干细胞视神经再生突破性进展（视神经再生研究新突破）

目前神经再生研究的进展如何？取得些什么新的成果？

大鼠异体神经段皮下包埋后的形态学特征

高明堂1,蒋电明2（1郑州第五人民医院骨科, 河南省郑州市450003；2重庆医科大学附属第一医院骨科，重庆市400016）

高明堂，男，1969年生，河南省扶沟县人，汉族，2002年重庆医科大学毕业，硕士，主治医师，主要从事周围神经损伤的研究。

zzgmt@126.com

摘要

背景：有研究表明，皮下包埋的异体周围神经片可显著减少淋巴细胞浸润，降低免疫反应。

目的:观察大鼠异体神经段经皮下包埋2周后大体形态、光镜和电镜观察结果，并与自体神经段皮下包埋结果进行比较。

设计：随机对照实验。

单位：郑州第五人民医院骨科和重庆医科大学附属第一医院骨科。

材料：选用30只成年健康Wistar雄性大鼠，体质量（200±20）g。取10只大鼠为异体神经移植的供体。将其余20只按随机抽签法分为2组：异体神经包埋组和自体神经包埋组，每组10只。JEM-1220型透射电子显微镜（日本）。Olympus BX50光学显微镜（日本）。

方法：实验于2000-10/2002-04在重庆医科大学骨科实验室完成。（1）在异体神经移植的供体大鼠坐骨神经骨盆出口以远5mm处切断，向远处取长约15mm坐骨神经一段作为移植物。异体神经包埋组：取供体大鼠15mm坐骨神经段包埋于右大腿后侧。自体神经包埋组：在右大腿后侧埋入自体左侧15mm坐骨神经片段。（2）术后2周取出皮下包埋的神经段，进行大体观察；然后2组各随机取5个标本做苏木精-伊红染色，进行光镜观察（×400）；其余各5个标本作超薄切片（0.5μm）透射电镜下观察（×17000）。

主要观察结果：两组大鼠神经段经皮下包埋2周后大体形态、光镜和电镜观察结果。

结果：（1）大体观察结果：2组神经段外观相近。（2）光镜观察结果：2组均见髓鞘变性，轴突断裂，血管充血，外膜结缔组织增生，炎性细胞浸润。异体神经包埋组炎性反应稍重于自体神经包埋组。（3）电镜观察结果：2组可见相似的髓鞘退变、变性，许旺细胞退变。

结论： 异体神经包埋后周围神经发生一定的炎性反应，但许旺细胞活性与自体神经包埋后周围神经相似。

《中国神经再生研究（英文版）》2006年8-12月发稿重点 详见网站：

☆ 中枢神经损伤与再生的应用基础与临床研究

☆ 周围神经损伤与再生的应用基础与临床研究

☆ 神经损伤与再生的创新性机制研究

☆ 神经损伤与再生相关的多种因子研究

☆ 神经损伤与再生相关的蛋白质组学研究

☆ 应用干细胞、组织工程技术干预神经损伤与再生的各类相关研究

☆ 应用中医药技术干预神经损伤与再生的各类相关研究

北大副教授杨柳参加哈佛眼科研究所视神经再生研究

北大医院眼科副教授杨柳在美国从事博士后研究期间，与哈佛医学院Schepens眼科研究所的研究人员一起完成了活性干细胞美容安全吗损伤的视神经从眼球到脑内靶组织的再生的研究。文章发表在2005年3月的Jonrnal Cell Science。领导这一研究的哈佛医学院眼科副教授陈东风说：“这是一个美梦成真的时刻，也是迄今为止能够使如此多的神经纤维再生到如此远距离的靶组织的唯一研究，而以前作为中枢神经系统一部分的视神经损伤后是不能再生的。”这将会为众多由于青光眼和视神经损伤而致盲的患者，同时也对脊髓损伤患者带来康复的希望。

该研究是在实验室小鼠身上实现的，他最新的免疫细胞疗法是什么们利用视神经损伤模型，着力研究是什么原因造成了哺乳动物中枢神经系统再生的障碍，并努力扭转这种再生的障碍，通过Bcl-2高表达和抑制瘢痕的形成实现了小鼠视神经的再生。

这一研究小组认为，至少看到40%的神经纤维再生，但是我名医施今墨的五个抗衰老方们相信实际上再生的比例更高。下一步就是要研究再生的视神经是否有功能，也就是说小鼠是否能够重新恢复视力。当然将Bcl-2高表达结合防止瘢痕形成同样也会在其他中枢神经系统的再生中起作用，使脊髓损伤患者能够有希望重新站立行走。

Schepens眼科研究所是美国哈佛医学院附属研究所，是世界上最大的独立眼科研究所。杨柳于2001年11月至2003年12月在美国哈佛医学院Schepens眼科研究所进行为期两年的博士后研究，重点进行视神经再生和视网膜脱离后神经细胞凋亡和拯救的研究工作。而视神经再生从眼球长到脑内靶组织的研究是由杨柳完成的。目前杨柳正在与Schepens眼科研究所合作，继续对小鼠视神经再生及功能恢复进行研究。

近日，在美国哈佛大学医学院Schepens眼科研究所诞生一项重大突破：科学家通过抗凋亡基因Bcl－2高表达和抑制损伤瘢痕的形成实现了小鼠视神经的再生，为青光眼等永久致盲性眼病患者带来康复的希望。研究论文发表在国际权威杂志《细胞科学杂志》今年3月号上。北京大学第一医院眼科副教授杨柳在哈佛医学院Schepens眼科研究所做博士后期间全程参与这一课题，并承担了第一部分的全部研究，也正是得到高度评价的“科学家首次使视神经再生——从眼球再生到脑内”的部分。

杨柳与哈佛同行一起，利用视神经损伤模型，致力于研究是什么原因造成了哺乳动物中枢神经系统再生的障碍，并努力逆转这种再生的障碍。研究分两部分，第一部分研究发现，出生后3天的Bcl－2转基因小鼠在视神经夹闭损伤后24小时，即可见到视神经轴突的再生，4天后再生的视神经轴突长入脑内的靶组织，可见抗凋亡基因Bcl－2是关键的神经再生内在因子；第二部分研究发现，成熟的神经胶质细胞是抑制中枢神经系统损伤后再生的关键的外部因素。由上述研究他们得出结论：出生后Bcl－2基因的下调和损伤后神经胶质瘢痕的形成是导致中枢神经系统再生能力丧失的关键因素。

国际青光眼协会主席Wright评论说：“这一研究结果将对由于青光眼和其他视神经损伤所致的视力损害或盲目带来革命性的治疗技术。”

视网膜再生、视神经修复不是梦！台多功能干细胞技术露曙光

干细胞疗法又有一项新突破！花莲慈济医院眼科研究中心，历经三年多的时间，利用自体且取得容易的少量血液与皮肤的体细胞，成功分化成人类诱导性多功能干细胞（iPS）；再分化为「视网膜色素上皮细胞」、「感光细胞」与「视网膜节细胞」。未来可望修复视网膜病变及视神经受损，为失明患者带来重见光明的希望，而这项创新研究也发表在2019年国际学术期刊《Cells》中。

花莲慈济医院眼科研究中心蔡荣坤（前排左二），带领研究团队，历经三年多的时间，利用人类诱导性多功能干细胞（iPS），再分化为「视网膜色素上皮细胞」、「感光细胞」与「视网膜节细胞」，可望修复视网膜病变及视神经受损，为失明患者带来重见光明的希望。（图片／花莲慈济医院眼科研究中心提供）

黄斑部病变是老年人失明第一大主因　过往治疗效果有限

台湾65岁以上的人口中，约有10 %罹患老年性黄斑部病变，其中约有30%患者会随着病程，视网膜及感光细胞产生不可逆的退化，是老年人失明的第一大主因。

花莲慈济医院眼科研究中心主任蔡荣坤医师表示，目前临床针对上述患者，治疗方式主要为眼内注射抗血管新生药物，来帮助抑制血管新生，病人需面临每1-3个月反复注射的压力。可上述疗程对于已经发生严重视网膜损坏及感光细胞萎缩的病人，效果相当有限，且至今尚无有效治疗方式问世。

蔡荣坤医师指出，事实上人体眼睛的视网膜，就像照相机的底片一般，主要用来感光，感光后会将影像传往脑部。而黄斑部就位在视网膜的中央，所谓的出血性老年性黄斑部病变，就是因为在色素上皮层退化而长出新生血管，产生水肿、出血等现象，导致看东西扭曲变形，视野中央出现黑影的现象。可偏偏过去的治疗方式，都没办法真正的根治黄斑部病变。

干细胞技术新突破！台研究团队成功制造再生视网膜，将展开动物实验

但值得庆幸的是，随着干细胞技术的进步，多功能干细胞（iPS）让治疗出现了新希望！蔡荣坤医师表示，花莲慈济医院眼科研究中心花了3年多的时间，利用自体且取得容易的少量血液与皮肤的体细胞，成功地分化成诱导性多功能干细胞（iPS），再分化为「视网膜色素上皮细胞」、「感光细胞」与「视网膜节细胞」。

干细胞视神经再生有突破吗

目前尚无使用于临床的案例，也没有适用于临床的实验，大多还停留在基础实验阶段，即实验室阶段，但相信不久的将来，一定会有相关技术适用于临床，希望鉴定信念，保持健康，问题总会解决！

「眼盲」让生活、事业全停摆！干细胞让人生重见光明

近日，数名竹科公司主管因高压及长期用眼，接连出现严重眼疾，像是青光眼、眼中风，甚至失去了视力。「看不见」让不少正值事业起飞、甚至高峰的人被迫提早退休，甚至无法掌握生活的自理能力。然而，恢复视力是目前医疗技术迟迟无法突破的困境，如何治疗受损视力，成了全球都迫切寻求的技术。

干细胞治疗为视障带来新希望

传统的治疗方式在对抗严重视力问题上已遇瓶颈，医疗研究也一直在寻求新的突破，现在，利用干细胞作为眼睛疾病治疗有了突破，带给视障人士重见世界的希望。

今（2019）年在国际学术期刊《Cells》中，就报导有团队使用iPS干细胞，尝试治疗视网膜退化与视神经萎缩病人。除此之外，还成功培育出「视网膜节细胞」，未来可望应用在青光眼合并视神经萎缩患者。

健众细胞生医的技术长张薏雯博士表示，治疗视力损伤的干细胞技术，美国的MD干细胞治愈研究所是全世界顶尖，该研究所的医师Jeffrey N. Weiss也曾经到台湾来担任客座教授，其中也多次与张薏雯所带领的科研团队交流细胞治疗视力的未来应用机会。

帮受损细胞「换电池」恢复视力

「其实，许多的眼睛疾病，都始于末梢细胞的异常老化，细胞加速老化后，就会引发眼球的坏死，进而影响视力。」张薏雯分析。目前普遍的医疗技术没办法让细胞「返老还童」，也因此没有办法解决视力受损的问题。

但是，现在已经有实验发现，若是施打间充质干细胞到体内，这些干细胞会修复损坏细胞的「粒线体」，预防后续的并发症。「用比较形象化的方式来说，这些受损细胞的『电池』出现问题了，而打进来的干细胞，可以帮这些细胞换电池，一旦供电正常了，细胞变正常，视力自然就得以恢复了。」张薏雯表示。

图说：干细胞帮受损细胞换电池/照片档 ID：925167678/照片档 ID：538667264 64.7% 患者改善了双眼视力

治疗眼睛疾病的干细胞技术已经越来越发达，除了青光眼，包括黄斑部病变、视网膜色素病变、斯特格氏症、视网膜萎缩，都已经有相关的临床研究出炉，甚至已经进入了人体实验。

以MD干细胞治愈研究所为例，已经证实了骨髓干细胞治疗眼睛疾病后，64.7%患者都改善了双眼视力。张薏雯表示，各方面证据都显示，干细胞治疗是可行、且非常有前景的方式。未来，视力受损不再是一条「不归路」。

再生医学(十七)：干细胞怎么修复灵魂之窗？

眼睛是灵魂之窗，是由充满透明凝胶的物质的水晶体和虹膜、视网膜、视神经等组织构成的器官，可以接受光线在大脑形成物体影像。当视力相关的组织受损时，会对视觉产生不良影响。

视力退化的原因

随着老化，白内障、青光眼、黄斑部病变的眼科疾病，也随之而来；白内障是患者因老化造成的水晶体混浊；青光眼是房水屯积在眼内不能排出，令眼压增高及视觉神经细胞逐渐死亡。

而黄斑部病变是指视网膜中央区的黄斑部区域，感光功能的视网膜色素上皮细胞出现病变。以上3种眼科疾病，是老年人失明的主要病因，不可逆的视网膜和视神经退化会导致视功能严重损伤甚至致盲。

干细胞修复眼睛的优势

眼部组织需要移植的干细胞数量需求少、手术伤口相对小、排斥反应轻、手术操作及评估较简便，且另一眼可以对照术后复原的状况。因此，干细胞修复眼睛的基础医学和临床研究都进展的非常迅速，干细胞治疗眼部疾病已经成为国际间再生医学的主流发展之一。

干细胞怎么修复灵魂之窗？

关于眼科疾病，在美国约有25个干细胞移植的临床试验，在美国以外的有29个，主要集中在黄斑部病变、视网膜色素变性(RP)等研究，大部分尚处在1或2期临床试验阶段。

治疗白内障：过去治疗白内障的方式是更换人工水晶体，而加州大学圣地牙哥分校(University of California, San Diego)，帮助12名2岁以下的先天白内障婴幼儿，恢复视力。研究团队先利用微创手术去除水晶体混浊的部分，并让水晶体囊袋(lens capsule)保持完整。

因为水晶体囊袋有上皮干细胞，水晶体会自行再生，一个月后婴幼儿的微创切口愈合，健康的新水晶体如预期重新长出，没有出现任何并发症，且与其他治疗法相较之下，视线改善了20倍以上。研究团队也正在改良此项技术，希望未来可应用在成人及老年患者身上。

治疗青光眼：之前的许多研究已经发现间质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSC)能够保护视网膜神经细胞。而视网膜神经细胞及其轴突的损伤，是导致退化性眼科疾病的原因之一。

而国国家眼科研究所（NEI）的科学家发现，利用exosomes的干细胞分泌物，注射至有青光眼大鼠的玻璃体中，发现接受注射治疗的大鼠，视网膜神经节细胞只损伤了33%左右，同时治疗鼠存活的神经细胞仍然完好可发挥功用，而未受治疗的大鼠90%细胞都受损了。目前，此一疗法正在申请临床研究中。

治疗黄斑部病变：英国伦敦摩菲眼科医院，将胚胎干细胞转化为构成视网膜色素上皮的细胞，并做成一个厚度约40微米，长6毫米，宽4毫米的贴片，在经过2个小时的手术，把这种贴片植入视网膜色素上皮细胞中，来治疗2位因黄斑部病变而快要失明的老年患者，在接受手术后，虽然无法达到痊愈的状态，但已能恢复患者的视力到看得见的程度。