白细胞储存:优化储存条件以维持细胞活力
引言
白细胞是免疫系统中至关重要的细胞,负责抵御感染和疾病。在细胞治疗和再生医学领域,白细胞的储存至关重要,以确保细胞活力和功能。因此,优化白细胞储存条件对于维持其 therapeutic 潜力至关重要。
1. 储存温度
最佳的白细胞储存温度因细胞类型而异,但一般范围为 2-8 °C。这个温度范围可以减缓细胞代谢,同时防止细胞损伤。过于低温可能导致细胞冻结,而过于高温可能加速细胞死亡。
2. 储存介质
储存介质是白细胞储存的另一个关键组成部分。它为细胞提供营养和保护,并帮助维持适当的 pH 值和渗透压。常用的储存介质包括:
a) 冷冻保护剂
冷冻保护剂是添加到储存介质中以防止细胞在低温下形成冰晶的物质。二甲基亚砜 (DMSO) 和胎牛血清 (FBS) 是常见的冷冻保护剂。
b) 细胞培养液
细胞培养液包含细胞生长和生存所需的营养素。一些常用的细胞培养液包括 RPMI 1640 和 DMEM。
c) 抗生素和抗真菌剂
抗生素和抗真菌剂可以防止微生物污染储存介质。在选择抗生素和抗真菌剂时,重要的是考虑细胞对这些药物的敏感性。
3. 储存容器
储存容器应无菌且透气,以防止微生物污染和气体交换。常用的储存容器包括:
a) 输液袋
输液袋由无菌塑料制成,可容纳大量的细胞。它们易于处理和运输。
b) 冷冻管
冷冻管由耐低温的塑料制成,用于储存冷冻细胞。它们可以承受低温,防止冰晶形成。
c) 细胞培养板
细胞培养板由无菌塑料制成,具有多个孔洞,用于储存和培养细胞。
4. 储存持续时间
白细胞储存的持续时间取决于多种因素,包括细胞类型、储存温度和储存介质。一般而言,白细胞可以在 2-8 °C 下储存数天至数周。冷冻白细胞可以在液氮中储存多年。
5. 解冻程序
从储存中取出白细胞后,必须小心解冻。快速解冻会导致细胞损伤,因此应使用渐进式解冻程序。通常,冻结的细胞被置于 37 °C 的水浴中,直到解冻。然后,细胞在室温下洗涤以去除冷冻保护剂。
6. 细胞活力评估
在细胞储存和解冻后,必须评估细胞活力以确保其功能性。常用的细胞活力测定包括:
a) 胞吐蓝 (Trypan Blue) 排斥试验
胞吐蓝是一种染料,可以透入受损细胞。通过测量未染色的细胞数量,可以确定细胞活力。
b) 流式细胞术
流式细胞术是一种技术,可以评估细胞大小、粒度和抗原表达等参数。可以通过这些参数来判断细胞活力。
c) 功能测定
功能测定用于评估白细胞的免疫功能。例如,可以测量细胞的增殖、分化和细胞因子产生。
结论
优化白细胞储存条件对于维持细胞活力和功能至关重要。通过仔细考虑储存温度、储存介质、储存容器、储存持续时间、解冻程序和细胞活力评估,可以确保白细胞在储存过程中保持最佳状态,从而为细胞治疗和再生医学应用提供可行的细胞源。
关键词:免疫细胞