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脂肪干细胞储存:操作流程图

细胞储存的种类 2024年04月15日 19:03 260 im

  脂肪干细胞储存:操作流程图

  前言

  脂肪干细胞(ADSCs)因其获取容易、体外增殖能力强和多向分化潜能而备受关注。随着再生医学的快速发展,脂肪干细胞的储存和应用前景广阔。本文旨在通过流程图的形式,详细介绍脂肪干细胞储存的各个步骤,为相关专业人士提供参考。

  1. 抽取脂肪组织

   使用钝头抽脂针,在局部麻醉下从腹部或臀部等部位抽取脂肪组织。

   抽取量根据干细胞储存目的和个人情况而定,通常为 50-150 毫升。

   脂肪组织应尽可能新鲜,避免长时间暴露在空气中。

  2. 脂肪组织处理

   将抽取的脂肪组织用生理盐水冲洗干净,去除血液和其他杂质。

   将脂肪组织机械或酶解断碎,释放出干细胞。

   离心分离出含有脂肪干细胞的细胞悬液。

  3. 细胞计数和活率检测

   使用细胞计数板或流式细胞仪计数细胞数量。

   进行细胞活率检测,如 MTT 或流式细胞术,以确定干细胞的活力。

  4. 细胞培养

   将细胞悬液接种到含有生长因子的培养基中。

   保持适当的培养条件,如温度(37°C)、CO2(5%)和湿度。

   定期换液和传代培养,以维持细胞生长。

  5. 干细胞扩增

   在培养条件下,干细胞将增殖扩大。

   根据需要,可通过传代培养进一步扩增干细胞数量。

  6. 制备储存液

   对扩增的干细胞进行低温保存操作前的制备。

   加入保护剂,如二甲基亚砜(DMSO)和人血清白蛋白(HSA),以保护细胞免受冷冻损伤。

  7. 冷冻保存

   将制备好的储存液分装到冷冻管中。

   使用程序化的冷冻装置,逐步降低温度至 -196°C。

  8. 质量检测

   冷冻保存后,对干细胞进行质量检测,包括:

   细胞活力检测

   细胞数量和分化潜能检测

   污染物检测(细菌、真菌)

  9. 长期储存

   合格的干细胞储存液在液氮罐中长期储存。

   储存温度维持在 -196°C。

  10. 解冻和回输

   需要时,通过快速解冻装置解冻干细胞储存液。

   进行细胞洗涤,去除保护剂。

   回输干细胞至患者体内,用于治疗或研究目的。

  结语

  通过遵循上述操作流程图,可以安全有效地储存脂肪干细胞。这些储存的干细胞可作为宝贵的生物资源,用于再生医学、组织工程和药物发现等领域,为疾病治疗和健康管理提供新的可能性。

标签: 细胞储存的种类

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