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小鼠脂肪来源间充质干细胞(大鼠脂肪间充质干细胞提取)

充质干细胞 2023年03月22日 08:58 im

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请教小鼠原代脂肪干细胞的形态及分离培养条件

小鼠脂肪来源干细胞的分离、培养及鉴定

脂肪来源干细胞(Adipose-DerivedStemCells,ADSCs)作为组织工程的种子细胞正受到越来越多的关注。 本实验采用一次消化多次收集与差速贴壁法分离小鼠腹股沟及附睾脂肪组织中的ADSC。通过倒置显微镜观察ADSC的一般形态;透射电子显微镜观察ADSC的超微结构;流式细胞术及激光共聚焦显微镜检测ADSC表面标志;利用特定的诱导液诱导ADSC分化及利用扫描电子显微镜观察ADSC与胶原支架的相容性。 结果显示ADSC呈长梭形或成纤维细胞样,旋涡状或束状交叉生长。ADSC细胞体积大,胞质内含有线粒体及粗面内质网等细胞器。ADSC的生长符合干细胞的生长规律,并可在体外稳定传至第9代。ADSC表达CD44及CD29,不表达CD34。成骨诱导剂诱导后,细胞内碱性磷酸酶表达量增加,细胞基质发生钙化。成脂肪诱导剂诱导后,细胞质内可见较多小脂滴。说明ADSC具有分化为成骨细胞及脂肪细胞的潜能。ADSC能够在胶原支架上铺展生长,说明其与胶原支架具有良好的相容性。 本实验建立了分离、培养小鼠ADSC的技术方法,为将来利用小鼠ADSC进行皮肤、肌腱、血管及神经组织修复的动物实验研究提供了前期实验基础和技术支持。

大鼠小鼠间充质干细胞区别

MSC的细胞表面标志物鉴定常采用流式细胞仪来进行。MSC属混杂细胞群,其表面抗原也具有非专一性, 它可同时表达间质细胞、内皮细胞和表皮细胞的表面标志,如粘附因子、生长因子和细胞因子受体以及整合素家族等。

MSC的细胞表面标志物鉴定标准为:

① CD105、CD73和CD90阳性率≥90%;

② CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79α或CD19、HLA-DR呈阴性,阳性率≤5%。

不同组织来源的MSC可共享相同的细胞表面标记,如CD29和CD44。

03 多向分化潜能鉴定

MSC具有在体外分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肝细胞等定向分化的能力,所以鉴定MSC的多向分化潜能也是重要的鉴定方法之一。MSC成骨诱导分化最常用的染色方法是茜素红染色法,成脂诱导分化最常用的染色方法是油红O染色法,而成软骨诱导分化最常用的方法是阿利辛蓝染色、悬浮培养。

间充质干细胞主要来源是?

间充质干细胞是什么:

间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)来源于中胚层的一类多能干细胞,能分化为细胞之间的间质组织而得名,具有自我复制和分化潜能的干细胞共性。

脐带间充质干细胞

间充质干细胞来源:

间充质干细胞来源(脐带、骨髓、脂肪、脐带血、羊膜、胎盘、牙髓、外周血等),其中脐带来源的是临床应用最多的,因其来源广泛, 无需配型,感染率低, 无伦理问题, 分化潜能强,增殖能力强,采集方便等特点。

间充质干细胞来源

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标签: 小鼠脂肪来源间充质干细胞

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