脂肪间质干细胞原代培养
1. 介绍脂肪间质干细胞 脂肪间质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells，ADMSCs）是一种来源于人类脂肪组织的间充质干细胞。这种细胞具有自我更新和多向分化能力，可向多种细胞类型发展，如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。因此，ADMSCs 在再生医学研究领域得到广泛应用。 2. 原代培养方法 原代培养是一种将组织细胞从体内取出并在体外培养的方法。首先要获取ADMSCs的组织样品和消化酶，消化酶的选择通常是 collagenase。程序如下： 步骤1：样品准备。从人体脂肪组织中取出样品。 步骤2：处理样品。将组织样品与消化酶混合，并加入适量的培养基，利用摇床上下震荡，从而将细胞组织分离出来。 步骤3：细胞收获。将处理后的细胞极其培养基一起放在离心管中，进行5分钟的低速离心运转，在将混合液倒入去离子水中冲洗后，在含有适量培养基的筛网中通过，以分离出细胞。 步骤4：细胞计数。利用细胞计数板或细胞计数器对分离出来的细胞进行计数。 步骤5：细胞培养。将上一步中分离出来的细胞将在含有适量胎儿牛血清和添加L-谷氨酰胺的DMEM（基本培养基）中培养，隔一定时间换液。 3. 培养条件的选择 在传统的2D（二维）培养条件下，采用DMEM/F12等基本培养基为主，并制定特殊的生长因子配方,如生长激素（bFGF）、胰岛素增强剂（insulin），来促进细胞生长，同时，需要进行低温保存，一般存储在液态氮中。 然而，在新兴的3D培养模型中，采用了一些构建出多孔支架的材料，如较成熟的高分子材料、蛋白质或矿物质等，以拟合真实组织的环境模型，提高了培养的效果。此外，还可以采用不同的体外3D生物反应器（Bios Reactors）等装置，来模拟组织的微环境。 4. 应用潜力 ADMSCs的应用主要包括骨组织再生、软骨组织再生和神经系统再生等多个方向。最近，ADMSCs也被用于诸如糖尿病、冠心病和肝脏移植等其他医学领域，成为其中的新兴领域。 5. 对比其他来源的间质干细胞 与其他来源的间充质干细胞相比，ADMSCs更容易获得并具有更广泛的修复和再生能力。此外，ADMSCs 具有较低的免疫原性，不会引起排异反应。因此，ADMSCs是一种应用前景广阔的新型细胞资源。 6. 结论 尽管脂肪间质干细胞在体外的原代培养中仍面临着许多挑战和问题，但这种细胞促进再生医学的应用非常有前途。因为随着技术的不断进步，更好的培养方法和应用技术的开发将会使这种细胞得到广泛的应用，并将在未来有更为广泛的应用前景。
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