外泌体纯度检测hplc（外泌体鉴定方法）

本文目录一览：

• 1、HPLC测纯度的问题？
• 2、请问HPLC和GC检测的产品纯度会有差异吗？
• 3、hplc面积归一法纯度检测的原理
• 4、如何用HPLC进行蛋白质纯度检测及含量测定？或测相对分子量？
• 5、用hplc检测物质纯度比外标法计算含量低，为什么？纯度和含量哪个更能说明实际质量好坏？
• 6、hplc面积归一法纯度检测原理

HPLC测纯度的问题？

根据已知目标物的结构，从经验方面判断该用什么流动相，是否加入酸碱调节保留时间，让其出峰位置适中。第一次用标准品测过，如果下一步反应稳定，可以不测试，若不稳定仍需测试，第二，还跟产品本身有关，如果产品稳定不许测试，不稳定仍需测试如果产品是持续型生产，每一批次都要检测

请问HPLC和GC检测的产品纯度会有差异吗？

HPLC是高效液相色谱

GC是气相色谱

检测结果有没有差异主要是看产品中的杂质是不是在两种仪器上都有响应，这样的话也取决于两种仪器各自用的检测器的种类，详细说的话就有点复杂了。

简单的说，如果产品中的所有杂质都在GC上有响应，那就没有问题，如果有GC上无法响应的，那两种检测结果就会不同

hplc面积归一法纯度检测的原理

该物质浓度和峰面积成正比。根据查询hplc相关信息得知，hplc面积归一法纯度检测的原理该物质浓度和峰面积成正比。原理是该物质（的官能团）在某一特定波长下有吸收，并且，该物质浓度和峰面积成正比。

如何用HPLC进行蛋白质纯度检测及含量测定？或测相对分子量？

就是准备好你的样品，一定要过滤过的，或者离心的，不能有沉淀。

然后放在在高效液相色谱样品价中

设置HPLC的参数，包括流速，温度等等

之后观察独处的数据有几个特异性吸收峰，就可以看出来是否纯，都是什么杂质

根据读出的OD数据，计算蛋白含量

根据特征谱带预测是什么蛋白，与标准品或者发表的谱带比较，得出相对分子量

用hplc检测物质纯度比外标法计算含量低，为什么？纯度和含量哪个更能说明实际质量好坏？

色谱法按外标法或内标法以峰高或峰面积进行定量。

内标法用于GC和HPLC减小测定误差，曾经起到很好的作用

HPLC:

High Performance Liquid Chromatography

本法的精密度为批内变异系数＜4.6%，批间变异系数＜6.1%；最低检出限(信噪比=2)为3.1nmol/L；线性范围为50～1 000nmol/L；r=0.9996；平均回收率为97.1%。

该法在分离多组分混合物时，除第一组分外，其余均非纯态，因此仅适用于从含有微量杂质的混合物中切割出一个高纯组分

降低固定液的含量，可以降低液膜厚度，但k值随之变小，又会使C1增大。当固定液含量一定时，液膜厚度随载体的比表面积增加而精确。

hplc面积归一法纯度检测原理

高效液相色谱法。在实验里hplc面积，归一法纯度检测的原理是高效液相色谱法来进行的。hplc面积归一法纯度检测的原理该物质浓度和峰面积成正比。原理是该物质(的官能团)在某一特定波长下有吸收。