储存细胞,提取细胞液:指南
储存细胞,提取细胞液:指南
1. 储存细胞
选择合适的细胞保存液:选择无毒、渗透压平衡的保存液,以保持细胞完整性和活力。
准备细胞:收集细胞,洗涤并计数。将细胞稀释到适当的浓度。
加入保存液:将细胞液转移到细胞保存液中,轻轻混合。
冷冻细胞:将细胞悬液转移到冷冻管中,缓慢冷却至-80℃。使用液氮罐或机械冷冻机冷冻细胞。
2. 提取细胞液
复苏细胞:将冷冻细胞快速解冻并在培养基中洗涤。
离心细胞:以高离心力离心细胞,将细胞沉淀收集到底部。
收集细胞液:小心去除上清液,即细胞液。
过滤细胞液:使用0.22μm过滤器去除细胞碎片。
3. 储存细胞液
选择合适的储存容器:选择无菌、密闭的容器,例如塑料冻存管。
加入保护剂:在细胞液中加入保护剂,例如甘油或二甲基亚砜(DMSO),以防止冷冻损伤。
冷冻细胞液:将细胞液转移到储存容器中,缓慢冷却至-80℃。使用液氮罐或机械冷冻机冷冻细胞液。
4. 解冻细胞液
快速解冻:在37℃水浴中快速解冻细胞液。
加入培养基:解冻后,将细胞液转移到培养基中,轻轻混合。
去除保护剂:使用透析或离心方法去除保护剂。
5. 应用
提取的细胞液可用于多种应用,包括:
研究:研究细胞代谢、信号传导和基因表达。
诊断:检测疾病、药物反应和环境毒性。
治疗:开发细胞疗法、再生医学和个性化医疗。
优点
保存宝贵细胞:储存细胞液可以保留细胞的完整性,从而避免细胞培养和冷冻保存的风险。
提取高价值成分:细胞液含有丰富的蛋白质、酶和代谢物,可用于研究和治疗应用。
消除培养限制:通过储存细胞液,可以绕过细胞培养的限制,例如细胞增殖和分化问题。
结论
储存细胞和提取细胞液是一种强大的技术,可促进细胞研究、诊断和治疗的进步。通过遵循本文概述的步骤,您可以成功保存和提取细胞液,以释放其宝贵的科学和医疗潜力。
标签: 细胞储存的技术
相关文章
发表评论