干细胞免疫调节能力实验（干细胞免疫调节能力实验视频）

本文目录一览：

• 1、恒峰干细胞做抗衰老美容产品的原理是苹果手机零下几度会冻坏什么？
• 2、细胞的功能作用
• 3、关于细胞生物学术论文
• 4、干细胞生物学的免疫溶解法的分离步骤

恒峰干细胞做抗衰老美容产品的原理是什么？

干细胞抗衰老属于医学抗衰范畴，医学上认为的衰老是身体机能的衰老，包括免疫力下降、身体炎症导致的包含面部的各种问题等

一般抗衰老的方法

1、身体是健康的，有病治病，没病防病

2、生活习惯，健康饮食、少熬夜、多运动

3、日常护理，你可以理解为饮食、运动加你日常的面部清洁、补水、眼霜、防晒都是，所以别问什么方法好了角质层薄的脸部护理，少熬一次夜比啥都好。

干细胞抗衰原理与效果也要分几个层面来说

市场现有的方法一是nk等免疫细胞回输，医学认为人体衰老是因为细胞减少、活性的降低而导致的炎症等，免疫细胞能清除或者修复不好的细胞，提高细胞活性从而提高身体免疫力和代谢性疾病，这个角度你理解为调理身体机能和免疫力的基层抗衰，原理上来说是最有效和长期的

第二个层面就是我们理解的常规面部了，细胞类护肤品直接面部导入，修复损伤面部，和你常规美容院的方式相同，只是所导入的产品是细胞类，作用机制更好

第三个是日常护理，大家提真正的细胞类产品更有效，有点复杂了，你理解为综合用肯定是效果好的。这点来说国、内外是没有区别的，细胞技术相当，剩下的就是生活自律了

细胞的功能作用

细胞的功能作用

细胞的功能作用，细胞是构成人体的最基本的结构和功能单位。每种细胞分布于机体的特定部位，执行特殊的功能。干细胞，临床上可以治疗多种疾病，细胞的功能作用有哪些？

细胞的功能作用1

作用

细胞作为代谢与功能的基本单位,执行与完成生命有机体的各种特定的功能.这里主要讨论细胞的物质运输、能量转换、信息转导、细胞识别、细胞支持与运动和细胞消化与防御等功能。血红细胞有携带氧气的功能；

神经细胞有传导兴奋的作用；

淋巴细胞有免疫的作用；

体液中的吞噬细胞有消灭抗原的作用；

肌细胞有运动的作用；

植物的叶肉细胞可以进行挂光合作用合成有机物；

干细胞有分化出新细胞的作用；

表皮细胞有保护组织的作用；

视网膜细胞有感光作用。

它（人体细胞）是人体的结构和功能的基本单位。共约有40万亿--60万亿个，细胞的平均直径在10--20微米之间。除成熟的红血球和血小板外，所有细胞都有至少一个细胞核，是调节细胞生命活动、控制分裂、分化的遗传控制中心。人体细胞中最大的是成熟的卵细胞，直径在200微米左右；最小的是血小板，直径只有约2微米。

细胞的功能作用2

细胞的基本功能包括：细胞膜的物质转运、细胞的信号转导、细胞膜的生物电现象和肌细胞的收缩。

一、细胞膜的物质转运功能

细胞新陈代谢过程中，需要不断选择性的通过细胞膜摄入和排出某些物质。物质的跨膜转移途径有：

（1）单纯扩散：是一种简单的物理扩散，即脂溶性高和分子量小的物质从膜的高浓度一侧向低浓度一侧跨膜运动。扩散的方向和速度取决于物质在膜两侧的浓度差和膜对该物质的通透性。

浓度差越大，通透性越高，则单位时间内物质扩散的量就越多。

扩散的最终结果是使该物质在膜两侧浓度达到平衡。

（2）经载体和通道膜蛋白介导的易化扩散：带电离子和水溶性分子的跨膜转运需要膜蛋白的介导，其中经载体和通道蛋白介导的易化扩散属于被动转运，是物质顺浓度梯度或电位梯度进行的跨膜转运，不需要消耗能量。

（3）主动转运：是由离子泵和转运体膜蛋白组介导的消耗能量、逆浓度梯度和/或电位梯度的跨膜转运，分为原发性主动转运和继发性主动转运。

二、细胞的跨膜信号转导

调节机体内各种细胞在时间和空间上有序的增值及分化，协调它们的代谢、功能和行为，主要是通过细胞间数百种信号物质实现的。

这些信号物质包括激素、神经递质和细胞因子等，根据细胞膜感受信号物质受体蛋白结构和功能特性，跨膜信号转导的路径大致分为G蛋白耦联受体、离子通道受体介导的信号转导和酶偶联受体介导的信号转导三类。

三、细胞的生物电现象

（1）静息电位：

静息电位是指细胞在未受到刺激时存在于细胞膜内外侧的电镀电位差。安静状态下，细胞膜对各种离子的通透性以钾离子为最高，细胞膜中存在持续开放的非门控钾通道，因此静息电位就相当于钾离子平衡电位。

（2）动作电位：

在静息电位基础上接受有效刺激后产生的一个迅速的可向远处传播的膜电位波动，称为动作电位。

四、肌细胞的收缩

（1）神经-骨骼肌接头的兴奋传递：运动神经末梢与肌细胞特殊分化的动脉膜构成神经—肌接头。

（2）骨骼肌的收缩

（3）骨骼肌兴奋-收缩耦联的基本过程：将肌细胞膜上的电兴奋与胞内机械性收缩过程联系起来的中介机制称为兴奋—收缩偶联。

细胞的功能作用3

干细胞能做到修复身体的八大功能

1、干细胞修复呼吸系统功能

呼吸系统是执行机体和外界进行气体交换的器官的总称，主要功能是与外界进行气体交换，呼出二氧化碳，吸进氧气，进行新陈代谢。

干细胞可以分化出人体呼吸系统的各种功能细胞，如肺泡细胞、成纤维细胞、毛细血管细胞、支气管细胞等，新生的这些功能细胞可以替换掉坏死病变的细胞，恢复气管、支气管，肺部的功能，进而恢复呼吸系统的正常生理结构和功能。

2、干细胞调理消化系统

消化系统由消化道和消化腺两大部分组成。消化管包括口腔、咽、食道、胃、小肠(十二指肠、空肠、回肠)和大肠(盲肠、阑尾、结肠、直肠、肛管)等部。

消化系统的基本生理功能是摄取、转运、消化食物和吸收营养、排泄废物，提供机体所需的物质和能量。

干细胞可以分化出消化系统的各种功能细胞，如胃肠道、肝脏的各种功能细胞，新生的这些功能细胞可以替换掉坏死病变的细胞，恢复人体消化道及消化腺的正常生理结构和功能。

3、干细胞保护血液循环系统

血液循环系统是血液在体内流动的通道，由血液、血管和心脏组成。血液循环系统的功能是输送所有营养物质到每一个细胞中，再将细胞代谢的废物输入血液。

血液循环系统内的功能细胞很容易受到损伤，我们常常听说的高血压，就是由于血液循环系统的功能细胞出现了问题，从而导致血液循环系统出现问题产生的。易被高血压引发的冠心病、心肌梗塞等心脑血管疾病可以说都是由于血液循环系统内的功能细胞受损导致的。

干细胞是人体中的种子细胞，它可以分化出人体内所有细胞，包括组成血液循环系统的功能细胞在内。

输入体内的年轻、健康的干细胞可以分化出构成血液循环系统的全部细胞，替换病变、坏死细胞，逐渐恢复血液、心脏正常生理结构和功能，保护血液循环系统，且在预防、治疗冠心病、心肌梗塞等疾病时都有绝佳的效果。

4、干细胞改善内分泌系统

内分泌系统由内分泌腺和分布于其他外泌体文献检索报告器官的内分泌细胞组成，人体生理活动的调节，除了受神经系统的调控，还受到内分泌系统器官分泌的激素调节。

内分泌疾病的发生，是由于内分泌腺发生病变所致，内分泌系统出现问题，可以引发甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退症、肾上腺皮质功能减退症、肾上腺皮质功能亢进症、髓质疾病等各种疾病，女性易引起更年期综合征、卵 巢早衰、多囊卵巢等，男性易引起性腺功能减退症等。

干细胞可以分化出人体内分泌系统的各种功能细胞，如甲状腺滤泡上皮细胞，肾上腺上皮细胞，肾上腺素细胞等，新生的这些功能细胞可以替换掉坏死病变的细胞，恢复人体甲状腺激素、肾上腺激素、垂体激素等正常分泌，恢复内分泌系统与神经系统、免疫系统相互调节，共同维持机体的正常状态。

5、干细胞修复神经系统

神经系统由神经细胞组成，主要包括脑和脊髓两大器官。神经细胞的功能是通过接受、整合、传导和输出信息实现信息交换，也就是说，神经细胞在人体中的作用，就是产生人类各种心理活动与控制自身行为。

因此，当人的脑和脊髓受到重大损伤，神经细胞遭到严重破坏，人们就会失去自由活动的能力，造成瘫痪、帕金森等，也会失去对情绪的把握能力，导致自闭症、老年痴呆等。

神经干细胞是干细胞族群中具有分化出神经细胞能力的一类，它可以分化出人体中所有神经细胞。

神经干细胞可以聚集在组织损伤部位，修复及补充损伤的神经细胞，还可以分泌许多营养因子，促进损伤细胞的修复。最后，神经干细胞还可以增强神经突触之间的'联系，建立新的神经环路。

由此可见，神经干细胞是神经系统形成和发育的源泉，因神经细胞没有再生能力，所以传统的吃药等方法只可暂时性缓解神经系统出现问题后的症状，一旦停药，病症将会复发甚至更加严重。而常年服药不仅会让患者痛苦不堪，还会对身体造成极大损害，甚至引起其他疾病并发。

6、干细胞保护运动系统

运动系统由骨、骨连结和骨骼肌三种器官组成。

人体的老化是不可抗拒的自然规律，人体的各个器官系统几乎是同步老化的，人老化以后，各个器官系统可以出现一定程度的功能下降，甚至某些人还可以出现相应的老年疾病和相应症状。

随着年龄的增长，骨关节由于运动磨损不可避免地会出现退行性改变，这是一种正常的老化表现。年龄增加意味着“磨损”的增加，这就像人老了脸上会长皱纹、头发会变白、眼睛会变老花一样，运动系统的老化的表现可能是前文提过的椎间盘的退变，以及以后出现的腰椎骨刺等。这是一种自然现象，是人体正常新陈代谢的规律。

干细胞在运动系统中，可以分化出年轻、健康的骨细胞、成骨细胞、破骨细胞等骨组织需要的所有细胞，同时刺激肌肉细胞、骨细胞生长，减轻骨骼系统疲劳，增强机体控制能力，保持骨骼肌肉的运动能力，使肌肉变得有力，腰膝酸软疼痛症状减轻，恢复骨骼青春活力。

7、干细胞调整泌尿系统

泌尿系统由肾脏、输尿管、膀胱及尿道组成。其主要功能为排泄。

干细胞可以分化出人体泌尿系统的各种功能细胞，如肾小球内的扁平细胞、足细胞、系膜细胞等，新生的这些功能细胞可以替换掉坏死病变的细胞，恢复肾小球的滤过功能和肾小管的重吸收功能，进而恢复泌尿系统的正常生理结构和功能。

8、干细胞改善生殖系统

生殖系统是生物体内的和生殖密切相关的器官成分的总称。生殖系统的功能是产生生殖细胞，繁殖新个体，分泌性激素和维持副性征。

干细胞凭借其优秀的自我复制能力和多向分化潜能成为医学界炙手可热的新。

干细胞 给全身系统全面保障

干细胞凭借其优秀的自我复制能力和多向分化潜能成为医学界炙手可热的新。

干细胞理论的日臻完善和技术的迅猛发展已在疾病治疗和生物医药等领域产生划时代的成果，是对传统医疗手段和医疗观念的一场重大革命。

关于细胞生物学术论文

细胞生物是指所有具有细胞结构的生物。这是我为大家整理的关于细胞生物学术论文，仅供参考!

关于细胞生物学术论文篇一

细胞因子的生物学活性

关键字： 细胞因子

细胞因子具有非常广泛的生物学活性，包括促进靶细胞的增殖和分化，增强抗感染和细胞杀伤效应，促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达，促进炎症过程，影响细胞代谢等。

一、免疫细胞的调节剂

免疫细胞之间存在错综复杂的调节关系，细胞因子是传递这种调节信号必不可少的信息分子。例如在T-B细胞之间，T细胞产生IL-2、4、5、6、10、13，干扰素γ等细胞因子刺激B细胞的分化、增殖和抗体产生;而B细胞又可产生IL-12调节TH1细胞活性和TC细胞活性。在单核巨噬细胞与淋巴细胞之间，前者产生IL-1、6、8、10，干扰素α，TNF-α等细胞因子促进或抑制T、B、NK细胞功能;而淋巴细胞又产生IL-2、6、10，干扰素γ，GM-CSF，巨噬细胞移动抑制因子(MIF)等细胞因子调节单核巨噬细胞的功能。许多免疫细胞还可通过分泌细胞因子产生自身调节单核巨噬细胞的功能。许多免疫细胞还可通过分泌细胞因子产生自身调节作用。例如T细胞产生的IL-2可刺激T细胞的IL-2受体表达和进一步的IL-2分泌，TH1细胞通过产生干扰素γ抑TH2细胞的细胞因子产生。而TH2细胞又通过IL-10、IL-4和IL-13抑制TH1细胞的细胞因子产生。通过研究细胞因子的免疫 网络调节，可以更好地理解完整的免疫系统调节机制，并且有助于指导细胞因子做为生物应答调节剂(biologicalresponsemodifier’BRM)应用于临床 治疗免疫性疾病。图4-1 细胞因子与TH1、TH2的相互关系(略)

二、免疫效应分子

在免疫细胞针对抗原(特别是细胞性抗原)行使免疫效应功能时，细胞因子是其中重要效应分子之一。例如TNFα和TNFβ可直接造成肿瘤细胞的凋零(apoptosis)’使瘤细胞DNA断裂’细胞萎缩死亡;干扰素α、β、γ可干扰各种病毒在细胞内的复制，从而防止病毒扩散;LIF可直接作用于某些髓性白血病细胞，使其分化为单核细胞，丧失恶性增殖特性。另有一些细胞因子通过激活效应细胞而发挥其功能，如IL-2和IL-12刺激NK细胞与TC细胞的杀肿瘤细胞活性。与抗体和补体等其它免疫效应分子相比，细胞因子的免疫效应功能，因而在抗肿瘤、抗细胞内寄生感染、移植排斥等功能中起重要作用。

三、造血细胞刺激剂

从多能造血干细胞到成熟免疫细胞的分化发育漫长道路中，几乎每一阶段都需要有细胞因子的参与。最初研究造血干细胞是从软琼脂的半固体培养基开始的，在这种培养基中，造血干细胞分化增殖产生的大量子代细胞由于不能扩散而形成细胞簇，称之为集落，而一些刺激造血干细胞的细胞因子可明显刺激这些集落的数量和大小因而命名为集落刺激因子(CSF)。根据它们刺激的造血细胞种类不同有不同的命名，如GM-CSF、G-CSF、M-CSF、multi-CSF(IL-3)等。目前的研究表明，CSF和IL-3是作用于粒细胞系造血细胞，M-CSF作用于单核系造血细胞，此外Epo作用于红系造血细胞，IL-7作用于淋巴系造血细胞，IL-6、IL-11作用于巨核造血细胞等等。由此构成了细胞因子对造血系统的庞大控制 网络。某种细胞因子缺陷就可能导致相应细胞的缺陷，如肾性贫血病人的发病就是肾产生Epo的缺陷所致，正因如此，应用Epo 治疗这一疾病收到非常好的效果。目前多种刺激造血的细胞因子已成功地用于临床血液病，有非常好的 发展前景。

四、炎症反应的促进剂

炎症是机体对外来刺激产生的一种病理反应过程，症状表现为局部的红肿热痛，病理检查可发现有大量炎症细胞如粒细胞、巨噬细胞的局部浸润和组织坏死，在这一过程中，一些细胞因子起到重要的促进作用，如IL-1、IL-6、IL-8、TNFα等可促进炎症细胞的聚集、活化和炎症介质的释放’可直接刺激发热中枢引起全身发烧’IL-8同时还可趋化中性粒细胞到炎症部位’加重炎症症状.在许多炎症性疾病中都可检测到上述细胞因子的水平升高.用某些细胞因子给动物注射’可直接诱导某些炎症现象’这些实验充分证明细胞因子在炎症过程中的重要作用.基于上述理论研究结果’目前已开始利用细胞因子抑制剂治疗炎症性疾病’例如利用IL-1的受体拮抗剂(IL-1receptor antagonist’IL-lra)和抗TNFα抗体治疗败血性休克、类风湿关节炎等，已收到初步疗效。

五、其它

许多细胞因子除参与免疫系统的调节效应功能外，还参与非免疫系统的一些功能。例如IL-8具有促进新生血管形成的作用;M-CSF可降低血胆固醇IL-1刺激破骨细胞、软骨细胞的生长;IL-6促进肝细胞产生急性期蛋白等。这些作用为免疫系统与其它系统之间的相互调节提供了新的证据。

关于细胞生物学术论文篇二

细胞衰老的分子生物学机制

摘要：细胞衰老(cellular aging)是细胞在其生命过程中发育到成熟后，随着时间的增加所发生的在形态结果和功能方面出现的一系列慢性进行性、退化性的变化。细胞衰老是基因与环境共同作用的结果，是细胞生命活动过程的客观规律。为研究细胞衰老分子生物学机制，本文就此展开研究。

关键词：细胞衰老;分子生物学;机制研究

细胞的衰老和死亡与个体的衰老和死亡是两个不同的概念，个体的衰老并不等于所有细胞的衰老，但是细胞的衰老又是同个体的衰老紧密相关的。细胞衰老是个体衰老的基础，个体衰老是细胞普遍衰老的过程和结果。

细胞衰老是正常环境条件下发生的功能减退，逐渐趋向死亡的现象。衰老是生界的普遍规律，细胞作为生物有机体的基本单位，也在不断地新生和衰老死亡。生物体内的绝大多数细胞，都要经过增殖、分化、衰老、死亡等几个阶段。可见细胞的衰老和死亡也是一种正常的生命现象。我们知道，生物体内每时每刻都有细胞在衰老、死亡，同时又有新增殖的细胞来代替它们。

衰老是一个过程，这一过程的长短即细胞的寿命，它随组织种类而不同，同时也受环境条件的影响。高等动物体细胞都有最大增殖能力(分裂)次数，细胞分裂一旦达到这一次数就要死亡。各种动物的细胞最大裂次数各不相同，人体细胞为50～60次。一般说来，细胞最大分裂次数与动物的平均寿命成正比。通过细胞衰老的研究可了解衰老的某些规律，对认识衰老和最终找到延缓或推迟衰老的方法都有重要意义。细胞衰老问题不仅是一个重大的生物学问题，而且是一个重大的社会问题。随着科学发展而不断阐明衰老过程，人类的平均寿命也将不断延长。但也会出现相应的社会老龄化问题以及呼吸系统疾病、心血管系统疾病、脑血管病、癌症、关节炎等老年性疾病发病率上升的问题。因此衰老问题的研究是今后生命科学研究中的一个重要课题。

1 细胞衰老的特征

科学研究表明，衰老细胞的细胞核、细胞质和细胞膜等均有明显的变化：①细胞内水分减少，体积变小，新陈代谢速度减慢;②细胞内酶的活性降低;③细胞内的色素会积累;④细胞内呼吸速度减慢，细胞核体积增大，核膜内折，染色质收缩，颜色加深。线粒体数量减少，体积增大;⑤细胞膜通透性功能改变，使物质运输功能降低。形态变化总体来说老化细胞的各种结构呈退行性变化。

衰老细胞的形态变化表现有：①核：增大、染色深、核内有包含物;②染色质：凝聚、固缩、碎裂、溶解;③质膜：粘度增加、流动性降低;④细胞质：色素积聚、空泡形成;⑤线粒体：数目减少、体积增大;⑥高尔基体：碎裂;⑦尼氏体：消失;⑧包含物：糖原减少、脂肪积聚;⑨核膜：内陷。

2 分子水平的变化

①从总体上DNA复制与转录在细胞衰老时均受抑制，但也有个别基因会异常激活，端粒DNA丢失，线粒体DNA特异性缺失，DNA氧化、断裂、缺失和交联，甲基化程度降低;②mRNA和tRNA含量降低;③蛋白质含成下降，细胞内蛋白质发生糖基化、氨甲酰化、脱氨基等修饰反应，导致蛋白质稳定性、抗原性，可消化性下降，自由基使蛋白质肽断裂，交联而变性。氨基酸由左旋变为右旋;④酶分子活性中心被氧化，金属离子Ca2+、Zn2+、Mg2+、Fe2+等丢失，酶分子的二级结构，溶解度，等电点发生改变，总的效应是酶失活;⑤不饱和脂肪酸被氧化，引起膜脂之间或与脂蛋白之间交联，膜的流动性降低。

3 细胞衰老原因

迄今为止，细胞衰老的本质尚未完全阐明，难以给明确的定义，只能根据现有的认识，从不同的角度概括细胞衰老的内涵。细胞衰老是各种细胞成分在受到内外环境的损伤作用后，因缺乏完善的修复，使“差错”积累，导致细胞衰老。根据对导致“差错”的主要因子和主导因子的认识不同，可分为不同的学说，这些学说各有其理论基础和实验证据[1]。

3.1差错学派 有以下七种学说，有代谢废物积累学说、大分子交联学说、自由基学说、体细胞突变学说、DNA损伤修复学说、端粒学说、生物分子自然交联说等。其中最主要的自由基学说和端粒学说。

3.1.1自由基学说 自由基是一类瞬时形成的含不成对电子的原子或功能基团，普遍存在于生物系统。其种类多、数量大，是活性极高的过渡态中间产物。正常细胞内存在清除自由基的防御系统，包括酶系统和非酶系统。前者如：超氧化物歧化酶(SOD)，过氧化氢酶(CAT)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)，非酶系统有维生素E，醌类物质等电子受体。机体通过生物氧化反应为组织细胞生命活动提供能量，同时在此过程中也会产生大量活性自由基。自由基的化学性质活泼，可攻击生物体内的DNA、蛋白质和脂类等大分子物质，造成损伤，如DNA的断裂、交联、碱基羟基化。实验表明DNA中OH8dG(8-羟基-2‘-脱氧鸟苷)随着年龄的增加而增加。OH8dG完全失去碱基配对特异性，不仅OH8dG被错读，与之相邻的胞嘧啶也被错误复制。大量实验证明实，超氧化物岐化酶与抗氧化酶的活性升高能延缓机体的衰老。Sohal等(1994、1995)，将超氧化物岐化酶与过氧化氢酶基因导入果蝇，使转基因株比野生型这两种酶基因多一个拷贝，结果转基因株中酶活性显著升高，平均年龄和最高寿限有所延长。

英国学者提出的自由基理论认为自由基攻击生命大分子造成组织细胞损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要起因。自由基就是一些具有不配对电子的氧分子，它们在机体内漫游，损伤任何于其接触的细胞和组织，直到遇到如维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、OPC(原花青素)之类的生物黄酮等抗氧化剂将其中和掉或被机体产生的一些酶(如SOD)将其捕获。自由基可破坏胶原蛋白及其它结缔组织，干扰重要的生理过程，引起细胞的DNA突变。此外还可引起器官组织细胞的破坏与减少[2]。例如神经元细胞数量的明显减少，是引起老年人感觉与记忆力下降、动作迟钝及智力障碍的又一重要原因。器官组织细胞破坏或减少主要是由于自由基因突变改变了遗传信息的传递，导致蛋白质与酶的合成错误以及酶活性的降低。这些的积累，造成了器官组织细胞的老化与死亡。

生物膜上的不饱和脂肪酸易受自由基的侵袭发生过氧化反应，氧化作用对衰老有重要的影响，自由基通过对脂质的侵袭加速了细胞的衰老进程[3]。 自由基作用于免疫系统，或作用于淋巴细胞使其受损，引起老年人细胞免疫与体液免疫功能减弱，并使免疫识别力下降出现自身免疫性疾病。

3.1.2端粒学说 染色体两端有端粒，细胞分裂次数多，端粒向内延伸，正常DNA受损。

3.2遗传学派 认为衰老是遗传决定的自然演进过程，一切细胞均有内在的预定程序决定其寿命，而细胞寿命又决定种属寿命的差异，而外部因素只能使细胞寿命在限定范围内变动。

参考文献：

[1]郭齐，李玉森，陈强，等.脱氧核苷酸钠抗人肾脏细胞衰老的分子机制[J].中国老年学杂志，2013，33(15)：3688-3690.

[2]胡玉萍，吴建平.细胞衰老与相关基因的关系[J].中外健康文摘，2012，09(14)：35-37.

[3]孔德松，魏东华，张峰，等.肝纤维化进程中细胞衰老的作用及相关机制的研究进展[J].中国药理学与毒理学杂志，2012，26(05)：688-691.

干细胞生物学的免疫溶解法的分离步骤

1.根据分子大小不同进行分离纯化

蛋白质是一种大分子物质,并且不同蛋白质的分子大小不同,因此可以利用一些较简单的方法使蛋白质和小分子物质分开,并使蛋白质混合物也得到分离.根据蛋白质分子大小不同进行分离的方法主要有透析、超滤、离心和凝胶过滤等.透析和超滤是分离蛋白质时常用的方法.透析是将待分离的混合物放入半透膜制成的透析袋中,再浸入透析液进行分离.超滤是利用离心力或压力强行使水和其它小分子通过半透膜,而蛋白质被截留在半透膜上的过程.这两种方法都可以将蛋白质大分子与以无机盐为主的小分子分开.它们经常和盐析、盐溶方法联合使用,在进行盐析或盐溶后可以利用这两种方法除去引入的无机盐.由于超滤过程中,滤膜表面容易被吸附的蛋白质堵塞,以致超滤速度减慢,截流物质的分子量也越来越小.所以在使用超滤方法时要选择合适的滤膜,也可以选择切向流过滤得到更理想的效果

离心也是经常和其它方法联合使用的一种分离蛋白质的方法.当蛋白质和杂质的溶解度不同时可以利用离心的方法将它们分开.例如,在从大米渣中提取蛋白质的实验中,加入纤维素酶和α-淀粉酶进行预处理后,再用离心的方法将有用物质与分解掉的杂质进行初步分离[3].使蛋白质在具有密度梯度的介质中离心的方法称为密度梯度(区带)离心.常用的密度梯度有蔗糖梯度、聚蔗糖梯度和其它合成材料的密度梯度.可以根据所需密度和渗透压的范围选择合适的密度梯度.密度梯度离心曾用于纯化苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白,得到的产品纯度高但产量偏低.蒋辰等[6]通过比较不同密度梯度介质的分离效果,利用溴化钠密度梯度得到了高纯度的苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白.凝胶过滤也称凝胶渗透层析,是根据蛋白质分子大小不同分离蛋白质最有效的方法之一.凝胶过滤的原理是当不同蛋白质流经凝胶层析柱时,比凝胶珠孔径大的分子不能进入珠内网状结构,而被排阻在凝胶珠之外,随着溶剂在凝胶珠之间的空隙向下运动并最先流出柱外;反之,比凝胶珠孔径小的分子后流出柱外.目前常用的凝胶有交联葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶和琼脂糖凝胶等.在甘露糖蛋白提纯的过程中使用凝胶过滤方法可以得到很好的效果,纯度鉴定证明产品为分子量约为32 kDa、成分是多糖∶蛋白质(88∶12)、多糖为甘露糖的单一均匀糖蛋白[1].凝胶过滤在抗凝血蛋白的提取过程中也被用来除去大多数杂蛋白及小分子的杂质[7].

2.根据溶解度不同进行分离纯化

影响蛋白质溶解度的外部条件有很多,比如溶液的pH值、离子强度、介电常数和温度等.但在同一条件下,不同的蛋白质因其分子结构的不同而有不同的溶解度,根据蛋白质分子结构的特点,适当地改变外部条件,就可以选择性地控制蛋白质混合物中某一成分的溶解度,达到分离纯化蛋白质的目的.常用的方法有等电点沉淀和pH值调节、蛋白质的盐溶和盐析、有机溶剂法、双水相萃取法、反胶团萃取法等.

等电点沉淀和pH值调节是最常用的方法.每种蛋白质都有自己的等电点,而且在等电点时溶解度最低;相反,有些蛋白质在一定pH值时很容易溶解.因而可以通过调节溶液的pH值来分离纯化蛋白质.王洪新等[8]研究茶叶蛋白质提取过程发现,pH值为时茶叶蛋白提取效果最好,提取率达到36·8%,初步纯化得率为91·0%.李殿宝[9]在从葵花脱脂粕中提取蛋白质时将蛋白溶液的pH值调到3~4,使目标蛋白于等电点沉淀出来.等电点沉淀法还应用于葡萄籽中蛋白质的提取.李凤英等[10]测得葡萄籽蛋白质的等电点为3·8.他们利用碱溶法提取葡萄籽蛋白质,得到了最佳的提取工艺为:以1×10-5mol·L-1的NaOH溶液,按1∶5的料液比,在40℃搅拌40 min,葡萄籽蛋白质提取率达73·78%.另外还可以利用碱法提取大米蛋白,其持水性、吸油性和起泡性等均优于酶法提取[11].利用酸法提取得到的鲢鱼鱼肉蛋白质无腥味、色泽洁白,蛋白质产率高达90%[12].

蛋白质的盐溶和盐析是中性盐显著影响球状蛋白质溶解度的现象,其中,增加蛋白质溶解度的现象称盐溶,反之为盐析.应当指出,同样浓度的二价离子中性盐,如MgCl2、(NH4)2SO4对蛋白质溶解度影响的效果,要比一价离子中性盐如NaCl、NH4Cl大得多.在葡萄籽蛋白提取工艺中除了可以利用碱溶法还可以利用盐溶法来提取蛋白质,其最佳提取工艺是:以10%NaCl溶液,按1∶25的料液比,在30℃搅拌提取30min,蛋白质提取率为57·25%[10].盐析是提取血液中免疫球蛋白的常用方法,如多聚磷酸钠絮凝法、硫酸铵盐析法,其中硫酸铵盐析法广泛应用于生产.由于硫酸铵在水中呈酸性,为防止其对蛋白质的破坏,应用氨水调pH值至中性.为防止不同分子之间产生共沉淀现象,蛋白质样品的含量一般控制在0·2% ~2·0%.利用盐溶和盐析对蛋白质进行提纯后,通常要使用透析或者凝胶过滤的方法除去中性盐