提取乳牙干细胞步骤视频

细胞储存的应用 2023年06月24日 06:23 152 im

　　在近年来，医学科技得到迅速的发展与进步。而人类新的发现也使得我们对于“治疗”有了更多的认知。作为一种具有潜在应用前景的可再生干细胞来源，乳牙干细胞已经引起了广泛的关注。虽然提取乳牙干细胞是一个复杂的过程，但是随着技术的成熟，这一过程变得越来越简单和高效。

准备工作

　　首先要收集新鲜的、无龋齿、没有进行根管治疗的乳牙。然后用无菌钳子将乳牙取出，并使用缓冲盐水或含聚乙二醇的F12培养基管液冲洗牙髓，去除铁锈色液体，使牙髓干燥。

　　
在乳牙齿冠层上制造孔洞

　　用硬制磨头在乳牙冠层中心部位打孔，钻头不要和齿髓接触，破坏齿髓。能见到空腔后，再用扳钳缓慢地扳开孔洞，直到牙髓露出。

　　
乳牙磨碎处理

　　将乳牙分别放进细胞培养瓶番口，加封上活塞。然后，将瓶置于碎花机中，使乳牙完全破碎。加入PBS缓冲液或甘露醇，震荡5~10min，个别孤立的牙髓经过PBS冲洗后即可鉴定。

　　
鉴定乳牙干细胞的存在

　　利用微镜观察细胞发生情况，当超过50%的细胞形成了微小的聚集体时，即表明提取乳牙干细胞成功。

　　
培养乳牙干细胞

　　将乳牙干细胞分离出来后，转移至10%FBS DMEM/HIGH GLU＋ rh bFGF、LIF、N2SUP、ITSSup的旋转苗圃中，根据实验需要的分化因子或培养时间进行培养。