免疫细胞培养培养基（免疫细胞培养培养基是什么）

本文目录一览：

• 1、培养基的配制方法 培养基的配制方法是什么
• 2、细胞培养基有哪几种？
• 3、各种牌子免疫细胞无血清培养基的特点
• 4、了解了“免疫细胞”，那么它的具体的操作流程究竟是怎样的呢？
• 5、国产无血清培养基哪家好？

培养基的配制方法 培养基的配制方法是什么

1、配制用水

培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的

双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。

2、培养基

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

3、血清

培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。

4、抗菌素

为防止培养时期细菌的污染，可在培养基中添加适当抗菌素，一般用量与组织细胞培养相同：卡那霉素100单位/毫升，或双抗--青霉素100单位/毫升，链霉素100微克/毫升。

5、植物血凝素（PHA）

非增殖期的细胞不能制备染色体，如人外周血淋巴细胞，但在离体培养过程中，在PHA的作用下，可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。

经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。

PHA有粘多糖，蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂，蛋白质起凝集作用。PHA激活的细胞数随其浓度而增加，直至全部免疫活性细胞均

被激活为止，但PHA浓度过高会引起凝集，一般采用4%浓度为好。

细胞培养基有哪几种？

细胞培养的各种各样的人工培养基可以分为以下四种类型：

含血清的培养基：胎牛血清是动物细胞培养基最常见的补充成分。它用来作为一种成本相对较低的补充成分，提供动物细胞培养最佳的培养基。这些补充剂能够为不稳定或不溶于水的营养物质提供载体或螯合剂，提供激素和生长因子，蛋白酶抑制剂，并结合并中和有毒部分。

无血清培养基：培养基中含有血清存在有很多缺点，可能会成为免疫学研究中潜在的严重误解的原因。为了克服使用血清的这些缺点，一些无血清培养基中已经开发出来了。这些培养基通常是专门配制的，用以单一类型细胞的培养，包含确定量的纯化的生长因子、脂蛋白和其它蛋白质，而这些物质本来是由血清提供的。这些培养基也被称为“确定的培养基”，因为这些培养基中的物质是精确可知的。

确定化学成分的培养基：这些培养基包含无污染的超纯无机和有机成分，也可能含有纯蛋白质添加剂，如生长因子。这些成分通过基因工程细菌或酵母生产，添加维生素、胆固醇、特定氨基酸和脂肪酸。

无蛋白质培养基：无蛋白质培养基含有任何蛋白质，仅包含用于细胞培养所必需的非蛋白成分。相比血清培养基，无蛋白培养基促进较好的细胞生长和蛋白表达，并有利于下游的表达产物纯化。MEM，RPMI-1640等配方不含蛋白质，需要时可补充蛋白质。 不同类型的天然和人工培养基在表一中介绍。

各种牌子免疫细胞无血清培养基的特点

厚百提供：无血清培养基，一般都会添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等。看你应用于哪类细胞。我知道hyclone有一种适用于CHO细胞培养平台的，描述的特点如下：（ADCF是指无动物来源成分）

CDM4CHO

 -化学成分已知，ADCF； 

 -用于悬浮细胞培养； 

 -用于大规模培养。

SFM4CHO

-无蛋白； 

-用于悬浮细胞培养； 

-用于高密度生物反应器培养。

SFM4CHO-A

-无蛋白，ADCF;

-用于贴壁细胞培养； 

-支持多个CHO细胞系及多重培养环境。

SFM4CHO-Utility

 -无蛋白； 

 -用于悬浮细胞培养； 

 -支持多个CHO细胞系及多重培养环境。

● PF-CHO LS

● PF-CHO

● SFX-CHO

● CCM5

了解了“免疫细胞”，那么它的具体的操作流程究竟是怎样的呢？

我们都知道现在有一种自体免疫细胞疗法，主要是通过提取患者体内不成熟的免疫细胞，也就是采血，然后在实验室中进行培养使其具有一定能力后，再输回到患者体内。那么你是否了解它的临床操作流程具体是怎样的呢？

下面我们就带大家来看看具体的操作流程吧：

一、细胞采集前的评估与准备

1.掌握患者心理特点。

在细胞采集前我们要向患者及其家属讲解本次治疗的目的以及治疗的基本操作流程，让患者更多的了解可能会出现的副作用和需要配合的注意事项，使它有更多的心理准备，可以减轻思想顾虑并且签署知情同意书。

2.必查项目：血常规、传染病八项（乙肝五项、梅毒、艾滋、丙肝）。

3.血管的准备：要选择比较大、粗、直、而且不容易滑动、弹性好的血管，避免在有静脉炎、擦伤、硬结、瘢痕、皮肤有破损处进针。

4.保证充足的睡眠，避免受凉，预防感冒。

5.饮食指导：

(1)采集前1天患者需注意饮食，禁止食用油腻的食物，要保持饮食的清淡，最好是富含铁、钙类的食物。

(2)患者采集细胞的当天可以进食，但是需要根据采集的时间和病情，然后在早餐或中餐中食用含适量盐份的汤类、牛奶200〜400ml或普通的食物。

(3)采集前20分钟需要口服10%葡萄糖酸钙注射液10〜20ml左右，这样可以采集时出现预防枸橼酸的反应，例如口服葡萄糖酸钙液体可以根据患者血糖指数及个人习惯加入葡萄糖液改善口感。

6.要嘱咐患者在采集当天携带住院病历或门诊系列检查报告单。

　 　二、细胞采集

1．细胞采集前我们要准备一次性的50 ML的注射器一只，一次性7号或12号静脉采血针一个，还有无菌布一块，抗凝剂（肝素钠（12500U /2 ml））一支。

2在这之前，我们要仔细查看检验报告单和知情同意书，认真核对病人信息以及治疗方案，确认没有错误后，就可以开始填写注射器上的标识了。

3.标识需要标明病人信息，然后贴在注射器上，注意不要覆盖刻度；然后就可以准备无菌治疗盘，放上备采集的血样进行备用。

4.在采血前还要最后一次的对病人信息再次进行核对，以免出现错误。

在选择穿刺血管的时候：我们常规情况下都是选则取肘部粗大的血管，例如贵要静脉、正中静脉或头静脉（避开瘢痕及皮损）。

5.采血过程中要严格执行无菌技术的操作，按照常规浅静脉穿刺技术进行穿刺。

　 　三、采集后处理

1.在对病人采血完毕后，要迅速拔出采血针，然后按压穿刺点5－10分钟后，检查一下穿刺点在没有出血情况后，就可以将患者送回病房了，此时要嘱咐病人需要卧床休息30－60分钟，可以适当的饮用一些温开水；然后将采血针内的血液抽到注射器内，套回针套，旋紧，将管打结、固定完成后即可。

2.最后要再次认真核对注射器上的标识信息，确认无误后，将血样放在无菌布里包裹好，在装在运送箱里，进行严实的封闭。结束后，就可以嘱咐外送人员将血样送到实验室里进行分离和培养。

3.分离和结束后，就可以将免疫细胞治疗单和相关检验报告复印件随血标本一起送回实验室存档。

　 　四、细胞培养

我们细胞培养的过程一定要严格在符合国家规定的无菌GMP细胞操作室里进行。

　细胞培养成分和添加物（培养液、细胞因子、血清等）以及制备过程所用的全部耗材的来源和质量认证，都必须符合临床使用的质量要求，一定要采用无动物血清培养基来进行细胞培养。

[if !supportLists]五、[endif] 控制 细胞质 量的稳定

控制细胞的质量主要分为两大步，一是检定细胞，二是检测细胞外源因子。

(一）每批免疫细胞的检定 ：

(1)首先要控制细胞的数量和存活率：细胞的数量至少要满足临床的最低要求，而且存活率应必须满足不低于85%。

(3)另外我们还需要进行无菌试验：每批培养的体细胞在患者输注前都要进行无菌试验，这样才能保证输进去的细胞是无携带病菌并且高质量的。

(4)之后还要检测体内细胞的纯度和均一性。

(5)最后还要检测细胞生物学的效应。

　 　(二）体细胞制品外源因子的检测包括：细菌、真菌、支原体和内毒素。

　 　六、细胞回输

细胞回输属于 静脉输注治疗 ：主要是由临床科室的护士负责的。

当我们的治疗时间到了第15天之后，我们就可以开始按照生物免疫治疗中心出示的《细胞回输计划单》的相应要求进行细胞回输了。其中具体的回输细胞的类型将视患者病情决定。

总结：

以上就是免疫细胞疗法的具体流程了，相信大家看了之后对此都有了一定的了解，如果想要更多的了解一下，欢迎来联系我们呦！

国产无血清培养基哪家好？

国内生产无血清培养基的有兰州健顺、上海奥浦迈，上海埃泽思等。

无血清培养基也有具体细分领域，健顺、奥浦迈主要针对疫苗、抗体药生产领域培养基。

上海埃泽思主要针对细胞治疗领域，有干细胞、免疫细胞培养基以及细胞冻存等系列产品。