细胞冻存液的配制步骤（细胞冻存液配置方法）

如何正确配制细胞冻存液

在细胞培养过程中，细胞冻存液是一个必不可少的工具，它可以使得细胞在长时间保存的过程中保持良好的生物活性。然而，正确的冻存液配制过程对于细胞的冻存效果有着至关重要的作用。本文将介绍细胞冻存液的配制步骤和注意事项，以帮助实验人员正确地配制冻存液，从而保证细胞的高质量冻存。

配制步骤

1. 准备基础培养液。基础培养液的选择应根据细胞类型和实验要求而定。一般来说，DMEM、RPMI-1640、MEM等培养液都可以作为基础培养液。

2. 加入10% DMSO。DMSO是细胞冻存液中最常用的添加剂之一，它可以有效保护细胞在低温下的生物活性。将10 mL DMSO加入到90 mL培养液中，充分混合。

3. 过滤。将混合好的液体用0.22 μm滤器过滤，去除其中的微粒和细菌。

4. 分装。将过滤后的液体分装到冻存管中。一般来说，每支管放入1 mL液体即可。

5. 冷冻。将分装好的冻存管放入-80℃冷冻箱中冷冻2小时以上，直至冷冻完全。

6. 转移到液氮罐中。将冷冻好的细胞冻存管转移到液氮罐中，进行长期保存。

注意事项

1. 培养液的选择应根据实验要求而定，不同的细胞类型需要不同的培养液。

2. DMSO的浓度一般为10%，过高或过低的浓度都会影响细胞的冻存效果。

3. 分装时应注意，每支管放入的液体体积不宜过多或过少，一般为1 mL左右。

4. 冷冻过程中应注意防止液体温度过高，否则会对细胞造成不可逆的损伤。

5. 细胞冻存液应存放在液氮罐中，避免与空气接触，以免液氮罐内的湿气使细胞冻存液出现冰晶，影响细胞的冻存效果。

总结

细胞冻存液的配制过程非常重要，正确的配制方法可以保证细胞在冻存过程中保持高生物活性。本文介绍了细胞冻存液的配制步骤和注意事项，希望对实验人员正确地制备细胞冻存液有所帮助。