胎盘间充质干细胞分离方法（胎盘间充质干细胞怎么使用）

本文的目的是仔细研究胎盘间充质干细胞分离方法的感觉和它的对应关系。

胎盘存储后怎么提取干细胞呢？

实验室有设备，专业人员提取。关键在于胎盘采集后要保持新鲜

间充质干细胞移植都有哪些方式

间充质干细胞移植，指的是将间充质干细胞从自身采集，然后进行培养、纯化，再回输进患者体内用以治疗硬皮病、皮肌炎、红斑狼疮、类风湿、运动神经元病等免疫性疾病的一种最前沿的治疗方法。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为肾、脂肪、骨、软骨、肌肉、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于病变引起的组织器官损伤修复。

诺莱医学临床提示间充质干细胞的移植分为以下四个部分

第一步：对患者的整体状况进行评估，如果没有禁忌症如：感染、肾危象、心包大量积液等的情况下，进行细胞动员4－5天。

第二步：MSCs的采集（骨髓、脐带、脂肪和羊膜）

第三步：MSCs的分离、培养及扩增,大约20天左右

第四步：MSCs的移植:

1.静脉注射

2013年5月-2014 年4月，朱宁等人在诊治18例系统性红斑狼疮患者时，用分离培养后的间充质干细胞采用干细胞移植技术进行治疗。该干细胞移植治疗就是采用静脉输注的方式，移植方法如下：患者取仰卧位，首先取肘前部较粗血管，利用生理盐水建立静脉通道，然后将已复温好的装有间充质干细胞的干细胞袋接入静脉通道内，覆盖无菌纱布于穿刺部位，并注意控制滴速，一般干细胞悬液 30 ml于 2 小时内滴完，最后滴入生理盐水100 ml 以冲洗管道。为入选患者均完成1个疗程的治疗。结果证明应间充质移植治疗系统性红斑狼疮疗效肯定，且较为安全。

2.动脉注射

干细胞移植治疗糖尿病，是糖尿病治疗新疗法中的热门疗法，隆敏等人曾经用间充质干细胞移植方法治疗一位39岁的Ⅰ型糖尿病女性患者。移植过程为：患者进入手术室，寻找到供应胰腺的胰背动脉后，将间充质干细胞缓慢均匀注射入胰背动脉。结果该患者术后3个月内胰岛素剂量大幅度减少了58.54％，有望完全停用胰岛素。

3.多点混合移植

干细胞移植治疗糖尿病足的疗效被广泛认可，在众多临床案例中，部分研究采用混合移植的方式以求使干细胞在体内发挥的功效更加全面化。虞朝黎等人用间充质干细胞移植治疗17例缺血性糖尿病足患者，移植方法就是采用多点混合注射的方法，具体过程为：抽取间充质干细胞后分离，配成细胞混悬液；在手术室硬膜外麻醉后，无菌条件下，将干细胞悬液按3×75px间距进行肌肉注射，病变严重的按1×25px间距注射；肌肉注射的同时进行股动脉穿刺，放置导管，将部分干细胞悬液注入股动脉。

4.病灶部位注射

2007年至2011年王玉龙等人采用间充质干细胞移植治疗胫骨骨折骨不连患者11例，结果患者经间充质干细胞移植治疗胫骨骨折骨不连，在4-27个月，平均13个月中，X线片显示骨折愈合良好，疗效满意，有临床应用价值。移植方法为：在手术室X 线透视定位下，用14号骨穿针准确刺入胫骨骨不连部位,完全注入间充质干细胞悬浮液。此外，在应用间充质干细胞治疗小儿脑瘫的研究中，很多研究者也会选择患儿脑内移植、腰椎穿刺等与疾病相关的功能组织位点进行移植。

诺莱医学温馨提示：

①MSC在组织中的含量（细胞丰度）：脐带的含量毫无疑问为最高，羊膜和脂肪次之；而脐带血中含量极少，导致检测不到之事常用发生；

②MSC增殖能力：优于MSC具有年龄特性，脐带和羊膜来源的MSC具有明显的优势，脂肪和骨髓次之；

③免疫调节能力：脐带、羊膜和脂肪来源的MSC优于骨髓MSC，而胎盘MSC的免疫调节能力最差；

④分泌细胞因子谱：脐带MSC分泌细胞生长因子的总量明显高于骨髓MSC，但是不同来源的分泌细胞因子谱有明显的特点；

⑤由于具有来源获取方便和高增殖能力等特性，能培养获得大量的MSC细胞数足够满足临床治疗需要，使得脐带、羊膜和脂肪最适合作为MSC细胞治疗的组织来源。但是我们也必须认识到，不同的实验室、不同的分离方法及不同的培养体系，均可导致MSC的实验研究结果出现不一致性，如下图所示；即使是相同的来源，不同个体之间的间充质干细胞也出现功能上的异质性。

因此，我们必须对目前的研究结果和结论保持一定的谨慎态度，不排除将来的某天培养技术的突破，可以抵消组织来源的差异所导致的MSC功能的差异。

胎盘干细胞和造血干细胞有什么异同？

我们从脐带血中分离提取的是造血干细胞；从脐带、胎盘中分离提取的是间充质干细胞。这两种干细胞都是人体最原始的胚胎母细胞。

脐带血造血干细胞主要用于治疗血液系统恶性肿瘤、血红蛋白病、骨髓造血功能衰竭、免疫系统代谢疾病等，如：白血病、多发性骨髓瘤、地中海贫血、先天性免疫缺陷疾病等。脐带血造血干细胞在自体使用时无需配型，在直系亲属间的配型成功率能够达到25%，若给他人使用，4个位点及以上相合就能够使用。

脐带、胎盘间充质干细胞是一种具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞，目前主要用于造血干细胞移植后移植物抗宿主病治疗、促进造血重建，与造血干细胞共同移植提高白血病和难治性贫血等疾病的治愈率；另外在心血管疾病（冠心病、心衰等）；神经系统疾病（脊髓损伤、老年痴呆、帕金森氏症、脑瘫、脑梗死等）；代谢类疾病（糖尿病等）；骨组织病（股骨头坏死、骨质疏松、软骨损伤、肌腱损伤等）；自身免疫性疾病（红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎、多发肌炎等）等方面也具有潜在疗效，并且可以广泛应用于抗衰老和美容。脐带、胎盘间充质干细胞使用时无需配型，只要将细胞扩增后即可使用。另外，在脐带血移植后通过脐带、胎盘间充质干细胞移植治疗还可以减少术后排异反应，促进修复和治疗。鉴于细胞分化和复制扩增能力，脐带、胎盘间充质干细胞可多次使用，进行专业干细胞存储对整个家庭都是一份保障。

综上，造血干细胞和间充质干细胞可治疗的疾病范围不同，故他们是不可互相替代的。

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