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免疫细胞储存操作流程:分步详解

细胞储存的注意事项 2024年03月24日 20:17 87 im

  免疫细胞储存操作流程:分步详解

  1. 细胞采集

   从健康供体处采集外周血或骨髓。

   使用灭菌容器和抗凝剂进行采集。

   严格遵守无菌操作技术以防止污染。

  2. 细胞分离

   使用密度梯度离心或磁珠法将免疫细胞从其他血细胞中分离。

   针对特定免疫细胞亚群(例如 T 细胞、B 细胞、NK 细胞)进行优化分离。

   确保收集到的细胞纯度高、活力高。

  3. 细胞培养

   将分离出的免疫细胞置于含有生长因子和营养物质的培养基中。

   在适当的温度和 CO2 条件下进行培养。

   密切监测细胞生长和增殖,优化培养条件。

  4. 细胞激活

   使用免疫刺激剂(例如抗体、细胞因子)激活免疫细胞。

   激活后,免疫细胞获得增强功能,包括增殖、细胞毒性和免疫调节特性。

  5. 细胞扩增

   使用特定生长因子和培养条件,对激活的免疫细胞进行扩增。

   在保证细胞活力和功能的同时,最大程度增加细胞数量。

  6. 细胞冻存

   使用低温和保护剂(例如二甲基亚砜)冷冻免疫细胞。

   缓慢冷冻至液氮温度(-196°C)以保持细胞完整性。

   存储在液氮罐中,确保长期保存。

  7. 细胞解冻

   需要使用时,从液氮罐中取出冰冻的免疫细胞。

   使用预热浴或快速解冻方法迅速解冻。

   洗涤和重新悬浮细胞以去除保护剂。

  8. 细胞评估和验证

   解冻后的免疫细胞进行活力、纯度和功能评估。

   使用流式细胞术、ELISPOT 测定或其他方法验证细胞特性。

   确保细胞满足预期规范,以在临床应用中发挥预期效果。

  9. 细胞输注

   将评估合格的免疫细胞输注到患者体内。

   使用静脉或其他给药途径,取决于细胞类型和治疗目的。

   监测患者输注后的反应和治疗结果。

  10. 细胞质量控制和安全性监测

   在整个操作过程中,实施严格的质量控制措施以确保免疫细胞的安全性、纯度和功能。

   定期进行细胞培养、冻存和解冻程序的验证。

   监测患者的输注后反应,并采取适当的安全措施。

标签: 细胞储存的注意事项

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