间充质干细胞培养基使用量（间充质干细胞多少单位合适）

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请教间充质干细胞成脂诱导分化培养基的配制

充质干细胞成脂诱导分化培养基的配制

诱导液？你说的是成骨诱导条件培养基吧。

5天后半量换液，第10天当观察到少量细胞变为梭形、贴壁，即全量换液，改为条件培养基。此后每3-4天换1次条件培养基。倒置显微镜隔日观察，直至细胞不能传代、衰老死亡为止。

下面就是爬片的制作，染色以及结果判定了。

诱导培养基添加必要的成分使组织切块或细胞形成愈伤组织,分化培养基指把促使愈伤组织细胞恢复全能性,可以进行正常的根茎叶的形成

1个25cm培养瓶间充质干细胞长满大约有多少细胞

间充质干细胞接种后，先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期。此时细胞质回缩，胞体呈圆球形，然后细胞贴附于载体表面称贴壁

悬浮期结束。1个25cm培养瓶间充质干细胞长满有多少细胞与细胞大小，培养基成分，载体的理化性质等密切相关。一般情况下，会是在5×10的6次方左右

所以1个25cm培养瓶间充质干细胞长满大约有5×10的6次方左右的细胞

96孔板一般接种多少间充质干细胞

总结下各种孔板细胞接种量 仅供参考

细胞培养瓶（板）生长面积容量与细胞数（大约）

96孔板       4~5X10 4          35mm培养皿           1X10 6

48 孔板      1.3X10 5          60mm培养皿           2.6X10 6

24孔板       2.5X10 5          100mm培养皿          7X10 6

12孔板       5X10   5          150mm培养皿          1.8X10 7

6孔板        1.2X10 6

细胞瓶面积        容量          工作体积         细胞数目

612.5cm2          25ml          2ml              5X10    5

25cm2             50ml          5ml              1X10    68

35cm2             75ml          10ml             2X10    6

75 cm2            250ml         15ml             X10     6

150cm2            700ml         40ml             1.1X10  7

补充：不同孔板所加培养液的液面都不宜太深，一般在2~3mm范围，结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量（参考下表）。若加液量过多会影响气体（氧气）交换，而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。

用α-MEM培养基培养间充质干细胞需要添加什么因子，添加的量是多少

干细胞相关的培养液都必须在5％CO2的气体环境中培养使用。否则会对细胞产生影响。气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。氧气参与三羧酸循环，产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。二氧化碳既是细胞代谢产物也是细胞生长繁殖所需成分，它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值。大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响。一般情况下，细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸环境中更利于细胞生长。

间充质干细胞用量一般是多少

如果是静脉回输的话，几个亿单位量，如果是靶向的话5千万到一个亿的量就差不多了

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