TRIzol 储存细胞：高效释放蛋白质
TRIzol 储存细胞：高效释放蛋白质
前言
细胞储存对于各种生物学研究至关重要。研究人员需要能够可靠地储存细胞样本，以供将来分析。TRIzol 是一种广泛使用的试剂，用于储存细胞样本并提取蛋白质。在本篇文章中，我们将探讨 TRIzol 储存细胞的优点，并说明如何使用 TRIzol 从储存的细胞中提取蛋白质。
TRIzol 储存细胞的优点
TRIzol 储存细胞具有以下优点：
1. 稳定的 RNA 和蛋白质保存： TRIzol 是一种高盐溶液，含有胍盐。这些盐通过变性蛋白质和解离 RNA 分子来抑制核酸酶和蛋白酶的活性，从而确保 RNA 和蛋白质的稳定性。
2. 高效的蛋白质提取： TRIzol 通过破坏细胞膜和核膜，释放细胞内蛋白质。与其他细胞储存方法相比，TRIzol 提取的蛋白质产量更高。
3. 节省空间和时间： TRIzol 储存细胞不需要特殊设备或耗时的冷冻程序。细胞样本可以在室温下储存，节省了空间和时间。
4. 多用途性： TRIzol 储存细胞不仅可以用于蛋白质提取，还可用于 RNA 和 DNA 提取。这使得 TRIzol 成为一种多用途工具，可以满足多种实验需求。
从储存细胞中提取蛋白质
使用 TRIzol 从储存细胞中提取蛋白质的步骤如下：
1. 解冻细胞： 将储存的细胞样本置于 37°C 水浴中解冻。
2. 添加 TRIzol： 将推荐体积的 TRIzol 加入细胞样本中。
3. 涡旋： 涡旋混合细胞与 TRIzol，直至溶液呈均匀乳状液。
4. 孵育： 将混合物在室温下孵育 5 分钟，以完全裂解细胞。
5. 氯仿提取： 加入氯仿提取混合物，涡旋混合并离心。这会将混合物分层为水相和有机相。
6. 异丙醇沉淀： 从水相中取出上清液，并加入异丙醇沉淀蛋白质。
7. 离心： 离心混合物以沉淀蛋白质。
8. 洗涤： 用 80% 乙醇洗涤蛋白质沉淀。
9. 干燥： 将蛋白质沉淀物置于干燥器中干燥。
10. 溶解： 用适当的缓冲液重新溶解蛋白质沉淀物。
总结
TRIzol 储存细胞是一种简单有效的方法，可用于稳定细胞并从储存的细胞中提取蛋白质。其稳定的 RNA 和蛋白质保存，高效的蛋白质提取，节省时间和空间以及多用途性使其成为生物学研究中的宝贵工具。通过遵循上述步骤，研究人员可以从储存细胞中可靠地提取蛋白质，用于各种下游分析。
标签： 细胞储存的流程
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