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本文目录一览：

• 1、细胞周期试剂盒哪个牌子最好做
• 2、细胞周期检测的原理
• 3、索莱宝细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒的说明书有吗

细胞周期试剂盒哪个牌子最好做

caspase 3 8 9 正好前段时间做过。我用的是Biovision的试剂盒，做法上基本是一样的 只是在单次测试时所需的蛋白量的差别。但是如果用六孔板做的话其实处理的步骤都是一样的。在裂解完细胞，离心沉淀碎片时，可能需要超过1000g差不多也在一万转以上。

细胞周期检测的原理

碘化丙定（ Propidium,简称Pり是一种双链DNA的光料。碳化丙和双链DNA结合后可以产生光，并且光度和双链DNA的含量成正

比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细仪对细抱进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情兄，可以进行细周期和细

凋亡分析。碘化丙定染色后，假设60G1期细抱的荧光米度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期的気光量度的理论值为2,正在进行

DNA复制的S期出的英光强度为1-2之间。凋亡细击于细核发生浓缩以及发生DNA片段化 DNA fragmentation)导数部分基因组DNA片

断在染色过程中丢失，因比调亡细抱供化丙定染色后呈现明显的词染，即荧光蛋度小于1,在流式检观的光图上出现所谓的sub-G1峰，题凋亡

细胞峰。细抱发生凋亡时，由于浆和染色质浓、核碎裂，产生凋亡小体，使细抱的光射性质发生变化。在细凋亡的早期，细对前向角

光散射的能力显著降低，対侧向光散射的能力加或没有変化。在细抱周亡的究期，前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细抱仪测

走细光数射的变化观察细한周亡情况。

本试剂盒通常应用于培养的贴或浮细的细胞周期与细抱周亡检则。如果用于组织的细抱周期与细抱周亡检则，则必须把组织消化成单细记

状态，才可以进行检见。

索莱宝细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒的说明书有吗

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒

货号：C1052

规格：50T

保存：-20℃保存，一年有效。C1052-2碘化丙啶染色液(20×)需避光保存。本试剂盒可4℃保存，一个月内有效。

产品说明：

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色(Propidium staining，即PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。 碘化丙啶(Propidium，简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。

碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。

细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。

本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测。本试剂盒足够检测50个样品，每个样品的细胞数量可以为10-100万。

试剂盒组成：

试剂名称 规格

染色缓冲液 25mL

碘化丙啶染色液(20×) 1.25mL

RNase A (50×) 0.5 mL

使用方法：（仅供参考）

1. 细胞样品的准备：

a. 对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

b. 对于悬浮细胞：1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

2. 细胞固定：加入1毫升冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4℃固定2小时或更长时间。固定12-24小时可能效果更佳。1000g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的70%乙醇，以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS，重悬细胞。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50微升左右的PBS，以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

3. 碘化丙啶染色液的配制：参考下表，根据待检测样品的数量配制适量的碘化丙啶染色液：

试剂名称 1个样品 6个样品 12个样品

染色缓冲液 0.5mL 3mL 6mL

碘化丙啶染色液(20×) 25μL 150μL 300μL

RNase A (50×) 10μL 60μL 120μL

Final volume 0.535 mL 3.21 mL 6.42 mL

注：配制好的碘化丙啶染色液短时间内可以4℃保存，宜当日使用。

4. 染色：每管细胞样品中加入0.5毫升碘化丙啶染色液，缓慢并充分重悬细胞沉淀， 37℃避光温浴30分钟。随后可以4℃或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小时内完成流式检测，最好能在当日完成流式检测。

5. 流式检测和分析：用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。