外泌体负染电镜用多少电压的合适（外泌体电镜检测浓度要求）

本文目录一览：

• 1、外泌体的电镜观察
• 2、扫描电镜的电压越大、倍数越大越清晰吗
• 3、扫描电镜电压和光圈选择
• 4、western blot 试验中蛋白转膜总是颜色很浅...... 分子量是27KD，电流和电压多少合适，应该转多长时间....
• 5、二氧化硅样品做扫描电镜的临界电压是多少
• 6、什么是电镜负染技术

外泌体的电镜观察

直接观察外泌体

全标本包埋外泌体

100,000 × g exosome沉淀 或 富集的冰冻外泌体

2% or 4% (w/v) PFA

PBS

1% 戊二醛

草酸双氧铀, pH 7

甲基纤维素-UA, pH 4: 9份2% 甲基纤维素 +1份4%乙酸双氧铀，用前混合

Formvar-carbon载样铜网

封口膜

5号镊子

玻璃培养皿

不锈钢环，比铜网略大

1号滤纸

铜网储存盒

透射电镜

Figure 1. TEM下exosome形态。箭头示exosome，三角形示脂质颗粒

Ref:

1: Current Protocols in Cell Biology

扫描电镜的电压越大、倍数越大越清晰吗

图像的清晰度是亮度对比度概念的综合，清晰的图像在肉眼可识别的微小尺度范围内，亮暗反差鲜明。扫描电镜加速电压高可以获得电子光学系统的高分辨能力，可高倍更清晰。由于电子有一定穿透深度，过大的电压反而会降低该样品的分辨率。所以电压调节要适度！

扫描电镜电压和光圈选择

光圈要选取比较小的，电压由于电阻本身的精度，用一些精度高而阻值大的电阻比较好。

在拍摄风光之类的照片时，因为需要大景深，前后都清晰，所以就选取比较小的光圈，一般都是F11或更小，但一般不在选择最小的光圈，影响画质。如果拍摄风光时光线较弱，比如夜景，在有三角架的情况下，光圈仍可以选择小光圈，但如果没有三角架，为了确保相机稳定，就要开大光圈，以增加进光量。

电压也称作电势差或电位差，是衡量单位电荷在静电场中由于电势不同所产生的能量差的物理量。其大小等于单位正电荷因受电场力作用从A点移动到B点所做的功，电压的方向规定为从高电位指向低电位的方向。

western blot 试验中蛋白转膜总是颜色很浅...... 分子量是27KD，电流和电压多少合适，应该转多长时间....

注：本资源来源于网络。

(1)通常如果使用Bio-Rad的标准湿式转膜装置，可以设定转膜电流为300-400mA，转膜时间为30-60)分钟。也可以在15-20mA转膜过夜。转膜时也可以使用碧云天的多功能电泳仪(带定时)。具体的转膜时间要根据目的蛋白的大小而定，目的蛋白的分子量越大，需要的转膜时间越长，目的蛋白的分子量越小，需要的转膜时间越短。

(2)在转膜过程中，特别是高电流快速转膜时，通常会有非常严重的发热现象，最好把转膜槽放置在冰浴中进行转膜。

(3)转膜的效果可以观察所使用的预染蛋白质分子量标准，通常分子量最大的1-2条带较难全部转到膜上。转膜的效果也可以用丽春红染色液对膜进行染色，以观察实际的转膜效果。也可以用考马斯亮蓝快速染色液对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色，以观察蛋白的残留情况。

二氧化硅样品做扫描电镜的临界电压是多少

氧Kα=0.52 硅Kα=1.74 电镜没有临界电压一说，楼主应该说的是能谱

能谱加速电压一般选择Kα的2-3倍，即3.4kv-5.2kv

什么是电镜负染技术

电镜负染技术就是用重金属盐如磷钨酸或醋酸双氧铀对铺展在载网上的样品进行染色；吸去染料，样品干燥后，样品凹陷处铺了一薄层重金属盐，而凸的出地方则没有染料沉积，从而出现负染效果。