如何正确储存免疫细胞以保持其活性
如何正确储存免疫细胞以保持其活性
1. 保存前的准备
选择合适的采集方法：采集免疫细胞的方法有多种，如静脉穿刺、术中采集或淋巴结活检。不同方法对细胞活性可能产生影响。
处理温度：采集后立即将细胞置于 4°C 保存。避免细胞长时间暴露在室温下，以免影响活性。
使用合适的稀释液：使用含有血清或无血清培养基的稀释液，并考虑细胞类型的特殊要求。稀释液应无毒、无菌并能保持细胞活力。
细胞浓度：适当的细胞浓度对于储存至关重要。太高浓度会导致细胞死亡，太低浓度则不利于细胞培养。
2. 保存方法
冷藏储存：将细胞悬液置于 4°C，可保存数小时至数天，但长期储存不建议。
液氮储存：对于长期储存，液氮储存是 preferred 方法。将其置于 -196°C 液氮中，可以保存多年。
3. 保存细节
细胞的悬浮和冷冻：缓慢逐渐冷却细胞悬液，使用冷冻保护剂（如 DMSO）保护细胞膜和内在成分。
液氮储存：将细胞悬液装入冷冻管或冷冻袋，并缓慢置入液氮中。确保细胞完全浸没在液氮中。
冷冻管或袋的标签：明确标识冷冻管或袋，注明细胞类型、采集日期、浓度和任何其他相关信息。
4. 解冻和培养
快速解冻：将细胞悬液置于 37°C 水浴中快速解冻，避免过度暴露在室温下。
稀释和清洗：立即用培养基稀释细胞悬液，并用离心管清洗以去除冷冻保护剂。
培养条件：根据细胞类型设置适当的培养条件，包括培养基、温度、氧气浓度和生长因子。
5. 储存注意事项
避免冻融循环：反复冻融会损害细胞活力。如需再次储存，应使用新的细胞悬液。
定期监测：定期监测储存的免疫细胞，以评估其活性、活力和污染情况。
经验丰富的人员：免疫细胞储存应由经验丰富的专业人员进行，以确保正确的处理和最大的细胞生存率。
设备和材料：使用高质量的设备和材料，如冷冻管、冷冻袋、液氮罐和监测仪器，确保储存成功。
结论
通过遵循适当的保存方法，免疫细胞的活性可以最大程度地保持。了解保存前的准备、储存方法、解冻和培养技术以及储存注意事项至关重要。遵循这些准则有助于确保免疫细胞在使用时保持最佳功能。
标签： 细胞储存的注意事项
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