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骨髓间充质干细胞提取人(骨髓间充质干细胞的提取)

充质干细胞 2023年03月25日 11:24 im

请仔细阅读我们提供的内容,因为我们将努力帮助你理解骨髓间充质干细胞提取人和骨髓间充质干细胞的提取之间的关系。

求助人脐带间充质干细胞提取方法

方法:

无菌条件下截取流产胎儿双侧四肢骨,PBS冲洗髓腔,离心去脂肪及上清液,L-DMEM重悬细胞,沿管壁缓慢滴加至底部有等量1.073 g/mL Percoll分离液的离心管中,离心后吸取中间界面白膜层,加入含体积分数为10%的胎牛血清、青霉素钠、链霉素的L-DMEM完全培养基,接种后置于37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度孵箱内培养.48 h后换液,去除未贴壁细胞,以后每2d换液一次.待细胞达到80%~90%融合时,胰酶-EDTA消化传代.

主要观察指标:

倒置显微镜及Giemsa染色观察细胞形态;透射电镜观察细胞超微结构;流式细胞技术检测其表面标记物;碱性磷酸酶染色检测成骨分化能力;Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色检测成软骨分化能力.结果:原代及传代培养的胎儿骨髓间充质干细胞呈梭形外观,具有较强的增殖能力.胞体较小,细胞核/浆比例大,胞核呈圆形或椭圆形,胞浆少,染色质较疏松,表现出早期细胞的特点,传至第20代细胞超微结构仍无明显改变.细胞表面抗原CD29,CD44,CD105呈阳性表达,CD34,CD45呈阴性表达.骨髓间充质干细胞诱导分化后,碱性磷酸酶染色及Ⅱ型胶原均呈阳性.

结论:

利用密度梯度离心+贴壁筛选法可成功分离培养胎儿骨髓间充质干细胞,所获细胞能够向成骨细胞及软骨细胞分化,该方法为体外培养扩增胎儿骨髓间充质干细胞的简单、稳定、高效的手段.

为什么说间充质干细胞很有存储的价值?在哪儿存比较好?

1、干细胞哪里来?

干细胞来源于人体的很多部位,以间充质干细胞为例,它可以来源于骨髓、脐带、胎盘,也可以来源于脂肪。我们现在最熟悉的储存方式,就是储存新生儿脐带、胎盘中的间充质干细胞。

研究发现,新生儿出生后带来的脐带胎盘中有非常丰富的干细胞。譬如,来自脐带的干细胞占5%到10%,主要是间充质干细胞;而来自胎盘的干细胞占约90%,包含大量的造血干细胞和丰富的间充质干细胞。而且,使用和提取干细胞对新生儿和妈妈都没有任何伤害,并且在用于干预各类难治重病时,有非常好的效果和潜力,因此也被称为人体的备份器!

2、储存干细胞有什么用?

间充质干细胞是目前医学界采用率很高的疾病治疗的 “原材料”,在抗衰老、提高健康水平、免疫调节、组织器官修复、再生医学以及未来应对各类难治疾病方向都有很大应用潜力。

目前,全球已批准了10多个干细胞药物上市,大部分都是与间充质干细胞相关。此外,关于干细胞的临床研究涉及上百种疾病,譬如干细胞干预骨关节病、糖尿病、帕金森症、视网膜病变、心脑血管疾病等。

3、如何选择靠谱的储存机构?

由于胎盘、脐带中干细胞的存储环境关系到宝宝及家人一生的健康,在选择干细胞存储机构的时候,一定要选择有核心细胞技术专利、权威认证的、“产学研”一体化的机构进行存储。并且干细胞对于其赖以生存的环境也有特殊的高要求、高标准。比如,采集的干细胞样本必须存放在无菌、特制的保温容器内,在特定的温度、条件下运输,才能保证种子细胞的活性;制备时对实验室的环境和实验员的技术有严苛的要求。这些细节都关乎着干细胞储存的品质。

干细胞是从自己身上提取的吗?

理论上来讲,人体的任何组织都含有干细胞。为什么这么说呢?因为人体内所有组织中的细胞发生损伤或衰老,进而需要替换时,都会由组织中的干细胞分化出成熟的功能细胞,以替换损伤或衰老的细胞,修复人体组织。

可以说,人体就是由细胞构成的一个复杂社会,社会需要不断更新,维持生机和活力,干细胞就是细胞社会更新的源泉。科学家从多种组织提取成功提取了干细胞。

1、骨髓

骨髓中的造血干细胞发挥了治疗作用。需要注意的是,骨髓中包含两种类型的干细胞。一种是造血干细胞,用于白血病的治疗。

骨髓造血干细胞

一种是间充质干细胞,起初用于治疗造血干细胞移植后发生的移植物抗宿主病,后来发现间充质干细胞是多能干细胞,能够分化为肝脏、大脑、上皮、心肌等多系统的功能细胞,对冠心病、糖尿病、神经损伤、自身免疫性疾病等慢性病都有治疗作用。

2、外周血

3、脂肪

之前,人们很难想象,白白的脂肪中也含有干细胞。

欧洲市场首个获得集中上市 许可(MA)批准的异体脂肪干细胞产品

4、经血

大家可能想不到,“大姨妈”也能被废物利用,从中提取干细胞。经血中能提取的干细胞类型主要是间充质干细胞。

5胎盘和脐带血 脐带和胎盘统称为围产期组织。孩子出生时通常被丢弃的脐带和胎盘含有非常丰富的干细胞。

胎盘体积大,是十月怀胎期间胎儿发育的基地,含有更加丰富的干细胞。韩忠朝院士团队全球最早从胎盘中分离4中类型的干细胞: 亚全能干细胞、间充质干细胞、母亲干细胞、造血干细胞。这些类型的干细胞分别在抗衰老、慢性病、母亲产后疾病、白血病等具有广阔的应用前景。

最后,还有一种干细胞类型,胚胎干细胞,由于是通过非正常的流产途径获取,而且各国都禁止直接用于临床治疗,在此不再介绍。

从骨髓、外周血和脂肪中提取干细胞,均必须进行有创性操作,需要从身体中抽吸骨髓、外周血和脂肪,可能会对人体造成伤害,而且数量有限。从经血和尿液中提取干细胞,数量更加有限,而且很容易发生细菌污染。

从脐带和胎盘,尤其是胎盘,提取干细胞,不仅数量巨大,而且活性高、易于标准化制备、不易发生污染,是目前最理想的干细胞来源。

骨髓间充质干细胞如何取材

自然来源于骨髓,须充成体骨髓中提取间充质干细胞;一般不提倡从骨髓中提取间充质干细胞。

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