体外培养胚胎干细胞时通常要加入的简单介绍

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高中，生物，胚胎干细胞的培养

肯定不是。

饲养层是一层细胞，用于提供干细胞培养所需的物质（教材中说的很清楚）。

细胞培养液的成分有：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆.

干细胞相关的培养液都必须在5％CO2的气体环境中培养使用。否则会对细胞产生影响。气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。氧气参与三羧酸循环，产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。二氧化碳既是细胞代谢产物也是细胞生长繁殖所需成分，它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值。大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响。一般情况下，细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸环境中更利于细胞生长。

发育培养液中应加入氨基酸

（1）动物细胞培养的培养液中，除了要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸等营养物质外，通常还需加入动物血清等天然成分．通过培养将获得遗传物质稳定的细胞群体，该细胞群体称为细胞株．

（2）ES细胞能培养成小鼠个体，说明胚胎干细胞具有发育的全能性．在哺乳动物胚胎发育过程为：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚期→原肠胚→个体，可见，囊胚将进一步发育成原肠胚．

（3）过程III中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体．构建基因表达载体时，需限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．

（4）从体细胞培养成克隆转基因小鼠，需采用核移植技术，并进一步通过细胞培养、胚胎移植来实现．

故答案：（1）动物血清 细胞株

（2）发育的全能性 原肠胚

（3）重组DNA（或重组载体） 限制酶、DNA连接酶

（4）核移植 胚胎移植

在胚胎干细胞培养时要加入滋养层细胞吗,为什么?

要使干细胞保持在不分化状态下，就可以加饲养层细胞（即输卵管上皮细胞）

教材 选修3 80页

胚胎体外培养时,培养液要加胚胎成纤维细胞

A、胚胎分割时分割的份数越多，移植的成功率越低，A错误；

B、ES细胞培养时加饲养层不会促进细胞分化，通常使用的饲养层细胞为成纤维细胞，能够分泌一些促进干细胞维持的因子，B错误；

C、进行早期胚胎体外培养时，需配制不同成分的营养液，以培养不同发育时期的胚胎，C正确；

D、通过胚胎干细胞核移植，由于细胞质遗传物质来自受体，因此可以培育出与细胞核供体相似的复制品，而不是完全相同，D错误．

故选：C．

体外胚胎干细胞培养，为了维持胚胎干细胞不分化，在培养皿中加入什么细胞

ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能维持不分化的状态

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