间充质干细胞外泌体抗炎机制（间充值干细胞外泌体）

通过本文，我们希望能够向大家提供间充质干细胞外泌体抗炎机制等有用的知识，从而有效解决大家目前面临间充值干细胞外泌体的问题。 

什么是细胞外泌体？

外泌体之前是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。当外泌体在1980年首次发现后，曾被认为是细胞排泄废物的一种方式，如今发现外泌体具有多种多样的功能。

外泌体组成成分：外泌体成分是高度异质性的，能反映出产生它们的细胞表型状态，所以外分泌体发展成为了液体活检的重要分支。肿瘤病人外泌体异质性会升高。

外分泌体成分：由脂质双层组成，包含细胞的所有已知的分子成分，包括蛋白质、RNA和DNA。

外泌体功能：准确的说，外泌体功能未知。

外泌体可携带蛋白质药物及核酸等，治疗潜力巨大：

1、心血管疾病：使用外泌体携带修复分子损伤的心肌，可进行特异性修复。

2、神经退行性病变：使用神经或大脑特异性的靶分子，将携带药物的外泌体，送至神经系统，治疗大脑区域的疾病或者肿瘤；

3、皮肤损伤：将有助于伤口愈合的分子，通过外泌带到伤口局部，进行治疗。外泌体还可以携带抗炎分子到达炎症局部，进行抗炎治疗等。

间充质干细胞有什么作用呢，有人在汉氏联合存吗？

1、间充质干细胞可以通过细胞与细胞间的直接接触，以及分泌效应分泌生物活性因子，如生长因子、细胞因子和趋化因子等行使其免疫调节作用。比如MSC与巨噬细胞相互作用后，上调巨噬细胞中与吞噬功能相关的分子表达，使得巨噬细胞对微生物的吞噬能力增强，减少入侵的微生物对免疫细胞的进一步刺激。

2、间充质干细胞还可以有效抑制T细胞的过度活化，它可以通过抑制PBMC（外周血单核细胞）形成抗原递呈细胞——树突状细胞（DC），抑制淋巴细胞增殖，减少T细胞的数量。还可以直接通过调控T细胞的活化亚群含量，从而抑制T细胞的过度活化。

3、MSC可以上调Treg细胞来抑制促炎症因子IFN-g的释放，上调Th2来促进抗炎因子IL-4的释放，从而激发机体免洗系统自身的调节能力。

细胞外泌体是什么？

外泌体——是一类有细胞释放的细胞外囊泡。外泌体的特点见正文。

细胞外囊泡——简称EV，是由细胞释放的各种具有膜结构的囊泡结构统称，这些囊泡的直径可以从30、40nm到8、9um。细胞外囊泡有不同的亚群，而目前研究最火热的是外泌体这个亚群。

然而由于目前很难纯化到非常纯的外泌体亚群，人们纯化到的通常是直径小于200nm的囊泡，因此越来越多的人开始称之为sEV（即 small extracellular vesicle，小细胞外囊泡）。为了严谨，所以今天我们也以细胞外囊泡来称呼这些膜泡结构。本文中没有特殊说明的情况下，细胞外囊泡主要指外泌体和微囊泡。

今天主要介绍内容包括细胞外囊泡的研究意义、细胞外囊泡的分类、细胞外囊泡含有的成分、细胞培养上清的制备、细胞外囊泡的保存、细胞外囊泡的鉴定实验要求。所有内容都参考目前已发表的综述，并非hzangs杜撰。所以请新朋友们放心学习。

细胞外囊泡的研究意义

目前，细胞外囊泡的功能还没有完全阐明。已有的报道认为它们能够调节宿主-病原体的相互作用，参与传染性和炎性疾、神经疾病和癌症等很多种疾病的病理过程，同时在正常的生理过程中也发挥着介导细胞间通讯的重要功能，已有文章报道细胞外囊泡在发育中也发挥着重要作用。细胞外囊泡在临床医学中也有十分光明的应用前景，主要是因为它们含有丰富的生物标志物，可用于监测临床状态，治疗反应，疾病进展等，同时由于它们具有递送生物分子的功能，因此它们还有发展成临床药物递送载体的潜力。

细胞外囊泡的分类

细胞外囊泡—这个词是由国际细胞外囊泡学会（ISEV）创造的术语，根据细胞外囊泡的生物合成或释放途径可以对囊泡进行分类：外泌体（exosomes）直径为30-150nm，起源于内吞途径，其密度约为1.11-1.19g mL-1；微粒/微囊泡（microparticles/microvesicles）直接从质膜释放，直径约100-1000nm；凋亡小体（apoptotic body/bleb）直径约为50nm-2μm，由细胞凋亡产生；肿瘤小泡（large oncosomes）直径约1-10μm，由肿瘤细胞释放产生；以及其他各种EV亚群。由于不同EV亚群的大小以及它们的所包含的生物分子存在差异，因此现在已经有几个小组开始表征EV亚群的组成。最近的论文声称，基于一般表面蛋白质组学分析或个别EV群体的转录谱，对细胞外囊泡进行了成功的亚群分类。目前可以通过差速离心、过滤、免疫亲和、层析、流式细胞分选、密度梯度离心选取不同密度区域等多种手段大致分离不同的细胞外囊泡亚群，但是这些方法都不能完全纯化到特定的亚群，分离到的通常是富集了某一个亚群同时带有其他细胞外囊泡亚群。

细胞外囊泡含有的成分

细胞外囊泡的组成成分并不是随机的，每一个细胞外囊泡都会携带特定的分子信息。 实际上，这些纳米尺寸的细胞外囊泡能够携带蛋白质，脂质，核酸和糖等生物活性分子在细胞间传递信号，并且其包装的独特分子构成决定了要传递给受体细胞的细胞外信号的类型。有一个复杂的分选系统来决定那些分子能够进入细胞外囊泡。

细胞培养上清的制备

目前有两个策略来制备细胞培养上清用于提取细胞外囊泡。使用去除细胞外囊泡的胎牛血清（FBS）培养基培养细胞和使用不含FBS的培养基培养细胞（血清饥饿细胞）。但是目前一些高水平的文章报道使用的方法通常是前者。另外，有些文章开始关注去除细胞外囊泡的胎牛血清中游离RNA对实验结果的影响，但是目前并没有形成共识。如果需要先储存培养上清，一定量后再用于细胞外囊泡分离，那需要预先去除体系中的死细胞和细胞碎片。

细胞外囊泡的保存

Lőrincz等人曾对中性粒细胞来源的细胞外囊泡做了不同条件的储存，之后再去分析这些囊泡的特性，他们发现虽然细胞外囊泡样品中囊泡数量和形态没有明显变化，但即使是储存在-20或-80摄氏度情况下的细胞外囊泡也存在磷酯酰丝氨酸外翻明显增多的情况；但他们同时也发现，尿液来源的细胞外囊泡并没有这些变化。Kalra等人分离了来自结直肠癌细胞的细胞外囊泡，不同条件保存一定时间后进行PKH67染色跟踪细胞外囊泡的摄取，分析发现这些囊泡依旧可以被细胞摄取。就目前的情况，学者们并未就储存条件对细胞外囊泡是否有影响达成共识。因此建议大家实验时分离细胞外囊泡后尽快用于实验，尽量减少储存过程。

细胞外囊泡的鉴定及实验要求

根据国际细胞外囊泡协会于2014年发表的一个指导手册（MISEV），鉴定外泌体首先需要通过WB来鉴定细胞外囊泡的标志蛋白是否存在于样品中，通过电子显微镜来观察样品中细胞外囊泡的形态特征，通过NTA等手段来分析样品中细胞外囊泡的群体特征（粒子浓度、直径分布等）。

今天就先介绍到这里。细胞外囊泡领域作为生物学研究中的一个新兴领域越来越受到学者和生物公司的关注，也有越来越多的研究报道出现。但是我们也要清楚的认识到该领域的研究技术依旧不完善，对细胞外囊泡的认识依旧不充分，细胞外囊泡研究依旧处于一个起始阶段，要走的路还很长。

干细胞是怎么免疫调节调理身体系统？

人体是由细胞构成的。细胞是构成人体形态结构和功能的基本单位。形态相似和功能相关的细胞借助细胞间质结合起来构成起来的结构成为组织。几种组织结合起来，共同执行某一种特定功能，并具有一定形态特点，就构成了器官。若干个功能相关的器官联合起来，共同完成某一特定的连续性生理功能，即形成系统。

干细胞修复免疫系统

免疫系统是一种保护人体免受外来病菌入侵的功能系统，由免疫器官、免疫细胞和免疫物质组成。它能发现和清除对人体有害的一切物质，保持人体健康。

免疫系统功能免疫系统能够识别和清除外来入侵的抗原（如病原微生物等），使人体免于病毒、细菌、污染物质及疾病的攻击。

免疫系统能够识别和清除体内发生突变的肿瘤细胞、衰老细胞、死亡细胞和其他有害的成分。

另外，免疫系统还可以通过自身免疫耐受和免疫调节使身体内环境保持稳定，修补受损的器官和组织，恢复其原本的功能。

干细胞恢复唿吸系统功能

唿吸系统是执行机体和外界进行气体交换的器官的总称，主要功能是与外界进行气体交换，唿出二氧化碳，吸进氧气，进行新陈代谢。      

干细胞可以分化出人体唿吸系统的各种功能细胞，如肺泡细胞、成纤维细胞、毛细血管细胞、支气管细胞等，新生的这些功能细胞可以替换掉坏死病变的细胞，恢复气管、支气管，肺部的功能，进而恢复唿吸系统的正常生理结构和功能。

干细胞移植对预防和治疗支气管炎、哮喘病、肺纤维化等唿吸系统疾病有很好的疗效。肺纤维化是一种以肺部纤维化为主要病理改变的疾病，包括特发性肺纤维化、尘肺、硅肺、间质性肺炎等。患者在移植干细胞后，肺纤维化逐渐被降低，肺组织修复，肺功能好转，唿吸系统功能被全面调整。

干细胞调理消化系统

消化系统由消化道和消化腺两大部分组成。消化管包括口腔、咽、食道、胃、小肠（十二指肠、空肠、回肠）和大肠（盲肠、阑尾、结肠、直肠、肛管）等部。    

  消化腺有小消化腺和大消化腺两种。小消化腺散在于消化管各部的管壁内，大消化腺有三对唾液腺（腮腺、下颌下腺、舌下腺）、肝和胰。

消化系统的基本生理功能是摄取、转运、消化食物和吸收营养、排泄废物，提供机体所需的物质和能量。

干细胞可以分化出消化系统的各种功能细胞，如胃肠道、肝脏的各种功能细胞，新生的这些功能细胞可以替换掉坏死病变的细胞，恢复人体消化道及消化腺的正常生理结构和功能。

干细胞移植对预防和治疗各种胃病、肝病（如肝硬化、肝炎）等消化系统疾病有很好的疗效。

干细胞保护血液循环系统

血液循环系统是血液在体内流动的通道，由血液、血管和心脏组成。血液循环系统的功能是输送所有营养物质到每一个细胞中，再将细胞代谢的废物输入血液。    

人是由细胞组成的生命个体，其中构成血液循环系统的功能细胞有血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、心肌细胞、血液细胞等，这些细胞通过发挥各自的作用来保障整个血液循环系统的功能。

血液循环系统内的功能细胞很容易受到损伤，我们常常听说的高血压，就是由于血液循环系统的功能细胞出现了问题，从而导致血液循环系统出现问题产生的。易被高血压引发的冠心病、心肌梗塞等心脑血管疾

病可以说都是由于血液循环系统内的功能细胞受损导致的。

干细胞改善内分泌系统

内分泌系统由内分泌腺和分布于其他器官的内分泌细胞组成，人体生理活动的调节，除了受神经系统的调控，还受到内分泌系统器官分泌的激素调节。      

人体主要的内分泌腺器官有：垂体、松果体、甲状腺、甲状旁腺、胸腺、肾上腺、胰岛和性腺（睾丸、卵巢）等。

内分泌疾病的发生，是由于内分泌腺发生病变所致，内分泌系统出现问题，可以引发甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退症、肾上腺皮质功能减退症、肾上腺皮质功能亢进症、髓质疾病等各种疾病，女性易引起更年期综合征、卵巢早衰、多囊卵巢等，男性易引起性腺功能减退症等。

干细胞可以分化出人体内分泌系统的各种功能细胞，如甲状腺滤泡上皮细胞，肾上腺上皮细胞，肾上腺素细胞等，新生的这些功能细胞可以替换掉坏死病变的细胞，恢复人体甲状腺激素、肾上腺激素、垂体激素等正常分泌，恢复内分泌系统与神经系统、免疫系统相互调节，共同维持机体的正常状态。

因此，人们如果进行干细胞治疗，回输到人体内年轻、健康的干细胞就可以根据人体不同需要而分化出不同的功能细胞，替换衰老、病变的细胞，对于改善人体内分泌系统，预防、治疗内分泌系统疾病有着绝佳效果。

干细胞修复神经系统

神经系统由神经细胞组成，主要包括脑和嵴髓两大器官。神经细胞的功能是通过接受、整合、传导和输出信息实现信息交换，也就是说，神经细胞在人体中的作用，就是产生人类各种心理活动与控制自身行为。

简单来说，人的五感：听觉、视觉、嗅觉、味觉、触觉，都是由神经细胞发挥作用而得到的，人的喜怒哀乐，包括对情绪的把控，也是由神经细胞来完成的。

因此，当人的脑和嵴髓受到重大损伤，神经细胞遭到严重破坏，人们就会失去自由活动的能力，造成瘫痪、帕金森等，也会失去对情绪的把握能力，导致自闭症、老年痴呆等。

神经干细胞是干细胞族群中具有分化出神经细胞能力的一类，它可以分化出人体中所有神经细胞。

神经干细胞可以聚集在组织损伤部位，修复及补充损伤的神经细胞，还可以分泌许多营养因子，促进损伤细胞的修复。最后，神经干细胞还可以增强神经突触之间的联系，建立新的神经环路。

由此可见，神经干细胞是神经系统形成和发育的源泉，因神经细胞没有再生能力，所以传统的吃药等方法只可暂时性缓解神经系统出现问题后的症状，一旦停药，病症将会复发甚至更加严重。而常年服药不仅会让患者痛苦不堪，还会对身体造成极大损害，甚至引起其他疾病并发。

药物并不具备真正的细胞修复功能，甚至会刺激和破坏更多的细胞，因此，想要从根本上修复神经系统，预防神经系统疾病，干细胞是极为有效的方法。

如果你的亲人、朋友或客户正在遭遇这些疾病，用传统的药物或手术达不到良好的效果；如果你希望他们可以健康的有质量的有尊严的生活，可以通过多睦健康选择干细胞调理治疗，将给予他们新的生命。干细胞给爱的人健康与希望！

什么是外泌体

细胞外泌体-Fresh exosomes

抗衰界的里程碑-外泌体Exosomes

美国抗真老和再生医学学会主席Ronald Klatz恒士说，由于外泌体具有抗炎作用，外泌体引起炎症的可能性几乎是不可能的，与来自其他婴儿的间充质干细胞相比，外泌体的排斥几率也非常低

来自“好细胞”的外泌体携带许多间充质干细胞的再生蛋白，间充质干细胞用于治疗神经发生性疾病的大部分或全部结果归因于来自间充质干细胞的外泌体许多科学家现在认为，通过使用外泌体而不是间充质干细胞，促进再生过程，同时避免或至少减轻排斥和炎症相关问题的风险。

可以说干细胞外泌体是科学界的里程碑，更是细胞中的“爱马仕”

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