悬浮细胞冻存液是一种常用的细胞处理方法,可以将细胞在低温下保存,并且保持细胞活性,以便后续实验使用。本文将详细介绍悬浮细胞冻存液的使用方法。
在开始使用悬浮细胞冻存液前,需要准备以下物品:
- 细胞培养基
- 细胞培养器具
- 悬浮细胞
- 冻存液(一般为10% DMSO)
将需要冻存的细胞从培养瓶中取出,用PBS洗涤一次,以去除残留的培养基。然后加入足够的细胞培养基,将细胞离心下沉,去掉上清液。
将10% DMSO的冻存液加入细胞沉淀物中,充分混合。一般情况下,添加的冻存液体积应该是细胞沉淀物的1/2到1/3。如果需要,可以在这一步将细胞分装到多个cryovial管中。
将cryovial管放入冰盐混合物中,使其温度逐渐降低到-80℃。然后将cryovial管转移到液氮罐中,进行长期保存。
解冻悬浮细胞冻存液需要特别小心,以避免对细胞产生伤害。将cryovial管从液氮罐中取出,立即放入37℃的水浴中,等到液体全部融化后,再转移到细胞培养基中,进行培养。
- 冻存液中的DMSO可能会对细胞产生毒性,因此应该控制添加量。
- 冷冻和解冻的速度应该尽量缓慢,以避免对细胞产生伤害。
- 冻存液的配制和使用应该遵循实验室的标准操作规程。
本文介绍了悬浮细胞冻存液的使用方法,包括细胞处理、冻存液添加、冷冻和解冻等步骤。在使用过程中需要注意一些细节,以保证细胞的保存和活性。如果您需要进行悬浮细胞的冻存,希望本文能够对您有所帮助。