优化瓶装细胞储存:保护宝贵资产
优化瓶装细胞储存:保护宝贵资产
1. 选择合适的储存瓶
选择高质量的、无菌的、经过细胞培养验证的储存瓶。
根据预期储存量选择合适的容量。
考虑瓶子的盖子类型(螺纹盖或防漏盖),以最大程度地减少污染风险。
2. 制备储存液
使用高质量的细胞培养基,并添加合适的血清、生长因子和其他补剂。
根据细胞类型和储存时间优化储存液组成。
确保储存液是新鲜的,没有受到污染。
3. 细胞悬浮
从培养皿或悬浮培养物中小心收集细胞。
轻柔地将细胞重悬浮在储存液中,避免损坏细胞。
根据细胞类型和储存时间调整细胞浓度。
4. 加入保护剂
加入低温保护剂(如二甲基亚砜或其他冷冻保护剂)以保护细胞免受冷冻损伤。
优化保护剂的浓度以最大程度地提高细胞活力。
5. 冷冻
将装有细胞的储存瓶缓慢冷却至 -80°C。
使用受控速率的冷冻装置或程序化的冷冻方案。
避免过度冷冻或过快的温度变化。
6. 长期储存
冷冻后,将储存瓶转移到液氮罐或机械冷冻机中。
确保存储环境的温度始终保持在 -150°C 或以下。
定期监测液氮罐的液氮水平,以避免样本解冻。
7. 复苏
当需要时,从储存中取出储存瓶。
在 37°C 的水浴中迅速解冻。
稀释细胞悬浮,以去除保护剂。
轻柔地离心细胞并用新鲜培养基重悬浮。
8. 质量控制
复苏后,评估细胞活力、增殖能力和形态。
进行适当的无菌检查以检测是否存在污染。
保存详尽的储存和复苏记录以跟踪样本质量。
建议
使用专属冷冻室或冷冻箱储存细胞,以避免与其他样品交叉污染。
在冷冻前对细胞进行分批,以方便复苏和质量控制。
备份细胞储存瓶以防意外发生。
与细胞储存专家或技术支持人员合作,以优化储存和复苏方案。
定期审核储存和复苏协议,以确保最佳实践。
通过遵循这些最佳实践,您可以优化瓶装细胞的储存,确保细胞在储存和复苏后保持活力和完整性。保护宝贵的细胞资产至关重要,可以为您的研究或临床应用提供长期支持。
标签: 细胞储存的注意事项
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