清。

小牛血清和胎巧州正牛血清的区别：

1、来源不同：

（1）小牛血清取自出生10－30天的小牛，出生三月龄小牛动脉采血分离血清。

（2）胎牛血清是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。

2、品质不同：

（1）小牛血清品质不如胎牛血清。

（2）胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

3、用途与用法不同：

（1）小牛血清而有些细胞只需小牛血清即可。

（2）胎牛血清某些细胞必需胎牛血清才能生长。

4、外观不同：

（1）小牛血清外观黄色澄清，微溶血，有异物稍粘稠液体。

（2）胎牛血清是一种性状，外观浅黄色澄清，无溶血，无异物稍粘稠液体。

扩展资料

1、牛血清的功能：

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。

（1）提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

（2）提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

（3）有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

（4）是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

（5）起酸碱度缓冲液作用。

（6）提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

2、解冻血清注意事项：避免产生沉淀物

（1）解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温迹旦度太大(如-20℃至37℃，实验显示非常容易产生沉淀物。

（2）解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生

（3）请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。

（4）血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

（5）若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理。欲去除这些絮孝悔状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

参考资料来源：百度百科-胎牛血清

百度百科-血清

如何配胎牛血清浓度？

以瑞沃德的Alphacell胎牛血清为例，如要配的10%胎牛血清即完全裤模搏培养胡祥基，举例来说，假如你配100mL的10%胎牛血清完全培养基，你需要吸取10mL的胎牛血清、1mL的抗生素以及89mL的基础培养基。稳定性试验不要再加双抗，码锋剩余的90%为pH7.2-7.4的PBS缓冲液。

胎牛血清是怎么生产的？

胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛基雹血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体搏卖帆等对细胞有害的成分最少。AlphaCell——RWD澳洲进口胎牛血清生产工艺如下图，生产程序和设备经过严格的审核。采用世界先进的除菌过滤系统——先粗过滤后，再通过三个连续的0.1μm大小的孔径过滤器精过滤。确保血清无支原体、细菌等污染。生产过滤系统为仅一次使用，绝不重复利用配团，极大降低污染风险。国内的话，瑞沃德有在代理，口碑不错的

哪位童鞋有知道无外泌体胎牛血清的具体作用？哪个厂家的血清好些？

简单的说其实就是细胞的营养物质，要根据细胞实知坦验进搭前桐行甄别用哪方面的血悔逗清好些，你说的无外泌体胎牛血清我感觉Gibco很好，可以选择absin的

新生牛血清如何进行质量控制?

2010年版《中华人民共和国兽药典》中对牛血清的质量提出比较严格的标准要求，主要包括以下几点：

①新生牛血清应无细菌、支原体污染。血清中含有细菌会直接造成细胞污染、制品污染，因此无菌是最基本的要求。另外细菌会产生内毒素，也称脂多糖。内毒素可以引起发热反应、白细胞反应、代谢性酸中毒、感染性休克、弥散性血管内凝血（DIC）。人及哺乳动物对内毒素异常敏感，疫苗中的内毒素含量高会引起人及动物的强烈埋芹段反应，甚至被致死。所以生物制品及其原辅料对内毒素要求严格控制。按鲎试剂或内毒素检测仪操作程序测定，新生牛血清中的细菌内毒素含量应低于10EU/mL。

②新生牛血清中应无牛病毒性腹泻/黏膜病病毒（BVDV）、口蹄疫病毒（FMDV）等外源病毒污染。含有口蹄疫病毒抗体的新生牛血清对口蹄疫疫苗的生产干扰非常大，含有牛病毒性腹泻/黏膜病病毒抗体的新生牛血清对猪瘟活疫苗（细胞源弯誉）的生产干扰非常大。其他病的抗体也需要尽可能控制，抗体存在会影响生物制品的质量。

③细胞增殖高质量的血清含有丰富的细胞生长必需的营养成分，它提供细胞贴壁所需的因子，还起着缓冲酸碱度、提供解毒、保护细胞不受伤害等作用。用Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞进行细胞增殖试验测定标准血清（胎牛血清）的绝对克隆形成率和新生牛血清的相对克隆形成率，规定标准血清的绝对克隆形成率应不低于20%，胎牛血清的相对克隆形成率应不低于80%，新生牛血清的相对克隆形成率应不低于50%。

④新生牛血清中血清蛋白含量应在3、5%～5、0%（w/v）。新生牛出生14h内采血制备的血清，其血清蛋白含量一首巧般都在这个范围之内，并且，采血时间越短，测定值越接近下限，小牛出生后存活的时间越长，其血清中的蛋白含量测定值越接近上限。

⑤新生牛血清中的血红蛋白含量应不高于0。02%（w/v）。血红蛋白的含量直接影响血清中刺激细胞生长因子的活力。血红蛋白含量高的血清，颜色为暗红色，质量较差。

细胞培养自制血清

为什么要用小鼠血清呢？好像正常做都是胎牛或者小牛血清吧。

1，灭活或者过滤都是明简为了除菌，如果过滤除菌了就不需要灭活了吧。据说只有培养 ES 细岁槐颤胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时才推荐灭活。0.22微米的膜过滤。

2，同一物种的血清可以一起用的，应该不会发生补体反应，乎败关键是取血后不能放太久，会溶血。

3，293T的细胞一般胎牛血清可以养，小鼠的真不清楚。