外泌体提rna浓度（外泌体提RNA）

本文目录一览：

• 1、提取rna浓度在多少才算好的
• 2、提RNA浓度低怎么办，紧急求助
• 3、在提取RNA中，怎样提高RNA的浓度
• 4、知道OD260怎么算RNA 的浓度呀？提取的RNA总量怎么算？
• 5、提取RNA时氯化钠的最适浓度是多少？

提取rna浓度在多少才算好的

rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求：浓度20ng/ul以上足够了，如果用的是组织提取，浓度一般很高，可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞，浓度低一些也没有关系。纯度需要用仪器测一下。260/280理论值应该有2.0以上，260/230值1.2以上基本合格。RT-PCR：最重要的是RNA是否有明显降解，这个需要跑电泳看。一般来说28S应该比18S亮1.5-2.0倍，说明提取得不错。反转录·聚合酶链反应（reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR）是将RNA的反转录（reversetranscription）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用反转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板经行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。

提RNA浓度低怎么办，紧急求助

1、提取RNA测浓度时A260/A280大于3的原因可能是降解。2、一般对于DNA,纯净的时候比值是1.8，而对于RNA则是接近2.0。如果超过这个值，那么最有可能的就是核酸降解了，因为寡聚的核酸和核苷酸在260的吸收峰比长链核苷酸要大，所以会使比值上升。

在提取RNA中，怎样提高RNA的浓度

两个关键点一是组织的破碎要充分另外一个是最后洗脱步骤少用点水，浓度就提高了

知道OD260怎么算RNA 的浓度呀？提取的RNA总量怎么算？

RNA浓度通常计算为1OD =40μg/ ml。

将2μl样品稀释至200μl，稀释倍数为100x，因此提取的RNA浓度为0.154×100×40μg/ ml =616μg/ ml。

由于RNA量为50μl，提取的RNA总量为616μg/ ml×50 / 1000ml =30.8μg。

扩展资料

计算原理：

蛋白中trp、tyr、phe的吸光度为280nm，所以280nm常用来表示蛋白质吸光度；而260nm为DNA的吸光度。

理论上，纯的RNA情况下：OD260/OD280的值为2，纯的DNA情况下：OD260/OD280的值为1.8。

OD260反映的是溶液中核酸的浓度，OD280反映的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度。

样品中如果含有蛋白质及苯酚，A260/A280比值会明显下降。对于纯的样品只要读出260 nm 的A值即可以算出含量。通常以A值为1相当于50微克/ml 双螺旋DNA，或者40微克/ml 单链DNA，RNA，或者20微克/ml 寡核苷酸计算。

参考资料：百度百科-OD260/280比值

参考资料：百度百科-RNA

提取RNA时氯化钠的最适浓度是多少？

用0.14mol/L的稀氯化钠溶液溶解，用1～2mol/L的浓氯化钠溶液提纯析出RNA

在1～2mol/L的浓氯化钠溶液中,DNA核蛋白的溶解度很大,RNA核蛋白的溶解度很小;而在0.14mol/L的稀氯化钠溶液中,DNA核蛋白的溶解度很小,RNA核蛋白的溶解度很大.因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将DNA核蛋白和RNA核蛋白从样品中分别抽提出来.

所以你只要将提取DNA中过程里的两次氯化钠溶液对调就行了