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人羊膜上皮干细胞注射液(羊膜干细胞从哪里提取)

干细胞注射 2023年03月13日 08:20 im

在这篇文章中,我们还将讨论人羊膜上皮干细胞注射液和羊膜干细胞从哪里提取的技术实现,以帮助你解决实际问题。

啥是人体胚胎注射液?

向人体胚胎注射的液体

给你看一些资料:

一、人体胚胎学绪论

人体胚胎学是研究人体出生前发生、发育过程及其规律的一门科学。包括生殖细胞的发生、受精、整个胚胎发育过程、胚胎与母体的关系、先天性畸形的成因等。从受精卵形成到胎儿娩出约38周,分胚期和胎期两个阶段。

在公元前4世纪,古希腊医学家希波克拉底就曾对生殖过程有过认真的观察和正确的描述,标志着人类对生殖的认识开始从迷信和臆测转向实际的观察。先后经历了“先成论”“渐成论”“进化论”等理论,同时相应的一些胚胎学的主要分支学科出现如:描述胚胎学、比较胚胎学、实验胚胎学、化学胚胎学、分子胚胎学、畸形学和生殖工程学等。

胚胎学属形态学范畴,因而在学习时应特别注意观察,包括对胚胎标本、模型、切片、图谱的观察,更要做到结合教材上的描述启动形象思维进行观察。

二、人胚发生和早期发育

(一)生殖细胞和受精

生殖细胞包括精子和卵子,均为单倍体细胞。精子在睾丸内发生,在附睾内获得运动能力,在女性生殖管道中运行的过程中获能;自卵巢排出的次级卵母细胞处于第二次成熟分裂的中期,与精子结合时成熟,形成卵细胞。

发育正常的并且获能的精子与发育正常的卵子在限定的时间内相遇,结合成为受精卵的过程,称为受精。受精常见于输卵管的壶腹部。

受精过程分为三期:①大量获能精子溶蚀放射冠;②精子与ZP3(精子受体)结合,在透明带中形成一条孔道;③精子的细胞膜与卵子细胞膜融合,随即精子的细胞核进入卵浆内,两性原核相互融合,形成二倍体受精卵。

受精的意义:①受精启动了细胞分裂;②精子与卵子的结合,恢复了二倍体核型;③受精决定遗传性别;④受精卵的染色体来自父母双方,生殖细胞成熟分裂时其中的遗传物质重新组合,使新个体具有不同于亲代的变异性。

(二)胚泡形成与植入

1.卵裂和胚泡形成 受精卵早期的细胞分裂称为卵裂,卵裂后的子细胞称卵裂球。受精第3天,卵裂球的数目达12个~16个,形成桑椹胚,当卵裂球的数目增至100个左右时,细胞间出现一个大腔,腔内充满液体,整个胚形似囊泡,故称胚泡。胚泡由胚泡腔、滋养层和内细胞群组成。

2.植入和子宫内膜的变化

(1)植入过程:受精后第5天~6天,包绕胚泡的透明带溶解消失,滋养层与子宫内膜接触,并分泌蛋白酶分解消化与其粘附的子宫内膜。胚泡沿着被消化组织的缺口逐渐侵入内膜功能层。胚泡全部植入子宫内膜后,缺口处上皮修复,植入于第11天~12天完成。

(2)植入部位:常见的植入部位是子宫体和底部。

(3)植入条件:母体激素分泌正常;子宫内环境必须正常;胚泡准时进入子宫腔,透明带及时溶解消失;子宫内膜发育阶段与胚泡发育同步。

(4)植入后子宫内膜的变化:植入后的子宫内膜改称蜕膜,蜕膜中的基质细胞改称蜕膜细胞。根据蜕膜与胚泡的位置关系,将蜕膜分为基蜕膜、包蜕膜和壁蜕膜。

(三)胚层的形成和分化

1.二胚层胚盘的形成 受精后第7天,内细胞群分化上胚层和下胚层。受精后第8天,形成羊膜腔,腔内有羊水,上胚层构成羊膜腔的底。受精后第9天,下胚层周缘的细胞增生并逐渐覆盖了细胞滋养层的内表面,形成卵黄囊,下胚层构成卵黄囊的顶。

2.三胚层胚盘的形成 第3周初,上胚层细胞增生,在胚盘尾端形成一条纵行的原条。原条的头端膨大形成原结,原结的中央凹陷为原凹,在原条背面中线也出现一纵行原沟。上胚层细胞增殖并通过原条在上、下胚层之间向周边迁移。其中一部分细胞在上、下两胚层之间形成中胚层;另一部分细胞进入下胚层并逐渐置换了下胚层细胞,形成内胚层。在内胚层和中胚层出现之后,上胚层便改称外胚层,至此三胚层胚盘形成。

原结细胞在内、外胚层间向胚盘头端迁移形成脊索。原条和脊索构成胚盘中轴,并在诱导神经管与椎体的发生中有重要作用。最后脊索退化为椎间盘中的髓核。在胚盘头、尾端各有一无中胚层区域,分别形成口咽膜和泄殖腔膜。

3.三胚层的分化

(1)内胚层的分化:原肠分为前肠、中肠和后肠。第3周末,口咽膜破裂,前肠开口于羊膜腔,第8周末,肛膜破裂后肠也开口于羊膜腔。前肠分化为呼吸系统、咽、食管、胃、十二指肠上2/3部分、中耳、甲状腺、甲状旁腺、胸腺、及肝、胆和胰等消化腺的上皮;中肠分化为十二指肠下1/3部分至横结肠右2/3部分的上皮;后肠分化为横结肠左1/3部分至肛管上段的上皮。

(2)外胚层的分化:在脊索的诱导下,外胚层增厚,形成神经板,逐渐形成了神经管。神经管是中枢神经系统的原基,分化为脑和脊髓。在神经沟闭合为神经管时,神经板外侧缘的神经上皮细胞形成左右两条神经嵴,是周围神经系统的原基,分化为脑神经节、脊神经节、植物神经节和外周神经等。表面外胚层将分化为皮肤的表皮及其附属结构、牙釉质、角膜和腺垂体等结构。

(3)中胚层的分化:中胚层由中轴线向两侧分为轴旁中胚层、间介中胚层和侧中胚层三部分。轴旁中胚层呈节段性增生,形成体节。体节将分化为皮肤真皮、骨骼肌和中轴骨骼。间介中胚层分化为泌尿系统和生殖系统的大部分器官和结构。侧中胚层分为体壁中胚层和脏壁中胚层,前者分化为体壁的肌肉、结缔组织及腹膜、胸膜、心包膜的壁层;后者分化为消化管壁上的肌肉、结缔组织和腹膜、胸膜、心包膜的脏层。胚内体腔分化为心包腔、胸膜腔及腹膜腔。

4.胚体的形成 由于胚体各部生长速度不同,胚盘边缘向腹侧卷折,出现头褶、尾褶及左右侧褶,使扁平形胚盘逐渐变为圆柱形的胚体。最终胚体突入羊膜腔,浸泡在羊水中,体蒂和卵黄囊在胚体腹侧合并,外包羊膜,形成脐带;口咽膜和泄殖腔膜分别转到胚体头、尾两端的腹侧;外胚层包于胚体外表面,内胚层卷折到胚体内,形成头、尾方向的原始消化管,其头端由口咽膜封闭,尾端以泄殖腔膜与外界相隔,中段通过卵黄蒂与卵黄囊相连。

(四)胎膜与胎盘

1.胎膜 包括绒毛膜、羊膜、卵黄囊、尿囊和脐带。

(1)绒毛膜:由滋养层和胚外中胚层的壁层构成。胚泡植入子宫内膜后,在胚泡表面形成许多绒毛样的突起,以细胞滋养层为中轴,外裹合体滋养层,称初级干绒毛。胚外中胚层长入初级干绒毛的中轴,使初级干绒毛变成了次级干绒毛。当绒毛膜的胚外中胚层内形成血管网和结缔组织,并与胚体内的血管相通时,次级干绒毛改称三级干绒毛。三级干绒毛末端的细胞滋养层细胞形成细胞滋养层壳。随着胚胎发育,丛密绒毛膜与基蜕膜共同构成了胎盘,而平滑绒毛膜则和包蜕膜一起逐渐与壁蜕膜融合。

(2)羊膜:为半透明薄膜,由单层羊膜上皮和薄层胚外中胚层构成。羊膜腔内充满羊水,羊水含有脱落的上皮细胞和一些胎儿的代谢产物。随着胚盘向腹侧包卷,胚体逐渐陷入了羊膜腔。羊水具有保护胎儿免受外界冲击和损害、防止与周围组织粘连的功能。

(3)卵黄囊:人胚卵黄囊的出现是生物进化过程的重演。但是原始的造干血细胞和生殖细胞分别来源于卵黄囊壁上的胚外中胚层和尾侧壁上的内胚层细胞。

(4)尿囊:是从卵黄囊尾侧向体蒂内伸出的一个盲管。尿囊壁上的一对尿囊动脉和一对尿囊静脉,演化成脐动脉和脐静脉,尿囊根部参与膀胱形成,其余的部分仅存数周便退化。尿囊先退化为一条脐尿管,后闭锁为脐中韧带。

(5)脐带:是胎儿与胎盘间物质运输的通道,由羊膜将2条脐动脉、1条脐静脉、体蒂、尿囊及卵黄蒂等结构包绕而成。

2.胎盘

(1)胎盘的结构:由胎儿的丛密绒毛膜和母体的基蜕膜共同构成。

(2)胎盘的血液循环:胎盘内有母体和胎儿两套血液循环。

(3)胎盘屏障:指的是胎儿血与母体血在胎盘内进行物质交换所通过的结构。早期胎盘屏障由合体滋养层、细胞滋养层和基膜、薄层结缔组织和毛细血管基膜及内皮组成。随着胎儿的发育长大,由于细胞滋养层在许多部位消失以及合体滋养层在一些部位仅为一薄层胞质,胎盘屏障变得越来越薄,胎血与母血间仅隔以绒毛的毛细血管内皮和薄层合体滋养层及两者的基膜,更有利于胎血与母血间的物质交换。

(4)胎盘的功能:胎盘具有物质交换、防御屏障和分泌雌激素、孕激素、绒毛膜促性腺激素、胎盘催乳素等内分泌等重要生理功能。

(五)双胎、联胎

1.双胎又称孪生,发生率约1%。

(1)双卵双胎来自于两个受精卵,每个胎儿各具独立的胎盘、绒毛膜囊和羊膜囊。两个胎儿的性别可相同也可不同,其相貌、血型及组织抗原性均同一般的兄弟姐妹。

(2)单卵双胎来自一个受精卵者。两个胎儿遗传构成完全相同,性别相同,相貌相同,血型及组织抗原性均相同。由于两个体分离的时间早晚不同,因此两个胎儿与胎膜及胎盘的关系也不同。

2.联胎 是指两个未完全分离的单卵双胎。分为对称性联胎和不对称性联胎。

先天性畸形

先天性畸形是由于胚胎发育紊乱而出现的形态结构异常。研究先天性畸形的科学称畸形学,是胚胎学的一个重要分支。

(一)先天性畸形的发生原因

(1)遗传因素占25%。

(2)环境因素占10%,能引起出生缺陷的环境因素,统称致畸因子。致畸因子主要有生物性、物理性、药物、化学物质和其它致畸因子五大类。

(3)二者共同作用引起和原因不明者占65%。

(二)致畸敏感期

胚胎发育是连续的过程,处于不同发育阶段的胚胎对致畸因子作用的敏感程度不同。受到致畸因子作用后,最易发生畸形的发育阶段称致畸敏感期。

(三)先天性畸形的预防

采用遗传学方法预防遗传性畸形是畸形预防中的一个重要方面。做好孕期保健是防止环境致畸的根本措施。

(四)先天性畸形的宫内诊断和宫内治疗

1.先天性畸形的宫内诊断 目前宫内诊断的主要方法有:羊膜囊穿刺、绒毛膜检查、、B型超声波检查、羊水和胎儿造影及X线检查等

2.先天性畸形的宫内治疗 近年宫内诊断的研究进展很快,已经能对多种畸形做出准确的宫内诊断,但能进行宫内治疗的畸形还很有限。

1.精子在女性生殖管道中运行过程中,包裹在精子头部的糖蛋白被女性生殖管道中的酶类降解,获得受精能力,此过程称获能。

2.当精子接触到卵细胞周围的放射冠和透明带时,其顶体释放顶体酶溶蚀放射冠和透明带,此过程称顶体反应。

3.精子核及胞质进入卵细胞的胞质,精子的细胞膜则与卵膜融合,此时,卵膜下方外层胞质中的皮质颗粒释放其内容物进入卵周隙,引起透明带中ZP3糖蛋白分子的变化,使透明带失去了接受精子穿越的功能,这一过程称透明带反应。

4.桑椹胚的细胞继续分裂增殖。当卵裂球的数目增至100个左右时,细胞间出现若干小的间隙,小间隙逐渐融合成一个大腔,腔内充满液体,整个胚形似囊泡,故称胚泡。

5.第3周初,上胚层细胞增生,在胚盘尾端形成一条纵行的细胞索,称原条,最终原条退化消失。

6.先天性畸形是由于胚胎发育紊乱而出现的形态结构异常。研究先天性畸形的科学称畸形学,是胚胎学的一个重要分支。

1.(1)受精部位:常见于输卵管的壶腹部。

(2)受精过程分为三期:①大量获能精子溶蚀放射冠;②精子与ZP3(精子受体)结合,在透明带中形成一条孔道;③精子的细胞膜与卵子细胞膜融合,随即精子的细胞核进入卵浆内,两性原核相互融合,形成二倍体受精卵。

(3)受精条件:发育正常的并且获能的精子与发育正常的卵子在限定的时间内相遇。

(4)受精的意义:①受精启动了细胞分裂;②精子与卵子的结合,恢复了二倍体核型;③受精决定遗传性别;④受精卵的染色体来自父母双方,生殖细胞成熟分裂时其中的遗传物质重新组合,使新个体具有不同于亲代的变异性。

2.胚泡逐渐埋入子宫内膜的过程称植入。

(1)植入的时间:始于受精后第5天~6天,完成于第11天~12天。

(2)植入部位:常见于子宫体和底部。

(3)植入过程:受精后第5天,包绕胚泡的透明带溶解消失,极端滋养层与子宫内膜接触,并分泌蛋白酶分解消化与其粘附的子宫内膜。胚泡沿着被消化组织的缺口逐渐侵入内膜功能层。胚泡全部植入子宫内膜后,缺口处上皮修复,植入完成。

(4)植入条件:母体激素分泌正常;子宫内环境必须正常;胚泡准时进入子宫腔;透明带及时溶解消失;子宫内膜发育阶段与胚泡发育同步。

3.在第2周胚泡植入过程中,内细胞群的细胞增殖分化,逐渐形成一个圆盘状的胚盘,此时的胚盘由上、下两个胚层。上胚层为邻近滋养层的一层柱状细胞,下胚层是位居胚泡腔侧的一层立方细胞,两层紧贴在一起。继之,在上胚层的近滋养层侧出现一个腔,为羊膜腔,腔壁为羊膜。羊膜与上胚层的周缘连续,上胚层构成羊膜腔的底。下胚层的周缘向下延伸形成另一个囊,即卵黄囊,内胚层构成卵黄囊的顶。滋养层、羊膜腔和卵黄囊对胚盘起营养和保护作用。

4.第3周初,上胚层细胞增生,在胚盘尾端形成一条纵行的原条。原条的头端膨大形成原结,原结的中央凹陷为原凹,在原条背面中线也出现一纵行原沟。上胚层细胞增殖并通过原条在上、下胚层之间向周边迁移。其中一部分细胞在上、下两胚层之间形成中胚层;另一部分细胞进入下胚层并逐渐置换了下胚层细胞,形成内胚层。在内胚层和中胚层出现之后,上胚层便改称外胚层,至此三胚层胚盘形成。

5.胎盘是由胎儿的丛密绒毛膜与母体的基蜕膜共同构成,呈圆盘状。胎儿面光滑覆盖羊膜,下方为绒毛膜结缔组织,脐血管分支行于其中,绒毛膜发出40~60根干绒毛,其分支出许多绒毛;母体面粗糙,为基蜕膜,细胞滋养层壳覆盖,并有干绒毛末端固着,绒毛间隙充满母血;胎血与母血之间互不相混,进行物质交换时,必须通过合体滋养层、细胞滋养层、基膜、薄层结缔组织及毛细血管内皮和基膜构成的胎盘屏障。功能:①物质交换:胎儿从母血获得营养和O2,排出代谢产物和CO2;②防御功能;③内分泌功能:第2周开始分泌人绒毛膜促性腺激素,第2个月开始分泌人胎盘催乳素,第4个月开始分泌孕激素、雌激素。

再生医学(34):只知脐带血就落伍啦!羊水干细胞存取更容易

不少爸妈在宝宝出生时,会帮宝宝把干细胞储存在脐带血银行中,未来宝宝如果罹患疾病,或是有退化问题,就可以取出干细胞做应用。根据统计,大约有1/10的新生儿父母会储存干细胞。

不过,相较于脐带血,近10年来,一项新的干细胞取得方式正逐渐兴起。早在2007年,美国的一个团队就宣布,他们从孕妇羊水中发现充裕的干细胞来源,治疗的效用可以媲美极具道德争议的胚胎干细胞,也就是说如果技术成熟,羊水干细胞的发挥空间将比脐带血还要广泛。

羊膜穿刺时 顺便就能保存干细胞

羊水干细胞的取得方式相当简单,现在有许多高龄产妇,或是有潜在遗传性疾病的孕妇,在怀孕期间会先做羊膜穿刺,确认宝宝是否携带疾病。孕妇接受羊膜穿刺检查时,医师即可以多抽取一些羊水储存,以备所需时使用,可以说是最方便且没有争议的干细胞储存方式。教廷在当时就针对这个科研突破,赞誉这项发现是「道德上可接受的一大突破」。

长庚大学教授郑博仁就表示过,羊膜穿刺后取得的羊水,除了可以进行染色体异常筛检,还可以进行基因分析,如海洋性贫血、地中海型贫血、脊髓细胞萎缩症等家族病史的孕妇,万一胎儿异常,以往就被拿掉;但等技术成熟后,未来可以多一个选择,就是利用羊水干细胞进行基因治疗。

台湾羊水干细胞技术领先全球

就羊水干细胞领域,台湾的研究可以说是跑在很前面的了。台湾的羊水干细胞专家、成大医院心脏内科医师刘严文,在2007年便利用羊水干细胞分化出血管内皮细胞,注入后肢动脉被截断的老鼠体内,让原本会因缺血造成肌肉萎缩、发黑,肌肉坏死等情形,最后仅肌肉略微萎缩。

2018年,刘严文接续过去的研究,发现从母体羊水中找出的干细胞,移植到心肌梗塞的猕猴身上,比较不会出现排斥与感染的问题。这也就解决了过去用胚胎干细胞分化出心脏细胞,再移植到猕猴身上时,常出现的排斥与感染的困境。这个相关研究,也获得了当年台湾综合大学系统年轻学者创新研究成果杰出奖。

                     治疗肾脏病 造福洗肾病人

另外,羊水干细胞也有望应用在肾脏疾病的治疗。台湾迟迟无法摆脱「洗肾王国」的恶名,慢性肾脏疾病患者数量居高不下,每年需要进行血液透析的人数,就有约6-7万人。

美国维克森林再生医学研究所的团队,在今(2019)年3月,成功利用治疗性细胞来修复的方式,治疗肾脏相关疾病。研究团队向生病的肾脏注入了羊水干细胞,10周后发现肾脏功能有所改善。目前在临床前实验中获得初步成效,可能有望将来代替肾脏移植术。

干细胞治疗机制是什么意思?

干细胞三种机制

目前关

干细胞疗法

作用机制尚未完全明了,动物或体外治疗总结以下三种机制,如分化、

归巢

免疫调节

等。

1.多向分化:干细胞可分化为类肝样细胞,其具有多向

分化能力

由来已久。

Lee等早期治疗就已发现骨髓、脐带,

羊膜

牙髓

等来源干细胞可经HGF、bFGF诱导分化为肝样细胞,采用

逆转录

聚合酶链反应

检测到肝相关基因,

免疫荧光

分析验证白蛋白的产生。

证实干细胞不仅可分化类肝样细胞、表达肝细胞

标志物

,同时还发挥着

低密度脂蛋白

摄取和氨的解毒等肝细胞功能。

2.

归巢性

:目前专家们认为,

肝损伤

时干细胞可归巢至损伤部位分化为类肝类细胞进而发挥肝细胞功能。

另有体外

细胞迁移

治疗表明,经

转染

而高表达干细胞其迁移能力(归巢性)显着升高,

肝细胞生长因子

(HGF)参与其中。

如接受

干细胞移植

小鼠,在提高归巢性和损伤肝脏能力同时,其存活率升高和肝功能改善均有明显升高。

3.

旁分泌

与免疫调节:干细胞不仅分泌多种

免疫调节因子

,还可抑制转化分泌肝细胞生长因子(hepatocyte

growth

factor,HGF)、IL1、IL6等促炎症因子释放促进组织再生、抗纤维化作用。

肝细胞生长因子具有广泛生物活性,目前已知其具有促进细胞生长、增殖,抗纤维化等功能,肝组织损伤时肝细胞生长因子表达上调,发挥着促进组织再生、抗纤维化作用。

近期治疗提出干细胞分泌外泌体(Exosome)、胞外

囊泡

(Extracellular

vesicles,EVs)等可能参与调节

细胞再生

及免疫调节。

羊膜详细资料大全

羊膜为单层上皮细胞互相连线构成的薄膜。单层上皮细胞具有分泌羊水的作用。随着胚胎的生长发育,羊膜与绒毛密切紧贴,形成胎膜。胎膜随着羊膜腔逐渐扩大而呈半透明的薄膜,无血管,富有韧性(胎膜也就是羊膜腔的囊壁)。羊膜腔内充满的液体为羊水。羊膜仅覆盖在胎盘的儿体面,并不深入胎盘组织中,随着妊娠的进展羊膜腔逐渐扩大,占据整个子宫腔,羊膜是胎膜最内一层,是一层半透明的薄膜,与覆盖在胎盘、脐带的羊膜层相连线。

基本介绍

中文名 :羊膜 外文名 :Amniotic membrane 特点 :外科皮肤移植 后果 :挛缩和和融解 生物特性,制作保存,临床套用,优点缺点, 生物特性 羊膜是胎盘的最内层,与人眼结膜组织结构相似,含有眼表上皮细胞,包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质,其光滑,无血管、神经及淋巴,具有一定的弹性,厚约0.02~0.5mm,在电镜下,其分为五层:上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层,羊膜基底膜和基质层含有大量不同的胶元,主要为i、iii、iv、v、vii型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份,正是这些成份使羊膜可以充当“移植的基底膜”而发挥一种新的健康合适的基质作用来促进上皮化tseng认为人羊膜具有的这层较厚的基底膜及无血管的基质是决定移植成功的关键。 羊膜 动物实验和临床观察显示:羊膜基底膜可促进结膜干细胞分化为结膜上皮细胞、促进结膜上皮向角膜上皮转化,促进角膜缘干细胞增殖及提供一个有助于其生长的微环境,促进角膜上皮细胞移行、促进角膜基质胶元纤维增生、抑制结膜下纤维组织增生、抑制新生血管增生,具有抗炎、抗菌等功能。boudreau等发现羊膜基底膜能阻止上皮细胞凋亡,促进上皮细胞的分化及增殖。羊膜尤其新鲜羊膜能产生一些生长因子如:碱性成纤维细胞生长因子(bfgf)、肝细胞生长因子(hgf)和转化生长因子-β(tgf-β)等,这些因子能促进上皮化发生,有利于上皮细胞的分化、移行和增强上皮细胞的粘附性。羊膜产生的gb4、gb9、gb11三种单克隆抗体,有助上皮细胞的增殖、移行和分化,有利于创面迅速上皮化。 羊膜可阻止白细胞浸润,抑制多种蛋白酶如:胰蛋白酶、纤维蛋白酶、组织蛋白酶g、胶原蛋白酶等的活性,通过抑制相应的蛋白酶,从而减轻炎症程度、缩短炎症持续时间及抑制新生血管形成;羊膜还含有丰富的溶解酶、裂解体和补体,可以抑制炎症反应和抑制实质溶解。研究显示:羊膜的基质层一侧含有独特的间质成份能抑制转化生长因子β信号增生和抑制正常人类角膜、角膜缘纤维母细胞的肌纤维母细胞的增殖及分化为纤维细胞,因而羊膜具有抑制纤维化,减轻瘢痕形成的功能。akle等于1981年,andinolfi等于1982年分别报导了人羊膜上皮细胞表面不表达hla-a、b、c、dr 抗原或β2微球蛋白。houlihan等于1995年研究报导人羊膜表达ib抗原、限制ia抗原,这些免疫学上的特点论证了羊膜无免疫原性。综上所述,羊膜的生物学特点,可见羊膜可作为一种新型、可靠的供体材料而套用于眼科临床。 制作保存 羊膜的制备取产前血清学检查排除B型肝炎病毒(hbv)、C型肝炎病毒(hcv)、梅毒及爱滋病病毒(hiv)感染的孕妇剖腹产后即获得的胎盘,无菌操作下,冲洗胎盘上的血迹及污物,在羊膜与绒毛膜之间钝性分离,获得光滑、半透明的羊膜后用含50ug/ml 青霉素,50ug/ml链霉素,2.5ug/ml二性霉素及100ug/ml新霉素的平衡盐溶液浸泡20分钟,取出后上皮面朝上,平铺于含0.45um微孔的硝酸纤维素滤纸上,并剪成3cm×4cm大小,卷成筒状并用丝线绑紧。 羊膜的保存保存方法有多种,常见的有以下几种: 1)新鲜羊膜:取下并处理好的羊膜置于dmem培养基中,4℃冰柜保存,24小时内使用。 2)深低温冷冻羊膜:取下并处理好羊膜分装于按无水甘油与dmem原液1:1体积比的混合储存液内,放置于-80℃低温冰柜内保存,2周后使用。 3)甘油保存羊膜:取下并处理好的羊膜放入100%纯甘油瓶中,4℃冰柜保存,24小时后,无菌操作下,再移至另一个100%纯甘油瓶中,继续4℃冰柜保存。 4)冻干羊膜:这种羊膜经r射线消毒,能在室温下保存2年。此材料比较脆、韧性差、易撕裂,手术时可把植片直接贴在植床上而不用缝线固定。使用时,用无菌生理盐水冲洗羊膜,再放入1:2000u庆大霉素溶液中,复水20~30分钟后使用。 临床套用 眼表疾病的化学烧伤、热烧伤引起的眼表疾病严重的眼表烧伤在急性期往往会导致角膜和结膜坏死、融解,甚至角膜穿孔,治疗的策略主要是去除坏死的组织,促进眼表上皮化,减轻炎症和阻止结、角膜的融解等,药物和传统的单纯手术切除效果往往不理想;陈旧性眼表烧伤者,其角膜表面坏死,血管新生,睑球粘连,组织瘢痕化,传统的角膜移植术常因发生严重的排斥反应而致手术失败。近几年来,国外anderson、国内周世有、陈俊洪等利用羊膜具有促进上皮粘附生长及增殖,减轻炎症,抑制新生血管形成,减少瘢痕增生,抗粘连等特性而把其套用于严重急性期或陈旧性眼表烧伤的治疗中去,获得了很好的临床效果。羊膜移植于缺损的眼表,提供一个含基底和基质成份的胶质支架,使增殖的上皮细胞可在其上扩展及移行;羊膜产生的gb4、gb9、gb11等单克隆抗体,有助上皮细胞的增殖、移行和分化,有助于角膜上皮缺损的修复;并且,羊膜有助于角膜缘干细胞的增殖并提供一个适合其生长的微环境,因此,羊膜移植可以促进正常结膜、角膜上皮化,达到真正结膜及角膜眼表的重建。 羊膜 感染性及非感染性角膜溃疡的治疗方法有多种,如有:药物、软性接触镜、结膜瓣遮盖术和角膜移植术等。前三种方法疗效不肯定,常致视力丧失;后一种效果相对较好,但移植材料来源困难,且术后出现排斥反应、继发性青光眼等并发症的机率大而令其难以广泛开展。近几年来,国外lee等、kruse等、国内丁亚莉、吴护平等分别报导了利用羊膜移植治疗不同病因的角膜溃疡,取得了理想的临床效果,国内王宇宏报导套用羊膜移植治疗24例真菌性角膜溃疡,均获得成功。羊膜可产生多种生长因子如:bfgf、hgf、tgf-β等,它们有利于上皮细胞的分化、移行,可增强上皮细胞的粘附性和调节结膜上皮细胞转化为角膜型上皮细胞,并可作为支架组织代替部分角膜组织,补充角膜基质内被破坏的胶原,为上皮生长提供基底膜;羊膜可抑制多种蛋白酶及多种白细胞溶解酶的活性,促进成纤维细胞的再生及胶原组织的再构造,从而可以清除角膜坏死组织、促进组织的愈合和阻止角膜溶解。可见,羊膜移植治疗角膜溃疡,可以有效控制炎症,促进溃疡愈合,重建眼表结构,是一种行之有效的方法。 大泡性角膜病变的起因是角膜内皮功能失代偿,导致基质水肿,乃至上皮出现大泡。治疗方法有药物、软性接触镜、角膜移植、角膜层间灼烙术等,但疗效不是不理想,就是难以普及。近年来,随着羊膜在眼科领域的逐渐开展,它也被用来治疗大泡性角膜病变并取得了可喜的临床疗效。羊膜具有一层人体最厚的基底膜,富含iv、v型等胶原和层粘连蛋白,可作为一个“底物”供正常健康的上皮细胞在其上分化、移行;且具有活跃物质转运功能,允许一些小分子物质如氯化钠等通过,这样可以确保移植之羊膜和病损的组织易于进行物质和能量交换;再者,羊膜可产生多种生长因子,从而促进上皮细胞的分化、移行,增强基底上皮细胞的粘附,阻止上皮细胞的凋亡;而且羊膜具有抑制纤维化、减轻瘢痕、抑制新生血管及降低炎症的功能。因而用羊膜来治疗大泡性角膜病变能够提供一个理想的基底膜促进角膜上皮修复,重建一个相对健康的眼表组织结构。 原发性或复发性翼状胬是眼科常见疾病,治疗以手术切除为主,而单纯的手术切除复发率较高,一般为30%~50%,甚至高达69%。不少眼科医生在翼状胬肉切除手术中联合丝裂霉素或联合结膜移植、角膜缘干细胞移植等,这些复合的术式虽可降低复发率,但由于丝裂霉素会对正常的结膜、角膜、巩膜组织,甚至晶体、视神经、视网膜都有可能带来毒性作用;联合异体结膜移植或角膜缘干细胞移植由于异体移植材料来源狭窄而令手术难以开展,且术后可能出现排斥反应,而自体的结膜、角膜缘干细胞移植可能造成局部组织缺损、瘢痕形成等,会影响未来手术如白内障、青光眼手术的操作。近年来,羊膜作为一种新型的生物材料,不少眼科医生把它套用到原发性或复发性翼状胬肉切除术中,取得了令人满意的效果,因为羊膜基质中含有的多种蛋白酶抑制剂,不但能抑制胬肉纤维细胞的分化,并能促进角膜缘干细胞的增殖、分化,有利于角膜上皮细胞的生长、移行和防止其调亡,且羊膜具有抗纤维化和抗新生血管形成等功能。因此翼状胬肉切除联合羊膜移植术,可促进角膜上皮创面的修复,降低术后复发率,且羊膜覆盖于 *** 的巩膜创面上,可降低术后炎症反应,减轻病人痛苦。 其他结膜疾病某些眼部或全身系统性疾病所致的结膜囊狭窄,stevens~johson综合征引起的睑球粘连,大面积结膜肿瘤,义眼座暴露等疾病的治疗对眼科医生来说是一个棘手的问题,这些疾病病变范围往往较大,病损组织往往亦较多,因此手术切除的区域相对较大,修复的难度亦相对较高。既往套用自体结膜、唇黏膜、鼻黏膜,甚至 *** 黏膜来进行修复,但由于材料来源困难而影响手术的开展。国内卢蓉等人根据保存羊膜的基底膜利于上皮细胞分化、移行,能加强上皮细胞的粘附,阻止上皮细胞凋亡,可抑制纤维血管组织形成,消炎、抗菌、止痛等生物学特性而把保存羊膜套用于结膜重建术中并取得了令人鼓舞的效果,羊膜植于眼表后可作为一种桥梁,促进周边正常结膜上皮细胞在其上移行,最终达到修复结膜病损的目的。 青光眼是眼科一种常见的、复杂的、致盲率很高的疾病,目前,手术是治疗该病的一种重要手段,其中小梁切除术和非穿透小梁切除术是治疗闭角型青光眼和开角型青光眼的两种主要滤过术式。青光眼滤过术的成功与否要看周围外滤通道及手术区有无被增生的纤维组织堵塞,也就是滤过通道及滤过泡有无被瘢痕化。目前,在小梁切除手术中,很多术者用5-氟尿嘧啶或丝裂霉素等抗代谢药物来抗瘢痕的形成,但这会导致角膜毒性反应、结膜伤口渗漏、持续性低眼压、滤过泡苍白等不良作用;非穿透性小梁切除术是近年来发展起来的一种新的抗青光眼手术,术中联合套用sk-gel或胶原等生物胶,可使手术效果更好,但由于这些生物胶来源有限、价格昂贵而令此术式难以普及。羊膜基质中含有抑制tgf-β信号传递和抑制成纤维细胞增殖、分化为纤维细胞的成份,从而减少滤过通道及滤过泡的瘢痕增生;羊膜中含有多种蛋白酶抑制剂如:α1-抗胰蛋白酶、α2-巨球蛋白、α2-纤维蛋白溶解抑制剂等可以阻止己分离或破损组织表面的粘连,有利于滤过通道的通畅和滤过泡的形成、维持,再者,羊膜基质自身为一层胶原结构,可以隔开巩膜瓣和巩膜床创面,阻止创面的纤维组织粘连和增生,同时羊膜还具有清除炎症细胞,减轻炎症反应和降低血管化等特性。国内翼建平,杨静等眼科医生利用羊膜这些特性而把羊膜套用于小梁切除和非穿透小梁切除术中去,取得很好的临床效果。用羊膜代替抗代谢药物,可减少眼部的不良作用,用羊膜代替生物胶,使手术成本下降,令其更易广泛开展。 优点缺点 角膜缘缺损较大患者单纯行羊膜移植术效果不佳,需再联合角膜缘干细胞移植术,才能更好地重建角膜表面结构,眼科临床医生必须认识到这点,否则就有可能令手术以失败告终;保存羊膜移植需要受体眼有一定量的健康球结膜组织,否则羊膜得不到足够的营养和支持,移植片会过早降解而令手术失败,此点,令羊膜在大面积的眼表疾病套用时后果欠佳;羊膜移植重建急性期眼表烧伤的手术时机还有待临床的进一步观察;冻干羊膜哪一面贴于眼表,才能取得更好的疗效,还需临床进一步验证。 羊膜 但不论怎样,羊膜作为一种新型的生物材料套用于眼科,尤其眼表疾病,取得了神奇的效果,而且它来源广泛,价格低廉,取材和保存简便,手术操作简单而且几乎不发生免疫排斥反应,十分适宜在基层医院开展。需要强调一点是手术应在显微镜下操作,这样既能干净清除病变组织,又能有效减轻手术创伤。羊膜是否还含有其他不为人所知的细胞因子,已经检测出的几种生长因子的确切机制尚未十分明了;新鲜羊膜中的各种活性成份是否会对内眼手术有影响;羊膜移植术进行眼表重建具有的抑制基质细胞增生及抑制新生血管形成的机制有待进一步研究,这些还需要眼科基础研究人员及眼科临床医生的不懈探索。相信,伴随着其他相关学科的发展,在广大眼科工作者的共同努力下,羊膜将会有更多的神奇功能套用于眼科临床。

瘀肉眼?什么症状?应该如何治疗?

临床上将其大致分为初发胬肉(又分为结膜期和角膜前期)进展胬肉(角膜后期)和术后胬肉(又分为治愈胬肉和复发胬肉)3类 1.初发胬肉(1)结膜期胬肉:睑裂部球结膜充血肥厚逐渐向角膜表面伸展形成一三角形带有血管组织的胬肉状似昆虫的翅膀故名翼状胬肉多发生于鼻侧颞侧者较少伸向角膜时可侵及前弹力层及浅层基质裂隙灯下睑裂部结膜肥厚充血水肿血管扩张其尾部与半月皱襞粘连移动球结膜则造成一横向条索二碘曙红或荧光素染色冲洗后用钴蓝光观察可见结膜上皮点状脱落而其临近受上下眼睑覆盖的结膜则不着色(图1)(2)角膜前期胬肉:肥厚的结膜形成的三角形充血皱襞头部跨越角膜缘底部扇状越过半月皱襞向泪阜两侧伸展在角膜缘前区为胬肉的颈部胬肉的头部在角膜缘上隆起越过角膜缘向角膜伸展约2mm表面有微细血管在头的尽端有一灰白色小泡状由微粒堆积成的小岛侵入角膜浅层为Fuchs小岛小岛与头部周围角膜呈现肉眼难于辨认的混浊靠体部亦有微粒组成的灰白色条纹沿角膜缘扩张的血管分布头和颈部在浸润充血区与角巩膜粘连荧光素着色呈现出上皮点状脱落(图2)2.进展胬肉 头部成灰白色胶样隆起其尽端形成竖向锯齿状边缘颈部血管充盈组织肥厚胬肉头部表面微隆起邻近有散在钙化点进展缘可越过瞳孔中央深至角膜前弹力层其上皮隆起混浊明显由于胬肉对角膜的牵拉作用可使角膜的弯曲度发生改变而引起散光Habsen等检查39眼发现胬肉眼呈现规则散光散光度可达5D但多数视力不下降Lin等测定胬肉眼对比敏感度发现各个空间频率明显降低同时发现眩光现象也较正常眼明显增多胬肉可长期稳定无明显充血组织肥厚头部稍显隆起其前方角膜呈灰白色浸润胬肉不断向角膜中央推进称为进行期多无自觉症状但当胬肉向角膜中央时展时可引起散光若遮盖瞳孔则将严重影响视力肥厚挛缩的胬肉可限制眼球运动角膜有溃疡或烧伤后球结膜与角膜发生粘连称为假性翼状胬肉它可发生在角膜缘的任何方向是静止性仅头部与角膜粘连一般并不困难尽管翼状胬肉的改变非常直观但也常有误诊的发生以下是关于翼状胬肉的诊断标准:成熟的翼状胬肉是在角膜上的隆起的三角形的病灶其基底位于角膜缘旁的结膜而尖端指向角膜中央如将翼状胬肉人为地分为头颈和体三部分头部是位于角膜的部分颈部是角膜缘上的部分而体部则位于巩膜表面成熟的翼状胬肉在其头部前方边缘的角膜上皮常有特征性改变表现为角膜上皮及上皮下的脂质性改变此改变通常与头部之间有一透明区绝大多数翼状胬肉位于睑裂区如初发性病变起源于睑裂区以外则诊断原发性翼状胬肉应慎重此外翼状胬肉在角膜缘处与角膜缘黏连而假性胬肉则是睑球结膜的粘连通常在角膜缘处不粘连局麻下用一玻棒即可区分二者(一)治疗尽量避免外来刺激积极治疗眼部慢性炎症1.用抗生素眼药水以控制结膜炎症,减轻充血在充血较重时可加用皮质类固醇眼药水为减少外界刺激可戴适当的变色镜当有炎症刺激时可点0.25%氯霉素与0.5%可的松眼药水夜晚可涂四环素可的松眼膏2.小而静止的翼状胬肉无需治疗如胬肉为进行性或已接近瞳孔区影响视力或眼球转动受限时则可行手术切除对不愿意接受手术的病人可用2000~3000U/ml的博来霉素液0.3ml在表面麻醉下注射于翼状胬肉的颈部及体部每周1次3~6次为1疗程为减轻局部反应可在对侧球结膜下注射0.3ml泼尼松龙四环素可的松眼膏包扎3.冷冻治疗 用-40℃的冷冻头接触胬肉头部及颈部破坏其新生血管并使之萎缩用于较小和较薄的翼状胬肉4.手术治疗(1)适应证:①翼状胬肉为进行性肥厚且充血;②胬肉已侵入近瞳孔区影响视力(2)手术方法:翼状胬肉的手术治疗要求达到3个主要目的:安全地将胬肉切除干净;达到良好的光学效果;避免复发因此在选择手术方法时要特别慎重手术方法主要包括:翼状胬肉头部转移法暴露巩膜法结膜移植术后来又发展出口腔黏膜移植术及羊膜移植术等为最大限度地减少术后的复发在术中操作及术后要注意:①取健康球结膜不要过厚移植要平整;②术毕用虹膜复位器把移植的结膜瓣下积血压出使之平伏紧贴在巩膜上;③胬肉要切除干净尽量使角膜面平整而又少损伤健康组织;④切除胬肉时要注意不要伤及泪阜及肌腱以免日后发生睑球粘连或运动障碍;⑤对于胬肉下的结膜下组织其切除范围要比胬肉大一些以减少术后迅速发生新生血管或组织增殖;⑥由于角膜表面及结膜下胬肉残存组织是形成胬肉术后复发的基础而巩膜表层新生血管进入角膜创面是胬肉复发的根本原因因此彻底切除角膜缘巩膜及角膜上的变性组织并暴露巩膜用作防止结膜纤维组织入侵角膜的缓冲地带;也可在角膜缘外侧刮除一条1mm宽的巩膜作为防御结膜纤维入侵的屏障必须对手术后病人进行定期复查随访以观察有无复发体征5.术后药物治疗 虽然翼状胬肉在手术方法上曾进行多次的改进但仍不能避免复发Castroviejo曾报告复发率为25%~45%自从采用板层角膜移植后复发率有所降低一般认为术后采用适当的辅助治疗对减低其复发率是有一定效果的概括有以下几种方法:(1)噻替哌(thiotepa):这是一种抗癌药物方法是1∶2000(即15mg噻替哌溶在30ml Ringer’s溶液中)的噻替哌眼液在术后5天开始应用每3小时1次连续8周;亦有人提出可以持续使用3~6个月其作用主要在于抑制术后新生血管新生上皮细胞及新生结缔组织阻止细胞核的丝状分裂对预防翼状胬肉复发有较好的效果(2)丝裂霉素C眼液:这是一种抗增殖性药物用以防治术后复发术后滴用0.2mg/ml丝裂霉素滴眼液3次/d共7天或2次/d共5天已足够维持低复发率且较安全(3)局部皮质类固醇治疗:翼状胬肉术后复发可能与新生血管有关皮质类固醇可抑制炎症反应与角膜水肿从而防止血管新生使用时间可在角膜上皮缺损修复后开始点用0.5%可的松眼液或0.025%地塞米松眼液4次/d持续6周6.物理疗法(1)β射线照射:术后采用β射线照射对防止复发有显著疗效手术后β射线照射胬肉复发率可降至3.6%最常用者90Srβ射线采用的照射总量为2600R分为术后第2天拆线时及术后8~10天3次照射若总剂量低于0.31C/kg(1200R)易复发而剂量过高超过1.29C/kg(5000R)则易发生辐射性白内障故应予注意(2)激光治疗:用氩激光对准胬肉颈体部血管进行光凝固压强200~400mw时间0.2~1.0s,直径200μm每次凝固点100~200个凝毕眼部用0.5%可的松液或0.1%地塞米松液点眼(二)预后手术成功则恢复良好术后复发原因与术眼条件(如胬肉肥厚充血明显的进行性胬肉)操作不当及手术方法等因素有关继续受到危险因素的刺激也是重要因素

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