优化细胞储存瓶:储存条件指南
优化细胞储存瓶:储存条件指南
细胞储存瓶是用于长期保存细胞样本的多用途工具。了解适当的储存条件对于保持细胞活力和完整性至关重要。本指南将探讨细胞储存瓶的最佳储存条件,确保细胞样本在长期的储存中维持其质量。
1. 储存温度
最佳储存温度范围:-20°C 至 -80°C
低温储存:液氮储存罐,-196°C
中期储存:-20°C 至 -80°C 冰箱或超低温冰箱
2. 容器密封
储存瓶应密封良好,防止污染和水分蒸发
使用无菌密封垫圈和盖子
避免多次开合容器
3. 避光
光照会损害细胞,导致 DNA 损伤和死亡
将储存瓶存放在避光处或使用不透光容器
尽量使用不透光的黑色或棕色塑料瓶
4. 避免冻融循环
每次冻融循环都会对细胞造成压力
尽量一次冻存并长期储存
如果需要重新冷冻,应在短时间内快速完成并使用新鲜培养基
5. 培养基选择
使用含有胎牛血清或其他稳定剂的无血清培养基
培养基应无菌且含有抗生素和抗真菌剂
6. 样本制备
在储存前将细胞清洗并悬浮在培养基中
细胞浓度应根据储存条件和细胞类型而定
使用无菌技术处理样本
7. 液氮储存
仅适用于预期长期储存(>10 年)
使用细胞冷冻保护剂将细胞缓慢冷冻至 -80°C
将细胞悬浮液置于液氮冷冻管中
确保液氮水平足够且容器密封良好
8. 细胞恢复
细胞恢复应在无菌条件下进行
将储存瓶快速解冻,转移至预热的培养基中
通过离心洗涤去除任何冷冻保护剂
在新鲜培养基中培养细胞并对其进行监测
结论
遵循这些储存条件指南对于维持细胞储存瓶中细胞样本的活力和完整性至关重要。通过优化储存温度、容器密封、避光、避免冻融循环、选择合适的培养基、正确制备样本以及采用适当的液氮储存和细胞恢复技术,可以确保细胞样本在长期的储存中保持最佳状态。遵循这些指南有助于促进研究、诊断和治疗中的科学进步,同时确保细胞样本的质量和可靠性。
标签: 细胞储存的注意事项
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