视网膜干细胞移植的过程（干细胞移植治疗视网膜）

本单元的目的是通过讨论视网膜干细胞移植的过程的知识和干细胞移植治疗视网膜的相应知识来帮助学习者。

间充质干细胞移植都有哪些方式

间充质干细胞移植，指的是将间充质干细胞从自身采集，然后进行培养、纯化，再回输进患者体内用以治疗硬皮病、皮肌炎、红斑狼疮、类风湿、运动神经元病等免疫性疾病的一种最前沿的治疗方法。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为肾、脂肪、骨、软骨、肌肉、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于病变引起的组织器官损伤修复。

诺莱医学临床提示间充质干细胞的移植分为以下四个部分

第一步：对患者的整体状况进行评估，如果没有禁忌症如：感染、肾危象、心包大量积液等的情况下，进行细胞动员4－5天。

第二步：MSCs的采集（骨髓、脐带、脂肪和羊膜）

第三步：MSCs的分离、培养及扩增,大约20天左右

第四步：MSCs的移植:

1.静脉注射

2013年5月-2014 年4月，朱宁等人在诊治18例系统性红斑狼疮患者时，用分离培养后的间充质干细胞采用干细胞移植技术进行治疗。该干细胞移植治疗就是采用静脉输注的方式，移植方法如下：患者取仰卧位，首先取肘前部较粗血管，利用生理盐水建立静脉通道，然后将已复温好的装有间充质干细胞的干细胞袋接入静脉通道内，覆盖无菌纱布于穿刺部位，并注意控制滴速，一般干细胞悬液 30 ml于 2 小时内滴完，最后滴入生理盐水100 ml 以冲洗管道。为入选患者均完成1个疗程的治疗。结果证明应间充质移植治疗系统性红斑狼疮疗效肯定，且较为安全。

2.动脉注射

干细胞移植治疗糖尿病，是糖尿病治疗新疗法中的热门疗法，隆敏等人曾经用间充质干细胞移植方法治疗一位39岁的Ⅰ型糖尿病女性患者。移植过程为：患者进入手术室，寻找到供应胰腺的胰背动脉后，将间充质干细胞缓慢均匀注射入胰背动脉。结果该患者术后3个月内胰岛素剂量大幅度减少了58.54％，有望完全停用胰岛素。

3.多点混合移植

干细胞移植治疗糖尿病足的疗效被广泛认可，在众多临床案例中，部分研究采用混合移植的方式以求使干细胞在体内发挥的功效更加全面化。虞朝黎等人用间充质干细胞移植治疗17例缺血性糖尿病足患者，移植方法就是采用多点混合注射的方法，具体过程为：抽取间充质干细胞后分离，配成细胞混悬液；在手术室硬膜外麻醉后，无菌条件下，将干细胞悬液按3×75px间距进行肌肉注射，病变严重的按1×25px间距注射；肌肉注射的同时进行股动脉穿刺，放置导管，将部分干细胞悬液注入股动脉。

4.病灶部位注射

2007年至2011年王玉龙等人采用间充质干细胞移植治疗胫骨骨折骨不连患者11例，结果患者经间充质干细胞移植治疗胫骨骨折骨不连，在4-27个月，平均13个月中，X线片显示骨折愈合良好，疗效满意，有临床应用价值。移植方法为：在手术室X 线透视定位下，用14号骨穿针准确刺入胫骨骨不连部位,完全注入间充质干细胞悬浮液。此外，在应用间充质干细胞治疗小儿脑瘫的研究中，很多研究者也会选择患儿脑内移植、腰椎穿刺等与疾病相关的功能组织位点进行移植。

诺莱医学温馨提示：

①MSC在组织中的含量（细胞丰度）：脐带的含量毫无疑问为最高，羊膜和脂肪次之；而脐带血中含量极少，导致检测不到之事常用发生；

②MSC增殖能力：优于MSC具有年龄特性，脐带和羊膜来源的MSC具有明显的优势，脂肪和骨髓次之；

③免疫调节能力：脐带、羊膜和脂肪来源的MSC优于骨髓MSC，而胎盘MSC的免疫调节能力最差；

④分泌细胞因子谱：脐带MSC分泌细胞生长因子的总量明显高于骨髓MSC，但是不同来源的分泌细胞因子谱有明显的特点；

⑤由于具有来源获取方便和高增殖能力等特性，能培养获得大量的MSC细胞数足够满足临床治疗需要，使得脐带、羊膜和脂肪最适合作为MSC细胞治疗的组织来源。但是我们也必须认识到，不同的实验室、不同的分离方法及不同的培养体系，均可导致MSC的实验研究结果出现不一致性，如下图所示；即使是相同的来源，不同个体之间的间充质干细胞也出现功能上的异质性。

因此，我们必须对目前的研究结果和结论保持一定的谨慎态度，不排除将来的某天培养技术的突破，可以抵消组织来源的差异所导致的MSC功能的差异。

世界首次！用皮肤细胞恢复视力

日本科学家近日首次成功将人类皮肤干细胞移植到眼部。这些从皮肤上获取的干细胞如果用于眼部，将能帮助病人修复部分丢失的视力。

一名70岁的女病患被确诊患有老年性黄斑变性，这是导致老年性视力障碍的主要原因之一。该病患于2014年接受了实验性治疗，现在，两年时间已经过去，实验性治疗刚刚结束，科学家将分享实验结果。

研究人员从病人的手臂上取了一块直径4毫米的皮肤，修复了皮肤细胞，并成功将皮肤细胞重组成诱导多能干细胞。

多能干细胞能够分化并进入几乎所有的身体组织，这就是从手臂取出的皮肤能够转化成视网膜组织的原因。

在诱导皮肤细胞发育成视网膜色素上皮细胞后，科学家将在实验室里把这些细胞培养成超薄细胞膜片，接着，这种细胞薄片就会移植到病人的视网膜后部。

就职于日本神户的理化研究所的项目负责人高桥政代说：“我很高兴这项移植手术没有导致并发症。然而，这却是诱导多能干细胞在再生医疗领域的首次应用。我决心继续努力进取，希望有朝一日这个疗法能够造福更多病人。”

虽然这项实验仍然处于早期，但迹象表明，目前，这项实验是颇具前景的。

两年来，实验小组一再推迟向公众报告实验结果的时间，同时一直在监测病人的进步以及被修复的细胞能维持多久。最近，实验结果的报告终于出炉：移植细胞在没有任何不良反应的情况下存活了一年多，并小幅提高了病人的视力。

实验团队发表声明称：“移植的视网膜色素上皮细胞膜片在没有任何数据、免疫排斥及不良繁殖的情况下存活了一年半，这表明我们初步实验的目的已经达成。”

“我很高兴我接受了这个治疗，我觉得我的视线变得更加明亮和宽广了。”参加实验的病人去年在接受《日本时报》采访时说。

虽然，该治疗不能完全重建病人的视力，但这却是诱导多能干细胞应用领域中颇具重要意义的一步。科学家认为，除了解决视力问题，诱导多能干细胞也能治疗帕金森症及阿尔兹海默症等多种疾病。

大量其他研究也表明干细胞治疗对视力有积极影响，能够帮助病人重建视力。今年早些时候，中美两国的研究员通过操纵干细胞的蛋白质水平，成功提高了白内障患儿的视力。

最让人惊喜的是，一个来自美国巴尔的摩的女士虽然已经陷入黑暗长达5年之久，却也通过将自体骨髓干细胞注入眼部而重建了视力。目前，在个案治疗方面，这个领域仍然疑问重重，但毫无疑问，干细胞研究是非常令人激动的研究领域。

蝌蚪君编译自sciencealert，译者 晴空飞燕，转载须授权

视网膜捐献过程是什么

视网膜，捐了也不能用。

一般流程是:生前捐献书上签字，盖章后给个捐献证书。死后通知捐献单位，才能算捐献成功。

捐献的是整个眼球，角膜不能立即取下来，这样不好保存，容易污染。角膜移植前才取角膜。

视网膜是无法移植的。

视网膜色素变性治疗 方法 国内外大概多少年后会研究出来 一下子能好的 愁死啦

楼主您好：

我是一名专门针对RP治疗的医生，所以非常理解你的心情，目前国内外主要进行RP的研究有干细胞移植，视网膜移植、基因治疗等方面的研究，虽然有好转的报道，但是真正进入临床，还是需要一个过程，也可能是10年，也可能更长，但是我还是建议你能面对现实，保持积极乐观的心态来面对，因为心情也是影响病情发展的一个因素，可以采用目前能用方式，比如说中医的保守治疗，还有药物的离子导入等，

干细胞移植过程是怎样的？

首先让骨髓中的造血干细胞大量释放到血液中去，这个过程称为“动员”。然后，通过血细胞分离机分离获得大量造血干细胞用于移植，这种方法称为“外周血造血干细胞移植”。这样现在捐赠骨髓已不再抽取骨髓，而只是“献血”了。而且，由于技术的进步，现在运用造血干细胞“动员”技术，只需采集分离约50至200毫升外周血即可得到足够数量的造血干细胞。采集足够数量的造血干细胞后，血液可回输到捐献者体内。

通过干细胞移植过程可以治疗多种疾病，而且效果明显。造血干细胞移植可以治疗多种血液病、实体瘤、免疫缺陷病和重度急性放射病，这已被很多人所熟悉。据介绍，造血干细胞移植目前广泛应用于恶性血液病、非恶性难治性血液病、遗传性疾病和某些实体瘤治疗，并获得了较好的疗效。1990年后这种治疗手段迅速发展，全世界1997年移植例数达到4.7万例以上，自1995年开始，自体造血干细胞移植例数超过异基因造血干细胞移植，占总数的60%以上。同时移植种类逐渐增多，提高了临床疗效！

干细胞的移植不会对于贡献者造成什么身体的影响！干细胞移植成为现代医学中间不可或缺的技术手段！

视网膜变性该怎样治疗

视网膜色素变性治疗概述

北京米赫眼科医院（中俄项目合作）视网膜色素变性治疗方式

脉络膜血管重建治疗视网膜色素变性

米赫采用的手术治疗方式早已被国内专家所关注，早在八十年代初就已经在国内应用，主要是北京友谊医院对患者进行治疗，在以下的文献中我们可以看到相关的文章

【文章摘要】

目的 通过促进脉络膜血管重建，改善或维持RP患者视功能。并从临床和组织病理学二方面对其效果进行评估。 方法 对RP患者57眼采用脱细胞羊膜和淋巴细胞生长因子行脉络膜上腔植入（简称脉络膜血管重建术）。术后分别于一月、半年、一年对其视力、视野等变化进行分析。并同时在8只兔2只狗右眼行脉络膜血管重建，术后分别于一月、半年、一年对其手术区域组织病理学改变进行分析。 结果 具备齐同条件42眼进行方差分析，术前平均视力x=0.2974,术后一个月与术前比较P0.05 差异无显著性。术后一年与术前比较，P0.05差异有显著性。术后一年与术后一月比较， P0.05差异有显著性。将术后一年以上43眼复查资料齐全者的视野改变由等级资料转化为计量资料， P0.001差异有显著性。实验组结果显示术后一个月，植入物周边有血管长入，纤维束间可见小血管切面。局部脉络膜较对照组增厚，血管稍见丰富或较扩张，术后一年血管增多，管腔内可见红血细胞。 结论 脉络膜血管重建术是一种安全可行的，在目前能够实现的治疗RP有效方法之一。早期患者可以得到视力提高和视野的改善。因此，提倡早期治疗。

视网膜色素变性[retinitis pigmentosa RP ]是由视网膜光感受细胞和色素上皮细胞变性，导致夜盲和进行性视野缺损的最常见的遗传性眼病[1-2]。 患者由周边视力丧失直至累及中心视力而失明。目前仍无有效治疗方法。米赫自02年开展用脱细胞羊膜联合淋巴细胞刺激因子脉络膜上腔植入，促进脉络膜血管重建治疗RP的临床和实验研究，现将结果报告如下：

资料方法

一、对象

02年9月-03年6月确诊为RP的患者50例，89眼。

男35例，65眼,女15例，24眼。

年龄10-61岁，平均34.5岁。

二、植入材料

(1)采用脉络膜移植，膜组织乳黄色，半透明，厚约0.6-0.7mm，头端呈半椭圆形，体为横置长方形的形状。

(2)光镜下观察：膜细胞为一种无细胞成份的胶元蛋白类纵横交织的纤维状结构，其成份为致密纤维组织，纤维直径和巩膜胶元纤维相比较细一些。

(3)电镜下观察：膜组织胶元纤维束纵横交错排列，电子密度中等，原纤维周期性横纹不太明显。

三、手术方法

术前检查及准备：术前常规行视力，矫正视力、眼压、裂隙灯、视野、电生理、FFA检查。手术前口服醋氮酰胺250mg，静脉点滴20%甘露醇250毫升。

术眼常规行球后及眼轮匝肌麻醉，颞下方距角膜缘6--7mm剪开球结膜，外直肌、下直肌置牵引线向眶上缘固定，两直肌连线向后2--3mm做一个尖端朝向视神经的板层巩膜瓣，基底宽约5--6mm，长6--8mm，表面带有部分Tnon's囊和巩膜浅层血管。在其瓣下沿基底切开巩膜至脉络膜上腔，将巩膜瓣平铺于脉络膜上腔，取已经过生理盐水冲洗的羊膜，将其前端及大部分端展平于脉络膜上腔中的巩膜瓣上，层间放置淋巴细胞刺激因子，膜尾部在切口处折叠缝合固定，缝合球结膜，将50mg淋巴细胞刺激因子用生理盐水溶为1--2ml液体注入半球后。

四、术后处理及随访

术后眼包扎，术后常规抗生素及糖皮质激素治疗3--5d，局部抗生素地塞米松混合液点眼1--2周，术后一周内每日观察裂隙灯、眼底。术后一周、一月、半年、一年进行随访检查。术后一年内查视力，矫正视力，眼压，裂隙灯，眼底。一年以上包括视野，电生理，荧光造影

【结 果】

术眼在一周内出现球结膜充血，肿胀，5例玻璃体内有灰白色尘状浮游细胞，经治疗一月内好转。眼底检查未发现异常。

57眼术前视力在光感－1.0，其中光感－0.1，27眼；0.1－0.3，13眼；0.3以上17眼。12眼视力在光感－面前手动，不足0.01，术前与术后比较无变化，故统计处理时将此类12眼归为另一组讨论。另有3眼，1眼术后出现白内障对视力有显著影响，2眼在脉络膜血管重建术后，又行白内障手术，术后视力有显著提高，齐同条件已破坏，已无可比性，故剔除。进入方差分析的观察对象42眼。治疗前平均视力：x=0.2974 s=0.2812术后一个月与术前比较，x=0.2869 s=0.2473，p 0.05差异无显著性。术后一年与术前比较，x=0.35 s=0.3049 p0.05，差异有显著性。治疗后近期视力（一月）与远期视力（一年）比较，p0.05，差异有显著性。（以上采取配伍组，两因素方差分析，美国SPSS公司研制SPSS/PC+ Version 10.0统计软件）。

手术眼中术前视野5°者28眼，5－15°者21眼，15--30°者7眼，30°者1眼。术后一年以上复查资料齐全者43眼。5°者23眼，5--15°者15眼，15--30°者4眼，30°者1眼。因视野范围是一类粗略的等级资料，为便于统计处理，我们在测定中采取评分的方法记录数据，即将0－5°视野记为0，5－10°视野记为1，依此类推，每5°增加1分，由此将等级资料转化为计量资料，以便进行配对资料的t检验。治疗后与治疗前视野范围比较d=0.9767 Sd=0.6721 Sd＝0.1025配对资料t检验，t=9.5286 p0.001差异有显著性。（SPSS／PC+ Version 10.0统计软件）

荧光造影检查，所有患者手术前均呈现不同程度背景荧光不规则散在或弥漫增强，周边网膜可见大片高荧光，其间见骨细胞样荧光遮蔽。并可见暴露的脉络膜大血管。造影早期可以见到斑块状的脉络膜毛细血管无灌注区域或延缓灌注，晚期合并黄斑区损害。

ERG及VEP检查，全部患眼ERG显示异常，表现为a、b波降低或呈熄灭型平波。P-VEP 30眼（53%），表现为P波波幅值降低，峰潜时延长。

术后全部患者荧光造影及电生理仍显示异常，术前与术后比较无显著意义。

我们在临床研究的基础上同时在8只实验兔、2只实验狗右眼以同样的材料和方法施行手术，左眼为对照眼。分别于术后一月、三月、半年、一年摘除术眼和对照眼，取右眼手术区域巩膜至视网膜全层及对照眼相同部位的组织做光、电镜对比观察。实验结果显示，光镜下：植入羊膜位于脉络膜外侧，夹于巩膜之间，三者均紧密接触。羊膜呈弱嗜酸性，染为粉红色，较巩膜组织色浅，其成份为致密纤维组织，纤维直径和巩膜胶元纤维相比较细一些，羊膜周边有血管生长，膜内见小血管切面（图三、图四）。与膜组织相贴的局部脉络膜较对照组稍增厚，血管稍见丰富或较扩张。电镜下：膜组织胶元纤维束纵横交错排列，纤维束间夹杂成纤维细胞和大量血管。成纤维细胞，细胞核清晰，有的胞核周围核间隙较宽，核孔明显，说明细胞代谢较旺盛，胞质内有线粒体，内质网，并见不规则空泡。血管内皮细胞核清晰，其细胞质厚薄不一。基膜较厚者多近动脉端或属小动脉，一层内皮细胞为小静脉或毛细血管。

【参考文献】

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