小鼠间充质干细胞流式鉴定（大鼠间充质干细胞）

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求助流式细胞仪鉴定间充质干细胞的问题

间充质干细胞最早在骨髓中发现，随后还发现存在于人体发生、发育过程的许多种组织中。目前, 我们能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺等组织以及羊水、脐带血中分离和制备间充质干细胞，用得最多的是骨髓来源的间充质干细胞。但骨髓来源的间充质干细胞存在以下问题：随着年龄的老化，干细胞数目显著降低、增殖分化能力大幅度衰退；制备过程不容易质控；移植给异体可能引起免疫反应；取材时对患者有损伤，患者有骨髓疾病时不能采集，即使是健康供者，亦不能抽取太多的骨髓。这都限制了骨髓间充质干细胞临床应用，使得寻找骨髓以外其他可替代的间充质干细胞来源成为一个重要的问题。

流式细胞鉴定骨髓间充质干细胞对照怎么设立

流式细胞鉴定骨髓间充质干细胞对照怎么设立

骨髓基质细胞是存在于骨髓中的一类多能干细胞，具有分化成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和其他几种结缔组织细胞（如腱细胞）。亦可转分化成心肌细胞和骨骼肌细胞。骨髓间充质干细胞现已被归为结缔组织成体干细胞。事实上，骨髓基质细胞中的间充质干细胞数量是很少的，约占细胞总数的10万分之一，其定向分化也不均一，现在越来越多的研究揭示骨髓间充质干细胞及其初步分化的祖细胞或称前体细胞(precusor, progenitor cells)具有一些特殊的表面蛋白特征；此外，干细胞具有多向分化及自我更新能力，其细胞复制分裂方式是不对称分裂，这明显不同于普通的细胞。通过贴壁法或Percoll等细胞分离介质只能获得混合的骨髓基质细胞，只有应用免疫磁珠、流式细胞仪等将其进一步分离纯化后，才能称为骨髓间质干细胞。

大鼠小鼠间充质干细胞区别

MSC的细胞表面标志物鉴定常采用流式细胞仪来进行。MSC属混杂细胞群，其表面抗原也具有非专一性, 它可同时表达间质细胞、内皮细胞和表皮细胞的表面标志，如粘附因子、生长因子和细胞因子受体以及整合素家族等。

MSC的细胞表面标志物鉴定标准为：

① CD105、CD73和CD90阳性率≥90%；

② CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79α或CD19、HLA-DR呈阴性，阳性率≤5%。

不同组织来源的MSC可共享相同的细胞表面标记，如CD29和CD44。

03 多向分化潜能鉴定

MSC具有在体外分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肝细胞等定向分化的能力，所以鉴定MSC的多向分化潜能也是重要的鉴定方法之一。MSC成骨诱导分化最常用的染色方法是茜素红染色法，成脂诱导分化最常用的染色方法是油红O染色法，而成软骨诱导分化最常用的方法是阿利辛蓝染色、悬浮培养。

如何鉴定间充质干细胞纯度

做流式 cd34,cd90,cd105阳性指标要在95%以上，还有其他好几个指标，本人具体不做这方面工作，只知道这些。或者在显微镜下观察细胞形态，一般是梭形

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