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外泌体仪器怎么操作(外泌体分析仪)

2023-01-19 03:58:04 作者:max
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原生质体灭活方法有哪些

原生质体灭活方法有哪些

一、超速离心法,这是目前外泌体提取常用的方法 。此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足,电镜鉴定时发现外泌体聚集成块, 由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准,也有一些研究认为此种 方法得到的是微泡不是外泌体 。

二、过滤离心, 这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性 ,但同样存在纯度不足的问题。

三、密度梯度离心法, 用此种方法分离到 的外泌体纯度 高,但是前期准备工作繁杂,耗时,量少。

四、免疫磁珠法,这种方法可以保证外泌体形态 的完整,特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备,但是非中性pH 和非 生理性盐浓度会影响外泌体生物活性, 不便进行接下来的实验 。

五、PS亲和法,该方法将PS(磷脂酰丝氨酸)与磁珠结合,利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似,获得的外泌体形态完整,纯度高。由于不使用变性剂,不影响外泌体的生物活性,外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9 nature杂志发表了该方法的新数据,表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。

六、色谱法,这种方法分离到的外泌体在 电镜下大小均 一, 但是需要特殊的设备 , 应用不广泛 。

PH仪器怎么用?

PH测定仪的使用方法,保养与调试

内容:Benchop pH Meter“Thermo Orion 710plus“

操作步骤1.配制3M KCl 溶液,在电极初次使用或保存较长时间后重新使用前,重新更换电极填充液,并将电极浸泡于3M KCl 溶液中2h以上,以活化电极。注意事项:电极头应浸泡于3M KCl 溶液中2cm,浸泡的尖端过短,可能不能活化电极。2.…

内容:Benchop pH Meter“Thermo Orion 710plus“ 操作步骤

1.配制3M KCl 溶液,在电极初次使用或保存较长时间后重新使用前,重新更换电极填充液,并将电极浸泡于3M KCl 溶液中2h以上,以活化电极。注意事项:电极头应浸泡于3M KCl 溶液中2cm,浸泡的尖端过短,可能不能活化电极。

2.电极填充液的更换:每1-2月更换1次,先用注射器将填充液吸出,然后在注入少许新鲜填充液润洗电极腔,再吸出,然后注入新鲜填充液至距填充孔1.5cm处。在测量强酸性、强碱性、含有有机溶剂或污染严重的样品时,电极填充液至少应2周更换1次。在更换新鲜电极填充液后,将电极浸泡于3M KCl 溶液中2h以上后,再使用。

3.电极pH校正:在正常情况下,每天使用前校正电极1次。在电极的使用频率高时,可对电极进行pH校正2-3次。校正的所用的pH缓冲液必须新鲜配制,所用的pH校正缓冲液应避免校正时的污染,重复应用的次数不应超过5次。样品和pH校正缓冲液的温差不应大于5℃,建议样品和pH校正缓冲液置于同一室温下。电极pH校正采用二点自动校正。

4.样品的测量:先将活化的电极用ddH2O冲洗后,用纸巾将吸附电极头的水滴,但不应用纸巾擦拭电极头,以防止产生静电造成不稳定和误差。注意事项:在定标和测量时,应采用磁力搅拌器,特别是对于悬浮液体。为防止搅拌器将热量传递给样品溶液,在样品烧杯和搅拌器之间应置一隔热纸板。在电极的使用过程中,电极的填充孔必须打开。

5.电极的保养和维护:在每次使用后,均应用ddH2O彻底冲洗干净。如果每天均使用,可将电极浸泡于3M KCl 溶液中。如果长期不用,应将电极填充孔封闭,并在电极保护套中填塞一小块浸润过3M KCl 溶液的海绵,然后将电极轻轻装入电极套中,以防止电极头干燥。

6.主机自检:在第一次使用和平时操作出现故障时运行该程序。

①.电极与主机不相连接,用电极通路上的短路盖封闭电极通道。

②.将电源变压器与电源插座相连接,但不与主机相连接。

③.按住yes键不动,将电源变压器与主机电源接口相连接,直至屏幕出现2.6字样,松开yes键,仪器将自动进行电路和硬件自检,屏幕依次出现:TEST1、TEST2、 TEST3、 TEST4、 TEST5、 TEST6、 TEST7。

④.稍后屏幕出现0字样,即刻按压主机上每一个功能键,每压一个键屏幕将显示一个数字,按压每一个键的时间间隔不能超过4秒,否则将出现错误提示:E-07。如果屏幕出现E-07,则关机重新自检。在进入最后一个自检程序时,屏幕显示TEST8,然后仪器自动进入测量状态,屏幕显示7.000±0.002,其右上方并有MEASURE字样。

7.pH二点自动校正:在自动校正过程中,不能对仪器进行数据改动,可通过按压yes键退至测量模式。

①.将活化电极与主机相连接,按power键通电开机,仪器自动进入pH测量状态,使屏幕下缘的“▽”符号指向主机pH标示。按压mode键,“▽”符号可发生移动,以进行测量模式的选择。

②.用ddH2O冲洗电极并拭干后,将电极插入第1点pH7.00的定标缓冲液中,并用磁力搅拌器搅拌。

③.先按压绿色的2nd键,屏幕右侧出现2nd的字符,再按压mode/cal键,开始定标,屏幕上方显示CALIBRATE字样。

④.在电信号稳定后,屏幕右侧显示ready字样、下方显示P1字样,中间位置闪烁当前定标缓冲液的pH值,然后按压yes键确认,屏幕下方将显示P2字样,提示将电极插入定标第2点缓冲液(pH4.01或pH10.01)。

⑤.在第2点定标缓冲液的的电信号稳定后,屏幕右侧亦显示ready字样,按压yes键,屏幕下方将显示P3,此时按压measure/print键,电极斜率值将在屏幕上显示数秒钟,然后自动返回测量状态,即定标完成。

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效果挺好的。

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测量仪怎么使用 测量仪器的使用方法

1、放置:首先确定两观测点中间的位置,可以采用来回步数取折中步数为大概中点位置,再打开三脚架并使高度适中(与胸口同高)尽量使三只脚拉伸长度相同,在后期调平可以节约时间,扭紧制动螺旋,检查脚架是否牢固,防止摔倒;然后打开仪器箱,轻拿轻放,用连接螺旋将水准仪器连接在三脚架上,拧紧,防止松动掉落。

2、调平:粗平,调节脚螺旋,使圆水准气泡居中,当水泡位于中心位置时说明仪器呈水平状态;用食指和大拇指转动3个脚螺旋,气泡在哪里说明哪里偏高,这时候只要转动螺旋即可,操作方法符合该规则:(右手食指代表前进方向,左手大拇指代表前进方向)。

3、瞄点:用望远镜准确地瞄准目标,定位测量的位置。睁一眼,闭一眼,先用准星器粗瞄,固定方向,当发现目标在视野下消失时,即眼睛——准星器——目标,形成一线,这时候是看不见测量物体的,代表目标物体进入望远镜视野范围;再观测目镜,用微动螺旋精瞄,准确定位物体的位置。

4、读数:使用十字丝的中丝在水准尺上读数,从小数向大数读,读四位。(即是把头歪倒过来看),米、分米看尺面上的注记,厘米数尺面上的格数,毫米估读。

5、计算:目标高=后尺读数+后视高-前尺读数,两尺长度一样,测量出来的差距就是高程差,就能通过已知高程测下一点高程。

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