流式细胞术样本储存:冻存和细胞保存的全面指南
流式细胞术样本储存:冻存和细胞保存的全面指南
前言
流式细胞术是细胞检测和分析的强大工具。然而,为了确保可靠和准确的结果,对样本进行适当的存储至关重要。本文将提供有关流式细胞标本储存的全面指南,包括冻存、细胞保存和最佳实践。
一、流式细胞术样本冻存
1. 选择合适的冷冻培养基
选择含有血清或蛋白的冷冻培养基,以保护细胞免受冷冻损伤。
2. 制备单细胞悬液
用PBS洗涤细胞,并用胰蛋白酶或EDTA溶液制备单细胞悬液。
3. 添加冷冻培养基
将冷冻培养基加入细胞悬液中,体积与细胞悬液体积相等。
4. 分装和冷却
将细胞悬液分装到冷冻管或冷冻盒中。慢慢冷却至4°C,然后转移至-80°C的冰箱中。
5. 液氮长期储存
对于长期储存,将细胞转移至液氮中。
二、流式细胞术样本细胞保存
1. 选择合适的培养基
选择含有血清或蛋白的培养基,以提供细胞生长所需的营养物质。
2. 制备单细胞悬液
与冻存类似,制备单细胞悬液并用合适的培养基洗涤。
3. 加入培养基
将细胞悬液加入培养基中,使其处于对数生长期。
4. 培养和监测
将细胞培养在37°C、5% CO2的培养箱中。定期监测细胞活力和生长率。
三、流式细胞术样本储存的最佳实践
1. 细胞选择
选择合适的细胞类型,确保细胞状态良好。
2. 避光
避免将样本暴露在光线下,因为光线可能导致细胞损伤。
3. 维护无菌条件
在储存过程中保持无菌条件,以防止细菌或真菌污染。
4. 逐步复苏
在复苏细胞之前,逐步解冻并稀释冷冻培养基,以减少热冲击。
5. 验证细胞活性
在使用样本进行流式细胞术分析之前,验证细胞活性至关重要。
6. 记录储存信息
详细记录储存条件、批次号和储存时间。
结论
流式细胞术样本的适当储存对确保可靠和准确的分析结果至关重要。通过遵循本文概述的最佳实践,您可以延长样本的活力和完整性,从而获得可靠的流式细胞术数据。
标签: 细胞储存的技术
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