不会,先-20度再-70度应该是避免温度降得太快而采取的阶段性降温。不过虽然细胞不会马上死,但不知道会不会影响保存的质量。
当然,我是猜的~
还是请示下上级比较好。。。。。
是会结冰的。细胞冻存液-20摄氏度是会结冰的,主要是只要是有一定的水,就会立马结冰,也会把细胞冻在里面。
1.我们用的是盒子装的,没见过你说的这种,你可以电话咨询厂家或者有经验的老师;
2.冻存管内加入细胞后一般放-20℃一到两个小时,然后转到-80℃放置6小时或者过夜,最后再放入液氮中,冻存管只要拧紧盖子就行,不需要其他处理;
3.从液氮罐中取出细胞后,要迅速在37℃水浴中融化细胞悬液,进行细胞复苏。
感受态细胞制备完成速冻后一般是负80度或者液氮中冻存
如果不具备条件,负20度短时间保存也可以。但是长时间保存的话需要负80度或者液氮中保存,并在培养液中加10%的DMSO
所以感受态细胞制备完成速冻后暂时存放负20度是可以的,但是不能长期保存
如果不具备条件,负20度短时间保存也可以,但是时间长了细胞内部液化度较高的情况下,细胞会由于流动性的原因造成不可逆损伤。所以长时间保存的话建议要放于负80摄氏度或者液氮中保存。
会有些影响,在活率方面.70%的细胞应该没问题.
1)传统方法: 冻存管置于4℃ 40min----20℃ 30min----80℃ 16~18h
(或隔夜)---液氮中长期储存.
注意:-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些.
(2)程序降温:利用已设定程序的程序降温仪以-1~-3℃/min的速度由室温降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮中长期储存.
关键词:冻存细胞放负20一整夜