多功能干细胞储存条件指南
多功能干细胞储存条件指南
多功能干细胞(PSC)是一种具有自我更新能力和分化为各种细胞类型的独特细胞。它们具有巨大的治疗潜力,但储存对PSC的长期功能至关重要。以下指南将帮助您优化PSC储存条件,确保细胞的活力和分化能力。
储存环境
1. 温度:PSC必须储存在低温环境中,通常在-150°C或液氮中。
2. 惰性气体:储存容器应填充惰性气体,如氮气或氩气,以防止氧化和污染。
3. 无冰的保存:PSC对冰敏感,因此必须缓慢冷却和解冻以避免细胞损伤。
培养基选择
1. 无血清培养基:PSC通常在无血清培养基中培养,以减少污染和分化风险。
2. 生长因子:培养基应含有适当的生长因子,如bFGF和LIF,以支持PSC的自我更新和增殖。
3. 抗生素:培养基应含有抗生素,以防止细菌和真菌污染。
储存介质
1. 冷冻保护剂:冷冻保护剂,如DMSO或FBS,可用于保护PSC免受冷冻损伤。
2. 冷冻培养基:PSC应冷冻在含有冷冻保护剂的培养基中。
3. 冷冻袋:冷冻袋应无菌且防漏,以防止污染和渗漏。
冷冻过程
1. 缓慢冷却:PSC应缓慢冷却至-80°C,通常以1–2°C/分钟的速度。
2. 长期储存:冷冻的PSC应储存在-150°C或液氮中,以确保长期稳定性。
3. 标记和追踪:冷冻管应适当标记和追踪,以方便识别和记录。
解冻过程
1. 快速解冻:PSC应迅速解冻,通常在37°C水浴中,以尽量减少细胞损伤。
2. 洗涤:解冻后的PSC应洗涤以去除冷冻保护剂。
3. 培养:解冻的PSC应接种到预热的培养基中,并监测其生长和分化。
持续监测
1. 定期检测:PSC应定期检测其活力、分化能力和污染。
2. 备份储存:建议备份储存PSC,以防意外事件或储存失败。
3. 专家咨询:如果您遇到PSC储存问题,请联系专家以寻求建议。
结论
遵循这些储存条件指南至关重要,以保持PSC的活力和分化能力。通过优化储存环境、培养基选择和冷冻/解冻过程,您可以确保PSC的研究和治疗应用的长期成功。
标签: 细胞储存的技术
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