贴壁细胞冻存步骤（贴壁细胞的冻存）

贴壁细胞冻存步骤详解

概括

贴壁细胞是一种广泛应用于医学和生物学研究的细胞类型。由于贴壁细胞的生长速度快、生长周期短，因此对贴壁细胞进行冻存，可以保证其长期保存并供后续实验使用。本文将详细介绍贴壁细胞冻存步骤。

步骤一：选择细胞

选择合适的细胞是贴壁细胞冻存的第一步。通常情况下，选择生长健康、细胞密度适中的细胞。同时，还需要注意细胞的鉴定和纯化，确保细胞种类正确。

步骤二：制备冻存液

贴壁细胞冻存液的制备是冻存过程中至关重要的一步。一般情况下，冻存液包括细胞生长基础培养液、10% DMSO（二甲基亚砜）和20% FBS（胎牛血清）。制备过程中，需要注意冻存液的配比和消毒。

步骤三：处理细胞

在冻存前，需要对细胞进行处理。处理过程中，需要先用PBS（磷酸盐缓冲液）清洗细胞，然后加入冻存液，最后将细胞分装至冻存管中。

步骤四：冻存细胞

将分装好的细胞放入冰箱中，使其慢慢冷却，最终将细胞置于液氮中进行冻存。在冻存过程中，需要注意冷却速度和保温措施，确保细胞冻存质量。

步骤五：解冻细胞

在需要使用冻存细胞时，需要对细胞进行解冻。解冻过程中，需要先将细胞放置于37℃温水中，然后逐渐加入生长基础培养液，最后将细胞移至细胞培养箱中进行培养。

总结

贴壁细胞的冻存可以保证其长期保存，并为后续实验提供便利。在冻存过程中，需要注意选择合适的细胞、制备冻存液、处理细胞、冻存细胞和解冻细胞等步骤。只有严格按照步骤进行操作，才能保证贴壁细胞的冻存质量。